【目的】木葡聚糖內(nèi)轉(zhuǎn)糖苷酶(XTH)與細(xì)胞壁的生理活動(dòng)及抗逆性密切相關(guān)。課題組前期對(duì)干旱脅迫下大豆轉(zhuǎn)錄組的結(jié)果進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)大豆Glyma.13G095000(GmXTH23)基因是一個(gè)編碼木葡聚糖內(nèi)轉(zhuǎn)糖苷酶(XTH)的基因,基于GmXTH23基因表達(dá)量受干旱脅迫影響顯著的事實(shí),通過(guò)生物信息學(xué)、表達(dá)模式分析及抗性鑒定試驗(yàn)等研究,為進(jìn)一步探究GmXTH23基因的功能提供依據(jù),為大豆抗逆的遺傳改良提供理論參考。【方法】以墾豐16大豆為試驗(yàn)材料克隆GmXTH23基因;利用qRT-PCR方法探究基因的表達(dá)模式;利用基因槍法進(jìn)行亞細(xì)胞定位;將GmXTH23基因轉(zhuǎn)入擬南芥中,并進(jìn)行干旱脅迫下的表型試驗(yàn);用茚三酮比色法測(cè)定游離脯氨酸含量,氮藍(lán)四唑法測(cè)定超氧化物歧化酶含量,硫代巴比妥酸比色法測(cè)定丙二醛含量�！窘Y(jié)果】GmXTH23在大豆各組織中皆有表達(dá),在莖中的表達(dá)量最高;亞細(xì)胞定位的結(jié)果表明該基因蛋白定位于細(xì)胞膜上;干旱脅迫下的表型試驗(yàn)結(jié)果表明,過(guò)表達(dá)GmXTH23基因的擬南芥植株發(fā)芽率、根長(zhǎng)皆高于野生型擬南芥,復(fù)水后恢復(fù)正常的植株比例也相對(duì)較高;過(guò)表達(dá)株系與野生型株系相比其PRO含量與SOD含量較高...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 試驗(yàn)材料
        1.1.1 植物材料
        1.1.2 主要試劑
    1.2 方法
        1.2.1 大豆基因Gm XTH23的克隆
        1.2.2 Gm XTH23基因的組織表達(dá)及脅迫下的表達(dá)模式分析
        1.2.3 Gm XTH23蛋白亞細(xì)胞定位
        1.2.4 Gm XTH23的遺傳轉(zhuǎn)化
        1.2.5 表型試驗(yàn)
        1.2.6 相關(guān)指標(biāo)測(cè)定
2 結(jié)果分析
    2.1 基因Gm XTH23的克隆及表達(dá)載體構(gòu)建
    2.2 基因Gm XTH23不同組織和逆境脅迫下表達(dá)模式分析
    2.3 Gm XTH23蛋白的亞細(xì)胞定位
    2.4 轉(zhuǎn)基因Gm XTH23擬南芥抗旱性鑒定
    2.5 相關(guān)生理指標(biāo)的測(cè)定
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