【摘要】：山楂(Crataegus spp.)為薔薇科山楂屬植物,是重要的果樹資源,但由于其生長周期長,遺傳組成復雜,自交不親和等問題限制了新品種的研發(fā)進度。本研究以果實大小和果實硬度都存在顯著性差異的山楂品種‘山東大綿球’(母本)和‘新賓軟籽’(父本)創(chuàng)建雜交群體,選用130株雜交F1代為作圖群體,采用RAD測序技術開發(fā)的SNP標記構建山楂高密度分子遺傳圖譜;對作圖群體果實進行單果重、縱徑、橫徑、果皮穿刺硬度、果皮脆性和果肉平均硬度6個表型性狀的調(diào)查,并利用R/qtl軟件,選用區(qū)間QTL作圖法(IQM),對群體果實的6個性狀進行QTL定位研究。主要研究結果如下:1.從128對引物組合中篩選出兩對引物組合‘CH05e06’和‘CH03g06’用于雜交后代實生苗木真假雜種鑒定,結果表明,本研究采用的130株雜交后代單株均為真雜種。2.通過篩選獲得6384個高質(zhì)量的SNP標記位點。應用JoinMap分別繪制出雙親的遺傳圖譜及雙親整合的遺傳圖譜,三個圖譜均含有17個連鎖群。母本‘山東大綿球’的遺傳圖譜共有2656個SNP標記,覆蓋總圖距為2689.65cM,位點之間的平均遺傳距離為1.34cM,連鎖群的平均長度為158.21 cM,每個連鎖群的平均標記數(shù)為1564個;父本‘新賓軟籽’的遺傳圖譜共有4085個SNP標記,覆蓋總圖距為2558.41cM,位點之間的平均遺傳距離為0.64cM,連鎖群的平均長度為150.49cM,每個連鎖群的平均標記數(shù)為240.29個;整合圖譜中共有6384個SNP標記,覆蓋總圖距為2470.02cM,位點之間的平均遺傳距離為0.41cM,連鎖群的平均長度為145.30cM,每個連鎖群的平均標記數(shù)為375.53個3.在整合圖譜中分別檢測到與單果重相關的QTL位點2個,可解釋的表型變異率為19%和21.8%;與縱徑相關的QTL位點2個,可解釋的表型變異率為18.1%和24.3%;與橫徑相關的QTL位點1個,可解釋的表型變異率為21.4%;與果皮穿刺硬度相關的QTL位點6個,可解釋的表型變異率在17.7%-25.2%之間;與果皮脆性相關的QTL位點5個,可解釋的表型變異率在18.1%-32.2%之間;與果肉平均硬度相關的QTL位點5個,可解釋的表型變異率在18.1%-19.9%之間;本研究構建的遺傳圖譜是目前山楂屬植物中報道的分子標記數(shù)量最多的遺傳圖譜,該圖譜不僅為今后山楂重要性狀QTL精細定位奠定基礎,也將對山楂分子輔助選擇育種起到較大的促進作用。
【圖文】：

材料與方法中篩選 2 對引物用于雜種鑒定。然后對這兩對引物的溫度梯度依次為 63.0℃、62.6℃、61.7℃、60.4℃2.6℃、51.3℃、50.4℃以及 50.0℃。最后進行 PC沒有雜帶的條帶，該條帶對應的退火溫度即為最凝膠電泳及銀染顯色崗，2016）的方法，在其方法的基礎上略有改動建及測序A 進行酶切試驗。對得到的酶切片段（RAD 標簽篩選、連接 P2 測序接頭、PCR 擴增、文庫質(zhì)檢合格，測序策略為 IlluminaPE150。具體流程如圖 2-1：

