萊氏野村菌[Nomuraea rileyi(Farlow)Samson]是一種重要的昆蟲病原真菌,在田間可以自然感染多種鱗翅目害蟲,引起害蟲域內(nèi)流行病,在生物防治中起到重要的作用,具有潛在的生物農(nóng)藥應(yīng)用前景。但萊氏野村菌殺蟲劑也存在防效緩慢、易受到環(huán)境因素的制約和干擾、產(chǎn)品有效期短、質(zhì)量穩(wěn)定性較差等缺點。因此通過基因工程的手段,利用有效的殺蟲靶標(biāo)對原有菌株進行改良,構(gòu)建高效安全而且環(huán)境友好的的殺蟲工程菌已成為當(dāng)前該領(lǐng)域研究的重中之重。而作為實現(xiàn)該目標(biāo)的前期工作基礎(chǔ),尋找有效殺蟲靶標(biāo)、研究萊氏野村菌侵染害蟲的分子機制以及真菌侵染與害蟲免疫的互作關(guān)系、探明殺蟲機理,無論是在闡明萊氏野村菌抵御害蟲免疫機制的基礎(chǔ)理論研究方面,還是在殺蟲靶標(biāo)基因的現(xiàn)實應(yīng)用方面都有著重要的意義。論文以研究萊氏野村菌侵染夜蛾科害蟲斜紋夜蛾的分子機理,并提高萊氏野村菌的生防效果為主要目的,嘗試多種方法和途徑展開研究。取得的研究結(jié)果如下:(1)萊氏野村菌注射侵染斜紋夜蛾血淋巴后,分離獲得處于不同發(fā)育時期的蟲菌體,利用DD-RT-PCR差異顯示技術(shù),共獲得42條差異表達的片段。BlastX比對分析并結(jié)合轉(zhuǎn)錄組分析結(jié)果表明,...

【文章頁數(shù)】：152 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖1.1n-3和n-6類型不飽和脂肪酸合成示意圖（FromKEGG）

16圖1.1n-3和n-6類型不飽和脂肪酸合成示意圖（FromKEGG）Fig.1.1Biosynthesisofunsaturatedfattyacid（FromKEGG）氏野村菌中，有多個不飽和酸合成相關(guān)的酶，在本研究中，Δ6-脂肪酸氏野村菌侵染斜紋....

圖2.1萊氏野村菌不同侵染時期芽生孢子在斜紋夜蛾血淋巴中的生長變化情況

圖2.1萊氏野村菌不同侵染時期芽生孢子在斜紋夜蛾血淋巴中的生長變化情況Fig.2.1BlastosporesofNomuraearilieyiofdifferentinfectionintervalsgrewintheSpodopteralitura....

圖2.2從斜紋夜蛾血淋巴中分離萊氏野村菌蟲菌體，SDS和蛋白酶K處理前后的效果對比圖

34圖2.2從斜紋夜蛾血淋巴中分離萊氏野村菌蟲菌體，SDS和蛋白酶K處理前后的效果對比圖（A）處理前；（B）處理后（Scalebar:20μm.）Fig2.2BlastosporesofNomuraearileyiwereisolatedfrom....

圖2.3利用內(nèi)參引物PCR擴增cDNA，檢測gDNA的污染情況

2利用差異顯示技術(shù)研究萊氏野村菌侵染斜紋夜蛾血淋巴不同時期差異表達基因CQNr01孢子懸液侵染斜紋夜蛾后，收集血淋巴，12000rpm離心，收集沉浮在裂解液中，裂解液中加入10%SDS和蛋白酶K至終濃度為1%和1.5L-1，28°C消化25min消化....

本文編號：4047356