為了探索奶牛隱性乳房炎大腸桿菌不同生長時期及不同培養(yǎng)條件下,AI-2信號分子的產(chǎn)生與lux S和pfs轉錄水平間的相互關系。應用哈維弧菌BB170,檢測奶牛隱性乳房炎致病性大腸桿菌不同分離株、不同生長期及不同培養(yǎng)條件下AI-2的活性,應用實時熒光定量PCR檢測其AI-2產(chǎn)生水平與lux S基因與pfs基因轉錄的相關性。結果表明,E285、E80814、W41、E30707和EA701205株均能產(chǎn)生AI-2分子,但產(chǎn)生的AI-2均低于陽性菌BB152; E285在遲緩期、對數(shù)前期基本沒有AI-2的表達,從對數(shù)中期開始AI-2開始大量表達,到對數(shù)后期達到頂峰,是陰性對照的12倍,隨后下降,到穩(wěn)定期已下降為陰性對照的3. 6倍。當培養(yǎng)基中添加蔗糖、麥芽糖、葡萄糖、甘露醇、Na Cl及乳糖時,AI-2的活性均明顯提高。實時熒光定量PCR結果顯示,E285在不同生長期和不同培養(yǎng)條件時,其AI-2活性的高低與lux S基因轉錄水平一致,但與pfs基因的轉錄沒有明顯關系。提示奶牛隱性乳房炎致病性大腸桿菌分離株均能產(chǎn)生AI-2分子,其AI-2活性與lux S基因轉錄水平具有高度的相關性,與pfs基因... 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 菌種
    1.2 主要試劑
    1.3 方法
        1.3.1 奶牛隱性乳房炎中大腸桿菌信號分子AI-2的制備
        1.3.2 哈維弧菌BB170的培養(yǎng)
        1.3.4 檢測奶牛隱性乳房炎的大腸桿菌不同生長時期AI-2的表達
        1.3.5 不同培養(yǎng)條件奶牛隱性乳房炎大腸桿菌的AI-2的活性檢測
        1.3.6 pfs和LuxS mRNA的水平檢測
            1.3.6. 1 引物設計
            1.3.6. 2 細菌總RNA的提取
            1.3.6. 4 Real-time PCR法檢測mRNA轉錄水平
2 結果
    2.1 不同的奶牛隱性乳房炎大腸桿菌AI-2的檢測
    2.2 不同生長時期E285株AI-2檢測
    2.3 檢測不同培養(yǎng)條件下奶牛隱性乳房炎大腸桿菌AI-2產(chǎn)生
    2.4 奶牛隱性乳房炎大腸桿菌E285株不同生長時期lux S與pfs mRNA的檢測
    2.5 E285株不同培養(yǎng)條件下luxS基因和pfs基因mRNA的分析
3討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]影響禽致病性大腸桿菌信號分子AI-2產(chǎn)生的因素分析[J]. 白灝,韓先干,劉蕾,祁克宗,劉海文,丁鏟,于圣青.  中國農(nóng)業(yè)科學. 2013(15)
[2]LuxS/AI-2對傷寒沙門菌基因表達的調(diào)節(jié)[J]. 羅哲,王敏,杜鴻,王菲,孟彥辰,倪斌,徐順高,黃新祥.  江蘇大學學報(醫(yī)學版). 2011(01)

碩士論文
[1]密度感應系統(tǒng)對弗氏志賀菌生長競爭能力的影響[D]. 徐蘋.上海海洋大學 2015



本文編號：3703340