沈陽農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文3 結果分析3.1 基因組 DNA 濃度及質(zhì)量檢測利用 1%瓊脂糖凝膠電脈檢測基因組 DNA 的質(zhì)量，結果顯示:DNA 主帶清晰，無拖尾現(xiàn)象，沒有嚴重糖類或蛋白污染(圖 2-1 )。對于不符合試驗要求的樣品，重新提取，保證所有樣品 DNA 濃度和質(zhì)量符合試驗標準，進一步利用分光光度計檢測，發(fā)現(xiàn) DNA濃度均大于 50 ng/uL，，OD260/280 在 1.8~2.2 之間能夠滿足接下來試驗要求，可用于進一步的試驗，然后將所有試驗樣品 DNA 稀釋至 50ng/μL,在-20℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?
【學位授予單位】：沈陽農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S661.5

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 毛先枝,王子芳;巨大DNA分子的制備與操作進展[J];微生物學通報;1989年04期

2 趙曉娟,劉金毅,孟雁,蔡有余;小鼠遺傳圖譜的應用與前景[J];國外醫(yī)學.遺傳學分冊;1998年02期

3 蘇曉華，張綺紋;林木遺傳圖譜研究的現(xiàn)狀與展望[J];林業(yè)科技通訊;1995年05期

4 張靜曉;;淺談有關遺傳圖譜題型解法[J];科學咨詢(教育科研);2008年S1期

5 DEL PIANO L.;ABET M.;SORRENTINO C.;COZZOLINO E.;CUCINIELLO A.;;ISSR標記煙屬不同種的遺傳圖譜[J];中國煙草學報;2006年01期

6 D.格拉塔佩格利阿;貝托魯西;沈中瀚;;桉樹遺傳圖譜的最新進展[J];桉樹科技;1994年02期

7 牛寶龍,翁宏飆,孟智啟,呂順霖;家蠶基因組中的分子標記遺傳圖譜[J];蠶桑通報;2002年03期

8 林鳳,楊立國,彭躍進,劉素芝;高粱遺傳圖譜初探[J];國外農(nóng)學-雜糧作物;1997年01期

9 王曉媛;;遺傳圖譜類型分析新見解[J];科學教育;2010年01期

10 ;Nature重大突破:最詳細遺傳圖譜[J];中華婦幼臨床醫(yī)學雜志(電子版);2011年04期

相關會議論文 前10條

1 黃敏仁;張博;;林木遺傳圖譜研究現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢[A];中國的遺傳學研究——中國遺傳學會第七次代表大會暨學術討論會論文摘要匯編[C];2003年

2 王英;王超;王婧菲;高和瓊;莊南生;李開綿;;木薯遺傳圖譜部分連鎖群與染色體的整合[A];2014年中國作物學會學術年會論文集[C];2014年

3 王婧菲;王英;高和瓊;莊南生;李開綿;;木薯遺傳圖譜15號連鎖群的物理定位[A];中國作物學會2013年學術年會論文摘要集[C];2013年

4 劉玉林;李英慧;李慧慧;劉章雄;劉波;宣晶;張姍姍;常汝鎮(zhèn);邱麗娟;;大豆遺傳圖譜的構建及重要農(nóng)藝性狀的QTL定位[A];第23屆全國大豆科研生產(chǎn)研討會論文摘要集[C];2012年

5 甘四明;施季森;李梅;吳坤明;吳菊英;白嘉雨;;利用RAPD標記構建尾葉桉和細葉桉基因組的中密度遺傳圖譜[A];第三屆南方林木育種研討會論文（摘要）集[C];2006年

6 周小靜;;利用高密度SNP遺傳圖譜對種子大小相關性狀的QTL定位[A];中國作物學會油料作物專業(yè)委員會第八次會員代表大會暨學術年會綜述與摘要集[C];2018年

7 馬巍;徐黎;葉俊華;楊前勇;楊利國;;AFLP技術及其在犬育種中的應用前景[A];中國畜牧獸醫(yī)學會養(yǎng)犬學分會第十二次全國養(yǎng)犬學術研討會論文集[C];2007年

