本文關(guān)鍵詞：甘蔗及其根際土壤固氮菌的分離和特性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：本研究采用無(wú)氮選擇培養(yǎng)基從甘蔗及其根際土壤中篩選內(nèi)生固氮菌和自生固氮菌。通過(guò)乙炔還原法測(cè)固氮酶活性;根據(jù)16S rDNA序列分析確定其系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系;采用Salkowski比色法測(cè)其產(chǎn)生長(zhǎng)素能力,Biolog板測(cè)定碳源利用情況,使用透明圈法定性測(cè)溶磷解鉀能力;對(duì)固氮活性較高兼具備良好生理生化特性的菌株采用活菌計(jì)數(shù)法進(jìn)行了培養(yǎng)條件優(yōu)化;并在每一屬中選一個(gè)代表菌株采用盆栽方式進(jìn)行水稻和玉米幼苗促生特性研究。主要得出以下研究結(jié)果:研究發(fā)現(xiàn)分離的35株固氮菌中,g1固氮酶活性最高,達(dá)1111.36 nmol/(mL·h),g7、g6、g116、g98固氮酶活性比較高,超過(guò)500nmol/(mL·h),t108固氮酶活性最低為75.37nmol/(mL·h)。單從固氮酶活性來(lái)看,分離的具有高效固氮能力的優(yōu)良菌株較多。各菌株分別屬于節(jié)細(xì)菌屬、芽孢桿菌屬、克雷伯氏菌屬、草螺菌屬、鞘氨醇單胞菌屬、解鳥(niǎo)氨酸拉烏爾菌屬、泛菌屬、勞爾特氏菌屬。9個(gè)屬中分離到菌株最多的屬是克雷伯氏菌屬14株和芽孢桿菌屬8株。其中克雷伯氏菌屬菌株固氮酶活性最高,芽孢桿菌屬菌株固氮酶活性最低。對(duì)固氮菌進(jìn)行了生理生化特性研究,獲得了9株具有較好的產(chǎn)生生長(zhǎng)素能力的固氮菌,達(dá)到20.03~384.13mg/L。菌株b310、t134、g1、g7、g172具有較強(qiáng)的溶磷能力。對(duì)所有菌株進(jìn)行了液體培養(yǎng),測(cè)得t98、g1、g7、g172、g12、g24活菌數(shù)最高,以g24、g12、t98為代表進(jìn)行培養(yǎng)條件優(yōu)化,g24、g12、t98的活菌數(shù)分別達(dá)到8.8×109CFU/mL,6.1×109CFU/mL,1.25×1010CFU/mL。研究固氮菌對(duì)水稻和玉米幼苗生長(zhǎng)的影響結(jié)果表明,8個(gè)代表菌株對(duì)水稻和玉米的株高、干重、鮮重、發(fā)芽率等都有顯著影響。微生物肥料中有益微生物的種類(lèi),活菌數(shù)量直接影響其肥效的好壞。本研究豐富了固氮菌種質(zhì)資源,為微生物肥料生產(chǎn)提供了優(yōu)良的功能菌株。
【關(guān)鍵詞】：甘蔗 土壤 微生物肥料 固氮菌 生理特性
【學(xué)位授予單位】：華南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：S566.1;S154.3
【目錄】：

• 摘要3-4
• Abstract4-9
• 1 文獻(xiàn)綜述9-23
• 1.1 微生物肥料9-16
• 1.1.1 微生物肥料的概念和特點(diǎn)9
• 1.1.2 微生物肥料的分類(lèi)及功效9-11
• 1.1.3 微生物肥料的研究意義11-12
• 1.1.4 目前微生物肥料的研究進(jìn)展12-13
• 1.1.5 中國(guó)微生物肥料存在的主要問(wèn)題13-14
• 1.1.6 微生物肥料的發(fā)展對(duì)策14-15
• 1.1.7 微生物肥料前景展望與發(fā)展趨勢(shì)15-16
