Neurexins是突觸前膜細胞黏附分子,參與神經(jīng)元和腦回路的跨突觸信號傳遞,其基因表達水平的調(diào)控密切影響著突觸可塑性和特異性。為分析NRXN2α基因轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控,該研究構(gòu)建了含有NRXN2α基因5′端不同區(qū)域的熒光素酶報告基因質(zhì)粒,轉(zhuǎn)染HEK293和U-87 MG細胞并檢測雙熒光素酶報告基因的表達水平,該研究確定了具有較強轉(zhuǎn)錄活性的NRXN2α基因啟動子區(qū)域–911/+60(轉(zhuǎn)錄起始位點為+1),并鑒定了具有基礎(chǔ)轉(zhuǎn)錄活性的最小啟動子區(qū)域–58/+60,以及4個正向調(diào)控功能區(qū)域–911/–629、–109/–76、–49/–17、–17/+60,和1個負向調(diào)控功能區(qū)域+146/+238。最小啟動子區(qū)域序列分析鑒定了1個典型的核心啟動子元件initiator(Inr)�？傊�,該研究首次克隆了NRXN2α基因的啟動子區(qū)域并進行了功能分析,為進一步闡明轉(zhuǎn)錄調(diào)控機制和加深對突觸可塑性的理解奠定了基礎(chǔ)。

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圖1NRXN2α基因啟動子區(qū)域的克隆和驗證

2.5NRXN2α基因最小啟動子區(qū)域包含典型的核心啟動子元件Inr為了確定NRXN2α基因最小啟動子區(qū)域是否含有典型的核心啟動子元件,我們對–58/+60片段進行了更詳盡的分析。目前已知的核心啟動子元件包括起始子(initiator,Inr,共識序列為bbcabw)、TATA盒....

圖3NRXN2α基因啟動子3′側(cè)翼刪切質(zhì)粒的熒光素酶活性測定結(jié)果

圖2NRXN2α基因啟動子5′側(cè)翼刪切質(zhì)粒的熒光素酶活性測定結(jié)果圖4確定NRXN2α最小啟動子區(qū)域

圖4確定NRXN2α最小啟動子區(qū)域

圖3NRXN2α基因啟動子3′側(cè)翼刪切質(zhì)粒的熒光素酶活性測定結(jié)果3討論

圖2NRXN2α基因啟動子5′側(cè)翼刪切質(zhì)粒的熒光素酶活性測定結(jié)果

為了確定NRXN2α基因最小啟動子區(qū)域是否含有典型的核心啟動子元件,我們對–58/+60片段進行了更詳盡的分析。目前已知的核心啟動子元件包括起始子(initiator,Inr,共識序列為bbcabw)、TATA盒(TATAbox,共識序列為tatawaar)、上游TFIIB識別....

本文編號：3994539