8 葉光燕;王英;高和瓊;莊南生;李開綿;;木薯制片技術的優(yōu)化及遺傳標記位點特異引物的篩選[A];2014年中國作物學會學術年會論文集[C];2014年

9 張立武;劉星;陶愛芬;徐建堂;林荔輝;方平平;祁建民;;利用SSR構建圓果種黃麻遺傳圖譜[A];第三屆“模式生物與人類健康”發(fā)育遺傳學全國學術研討會論文集[C];2014年

10 張博;杜生明;黃敏仁;;林木遺傳圖譜研究現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢[A];全國作物細胞工程與分子技術育種學術研討會論文集[C];2003年

相關重要報紙文章 前3條

1 記者 李天舒;人類外顯子區(qū)域精細遺傳圖譜繪出[N];健康報;2010年

2 本報記者 齊芳;我科學家領銜繪制冰河時代歐亞人群遺傳圖譜[N];光明日報;2016年

3 記者 胡其峰;首張苧麻分子標記遺傳圖譜繪制成功[N];光明日報;2014年

相關博士學位論文 前10條

1 黃銀花;鴨遺傳圖譜的構建及重要經(jīng)濟性狀基因座的初步定位[D];中國農(nóng)業(yè)大學;2004年

2 王凱;異源四倍體棉花遺傳圖譜的構建與分子細胞遺傳學研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2006年

3 林紅;遠緣雜交法結合RAPD技術對鰱、團頭魴遺傳圖譜的構建[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2000年

4 任景;野生二粒小麥遺傳多樣性評價及條銹病抗性基因位點挖掘與分子定位[D];中國科學院研究生院（武漢植物園）;2014年

5 梁永書;超級稻協(xié)優(yōu)9308衍生群體根系的遺傳研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2011年

6 陳偉;用分子標記剖析油菜重要農(nóng)藝性狀的遺傳基礎[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2008年

7 賈慧敏;楊梅全基因組測序和雌雄性別控制遺傳分析[D];浙江大學;2016年

8 吳委林;蕪菁花青素合成依光型與紫色性狀的定位和候選基因的篩選[D];東北林業(yè)大學;2012年

9 王賢磊;甜瓜遺傳圖譜的構建與抗病基因遺傳分析[D];新疆大學;2011年

10 付曉騰;櫛孔扇貝（Chlamys farreri）高密度圖譜構建和基因組框架圖繪制[D];中國海洋大學;2014年

相關碩士學位論文 前10條

1 史曉暢;山楂高密度分子遺傳圖譜的構建及部分果實性狀的QTL定位分析[D];沈陽農(nóng)業(yè)大學;2019年

2 辛芳;小麥籽粒形狀主效QTL定位分析[D];西北農(nóng)林科技大學;2019年

3 Kirungu Nyangasi Joy;D基因組二倍體棉種D_(3-d)和D_(3-k)種間雜交種的SSR連鎖圖譜[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2018年

4 田瑞;陸地棉×黃褐棉種間遺傳圖譜加密及其染色體結構分析[D];西南大學;2018年

5 李琰;陸地棉×達爾文氏棉遺傳圖譜加密及染色體結構變異分析[D];西南大學;2018年

6 代暢;利用EST-SSR分子標記構建小麥遺傳圖譜[D];西華師范大學;2018年

7 魏家香;辣椒種間雜種創(chuàng)制、種間遺傳圖譜的構建和主要農(nóng)藝性狀OTL定位[D];浙江師范大學;2018年

8 王華杰;單性花山葡萄遺傳圖譜的構建[D];沈陽農(nóng)業(yè)大學;2017年

9 黃燕娟;三個水稻電子遺傳圖譜的構建和水稻品種指紋圖譜庫的初步研究[D];福建師范大學;2008年

10 華亞鵬;三個水稻電子遺傳圖譜的構建及水稻品種指紋圖譜庫的初步研究[D];福建農(nóng)林大學;2008年

本文編號：2682479