• 1.2 內(nèi)生固氮菌16-21
• 1.2.1 內(nèi)生固氮菌的定殖和固氮機(jī)理18
• 1.2.2 生物固氮資源的發(fā)掘18-19
• 1.2.3 植物內(nèi)生固氮菌在綠色農(nóng)業(yè)生產(chǎn)建設(shè)中的應(yīng)用19-20
• 1.2.4 需要解決的理論和技術(shù)問(wèn)題20-21
• 1.2.5 植物內(nèi)生固氮菌研究的展望21
• 1.3 研究意義21-23
• 2 材料與方法23-31
• 2.1 內(nèi)生固氮菌的分離23-24
• 2.1.1 培養(yǎng)基23
• 2.1.2 內(nèi)生固氮菌的分離23-24
• 2.2 固氮菌株的鑒定24-26
• 2.2.1 乙炔還原法測(cè)定固氮酶活性24-25
• 2.2.2 固氮菌株DNA水平鑒定25-26
• 2.3 固氮菌生理生化特性研究26-27
• 2.3.1 分泌植物生長(zhǎng)素測(cè)定26-27
• 2.3.2 碳源利用測(cè)定27
• 2.3.3 溶磷能力定性試驗(yàn)27
• 2.3.4 溶鉀能力定性試驗(yàn)27
• 2.4 固氮菌培養(yǎng)條件優(yōu)化27-29
• 2.4.1 生長(zhǎng)曲線測(cè)定28
• 2.4.2 初始pH對(duì)菌體生長(zhǎng)的影響28
• 2.4.3 培養(yǎng)溫度對(duì)菌體生長(zhǎng)的影響28
• 2.4.4 轉(zhuǎn)速對(duì)菌體生長(zhǎng)的影響28-29
• 2.4.5 三種配方對(duì)菌體生長(zhǎng)的影響29
• 2.5 促生試驗(yàn)29-31
• 2.5.1 水稻盆栽試驗(yàn)29
• 2.5.2 玉米盆栽試驗(yàn)29-31
• 3 結(jié)果31-46
• 3.1 內(nèi)生固氮菌的分離純化結(jié)果31
• 3.2 內(nèi)生固氮菌的固氮酶活性測(cè)定結(jié)果31-33
• 3.3 固氮菌的分類(lèi)鑒定結(jié)果33-36
• 3.4 內(nèi)生固氮菌的生理生化特性36-39
• 3.4.1 生長(zhǎng)素測(cè)定結(jié)果36-37
• 3.4.2 碳源利用測(cè)定結(jié)果37-38
• 3.4.3 溶磷解鉀試驗(yàn)38-39
• 3.5 固氮菌培養(yǎng)條件的優(yōu)化39-43
• 3.5.1 菌株生長(zhǎng)曲線39-40
• 3.5.2 轉(zhuǎn)速對(duì)發(fā)酵液菌量的影響40-41
• 3.5.3 溫度對(duì)發(fā)酵液菌量的影響41
• 3.5.4 起始pH對(duì)發(fā)酵液菌量的影響41-42
• 3.5.5 三種配方對(duì)發(fā)酵液菌量的影響42-43
• 3.5.6 最終優(yōu)化結(jié)果43
• 3.6 促生試驗(yàn)結(jié)果43-46
• 4 討論與結(jié)論46-50
• 4.1 內(nèi)生固氮菌的分離鑒定46-47
• 4.2 固氮菌生理生化特性47-48
• 4.2.1 固氮菌的解磷特性47
• 4.2.2 固氮菌產(chǎn)生長(zhǎng)素特性47
• 4.2.3 固氮菌碳源利用特性47-48
• 4.3 固氮菌培養(yǎng)條件優(yōu)化48
• 4.4 固氮菌發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)水稻和玉米生長(zhǎng)的影響48-50
• 致謝50-51
• 參考文獻(xiàn)51-55
• 附錄55-65

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：285637