1,5二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(1,5 ribulose bisphosphate carboxylase/oxygenase, Rubisco)為綠色植物光合碳同化的關(guān)鍵酶,其結(jié)構(gòu)上的小亞基(Rubisco small subuni, RbcS)影響著Rubisco全酶的功能。本實(shí)驗(yàn)以玉米(Zea mays)自交系B73為材料,首先對(duì)葉片進(jìn)行DNA和RNA的提取,擴(kuò)增ZmRbcS1基因(GenBank No. 542212)的啟動(dòng)子序列并進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析,同時(shí)對(duì)該基因的ORF進(jìn)行擴(kuò)增及載體構(gòu)建,并進(jìn)行亞細(xì)胞定位;通過PlantCARE數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)啟動(dòng)子進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)該啟動(dòng)子序列上除大量保守光調(diào)控元件外(如G-box、GATA-motif、I-box、RbcS-CMA7c等),還含有多種應(yīng)答干旱、激素等逆境因子的保守順式作用元件(如干旱誘導(dǎo)響應(yīng)元件(drought-induced response element, MBS)、赤霉素響應(yīng)元件(gibberellinresponsive element, P-box)、茉莉酸響應(yīng)元件(jasmonic acid response element...

【文章頁數(shù)】：11 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料和菌種
    1.2 總RNA提取、c DNA合成、基因克隆及亞細(xì)胞定位
    1.3 DNA的提取及Zm Rbc S1啟動(dòng)子擴(kuò)增
    1.4 序列分析
    1.5 載體的構(gòu)建及農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化
    1.6 GUS染色及活性分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 玉米Zm Rbc S1基因亞細(xì)胞定位載體的構(gòu)建和鑒定
    2.2 轉(zhuǎn)基因煙草葉片的激光共聚焦顯微鏡觀察
    2.3 Zm Rbc S1基因啟動(dòng)子的分離及序列分析
    2.4 植物表達(dá)載體的構(gòu)建
    2.5 啟動(dòng)子活性的檢測(cè)
3 討論
4 結(jié)論



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