食品安全問題一直是我國社會民生關(guān)注的熱點問題。利用納米材料(Nanomaterials,NMs)構(gòu)建納米探針進行食品安全檢測,相比于傳統(tǒng)方法有特異性高、操作簡便、檢驗周期短、成本低和適用性廣等優(yōu)點。納米金(Gold nanoparticles,AuNPs)具有出色的物理化學和光學特性,在其表面修飾各種配體以構(gòu)建探針,用于檢測或成像各種類型的分析物。其中最常用的是AuNPs-小分子傳感器、AuNPs-蛋白傳感器、AuNPs-適配體傳感器。但是,NMs(包括AuNPs)與生物基質(zhì)之間復雜以及不可控的相互作用會影響其實際應用,因此我們認為在AuNPs周圍形成蛋白冠(Protein corona,PC)會不可避免地影響基于AuNPs探針的靶標檢測和準確定量。本文系統(tǒng)地設計了三種常用的AuNPs-非共價分子傳感器,選擇牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,BSA),牛纖維蛋白原(Fibrinogen,Fg),血紅蛋白(Hemoglobins,Hb),β-乳球蛋白(β-lactoglobulin,Lg),牛奶和胎牛血清(Fetal bovine serum,FBS)作為模型蛋白基質(zhì)...

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮寫符號對照表
第1章 緒論
    1.1 引言
    1.2 AuNPs傳感器
        1.2.1 AuNPs的簡介
        1.2.2 AuNPs-小分子傳感器
        1.2.3 AuNPs-蛋白傳感器
        1.2.4 AuNPs-適配體傳感器
    1.3 蛋白冠
        1.3.1 蛋白冠的簡介
        1.3.2 蛋白冠對NMs生物學效應的影響
        1.3.3 蛋白冠對NMs靶向作用的影響
        1.3.4 蛋白冠對靶標檢測的影響
        1.3.5 減少PC吸附的策略
    1.4 工作的出發(fā)點及主要內(nèi)容
第2章 蛋白冠對AuNPs-DCF傳感器的影響
    2.1 引言
    2.2 儀器與試劑
        2.2.1 材料與試劑
        2.2.2 儀器
    2.3 實驗方法
        2.3.1 AuNPs的制備
        2.3.2 PC的DLS表征
        2.3.3 PC的 SDS-PAGE表征
        2.3.4 結(jié)合常數(shù)與結(jié)合位點的計算
        2.3.5 AuNPs-DCF方法的建立
        2.3.6 蛋白對AuNPs-DCF方法的影響
        2.3.7 蛋白的濃度對AuNPs-DCF方法的影響
        2.3.8 蛋白濃度的測定
        2.3.9 AuNPs@PEG的合成
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 合成的AuNPs的表征
        2.4.2 PC的 DLS和 SDS-PAGE表征
        2.4.3 AuNPs與蛋白的結(jié)合常數(shù)與結(jié)合位點
        2.4.4 AuNPs-DCF方法的建立
        2.4.5 蛋白對AuNPs-DCF傳感器的背景信號的干擾
        2.4.6 蛋白對AuNPs-DCF傳感器的熒光恢復強度和熒光信號的影響
        2.4.7 蛋白吸附能力對AuNPs-DCF傳感器的影響
        2.4.8 蛋白對AuNPs-DCF傳感器的標準曲線和LOD的影響
        2.4.9 蛋白的濃度對AuNPs-DCF傳感器的影響
        2.4.10 AuNPs@PEG-DCF傳感器的性能
        2.4.11 矯正方程
    2.5 小結(jié)
第3章 蛋白冠對AuNPs-Ab-DNA傳感器的影響
    3.1 引言
    3.2 儀器與試劑
        3.2.1 材料
    3.3 實驗方法
        3.3.1 Western Blot實驗
        3.3.2 AuNPs-Ab-DNA探針的合成
        3.3.3 AuNPs-Ab-DNA方法的建立
        3.3.4 蛋白對AuNPs-Ab-DNA方法的影響
        3.3.5 蛋白濃度對AuNPs-Ab-DNA方法的影響
        3.3.6 蛋白濃度的測定
    3.4 實驗結(jié)果
        3.4.1 AuNPs-Ab-DNA方法的建立
        3.4.2 蛋白對AuNPs-Ab-DNA傳感器的背景信號的干擾
        3.4.3 蛋白對AuNPs-Ab-DNA傳感器熒光恢復強度和熒光信號的影響
        3.4.4 蛋白吸附對AuNPs-Ab-DNA傳感器的影響
        3.4.5 蛋白對AuNPs-Ab-DNA傳感器的標準曲線和LOD的影響
        3.4.6 蛋白的濃度對AuNPs-Ab-DNA傳感器的影響
        3.4.7 AuNPs@PEG-Ab-DNA傳感器的性能
        3.4.8 矯正方程
    3.5 小結(jié)
第4章 蛋白冠對AuNPs-Apt傳感器的影響
    4.1 引言
    4.2 儀器與試劑
        4.2.1 材料
    4.3 實驗方法
        4.3.1 結(jié)合常數(shù)與結(jié)合位點的計算
        4.3.2 AuNPs-Apt方法的建立
        4.3.3 蛋白對AuNPs-Apt方法的影響
        4.3.4 蛋白的濃度對AuNPs-Apt方法的影響
        4.3.5 蛋白濃度的測定
        4.3.6 隨機序列與適配體對AuNPs-Apt方法的影響
        4.3.7 AuNPs-Apt表面形成蛋白冠的SDS-PAGE表征
    4.4 實驗結(jié)果
        4.4.1 AuNPs-Apt傳感器的建立
        4.4.2 蛋白對AuNPs-Apt傳感器的背景信號的干擾
        4.4.3 蛋白對AuNPs-Apt傳感器的熒光恢復強度和熒光信號的影響
        4.4.4 蛋白對AuNPs-Apt傳感器的吸附
        4.4.5 蛋白對AuNPs-Apt傳感器的標準曲線和LOD的影響
        4.4.6 蛋白的濃度對AuNPs-Apt傳感器的影響
        4.4.7 PC對結(jié)合常數(shù)和結(jié)合位點的影響
        4.4.8 AuNPs@ PEG-Apt傳感器的性能
        4.4.9 矯正方程
        4.4.10 AuNPs-Apt傳感器的驗證
    4.5 小結(jié)
第5章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻
致謝
攻讀碩士期間研究成果



本文編號：4042253