目的探討OIP5-AS1基因?qū)Ψ切〖?xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)細(xì)胞化學(xué)敏感性的作用及分子機(jī)制。方法采用CCK-8法檢測(cè)正常肺細(xì)胞系BEAS-2B、肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549和順鉑耐藥肺癌細(xì)胞A549/DDP的半抑制濃度(IC50)值。應(yīng)用RT-qPCR檢測(cè)OIP5-AS1、miR-7-5p和PARP1的表達(dá)水平。生物信息學(xué)檢測(cè)OIP5-AS1、miR-7-5p和PARP1的靶向關(guān)系,用熒光素實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證。Western blot法檢測(cè)相關(guān)蛋白的表達(dá);流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況;克隆形成檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況。結(jié)果 A549/DDP細(xì)胞中IC50值最高,且OIP5-AS1高表達(dá),miR-7-5p低表達(dá)。miR-7-5p是OIP5-AS1的靶向調(diào)節(jié)基因之一,且為負(fù)調(diào)控關(guān)系。敲除OIP5-AS1抑制A549/DDP細(xì)胞的生長(zhǎng)并增強(qiáng)化學(xué)敏感性,促進(jìn)A549/DDP細(xì)胞凋亡。敲除OIP5-AS1下調(diào)PARP1可以增強(qiáng)A549/DDP細(xì)胞的化學(xué)敏感性,抑制NSCLC的生長(zhǎng)和凋亡。結(jié)論 OIP5-AS1通過(guò)上調(diào)miR-7-5p或下調(diào)PARP1,增強(qiáng)A549/DD...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染
        1.2.2 CCK-8
        1.2.3 RT-qPCR檢測(cè)OIP5-AS1、miR-7-5p和PARP1的表達(dá)水平
        1.2.4 雙熒光素酶報(bào)告分析
        1.2.5 克隆形成檢測(cè)
        1.2.6 Western blot法
        1.2.7 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 A549/DDP細(xì)胞中OIP5-AS1、miR-7-5p、PARP1的表達(dá)
    2.2 OIP5-AS1和miR-7-5p的靶向關(guān)系
    2.3 敲除OIP5-AS1對(duì)A549/DDP細(xì)胞IC50值的影響
    2.4 敲除OIP5-AS1對(duì)A549/DDP細(xì)胞生長(zhǎng)的影響
    2.5 敲除OIP5-AS1后Ki-67、PCNA、MDR1蛋白表達(dá)
    2.6 敲除OIP5-AS1對(duì)A549/DDP細(xì)胞凋亡的影響
    2.7 敲除OIP5-AS1后Bax、BCL-2蛋白表達(dá)
    2.8 敲除OIP5-AS1調(diào)節(jié)miR-7-5p/PARP1軸增強(qiáng)A549/DDP細(xì)胞的化學(xué)敏感性
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