發(fā)布時間：2022-03-09 13:08

　　目的:研究miR-199b-5p在足細(xì)胞凋亡過程中的功能及miR-199b-5p過表達(dá)足細(xì)胞中的基因表達(dá)譜特征,探討足細(xì)胞凋亡的潛在分子機(jī)制。方法:體外培養(yǎng)小鼠足細(xì)胞,用lipofectamine 2000分別在小鼠足細(xì)胞中瞬時轉(zhuǎn)染miR-199b-5p過表達(dá)質(zhì)粒（miR-199b-5p mimics）、miR-199b-5p過表達(dá)質(zhì)粒陰性對照（NC）組。用qRT-PCR檢測miR-199b-5p在足細(xì)胞中表達(dá)水平。用流式細(xì)胞儀檢測足細(xì)胞凋亡的變化。運(yùn)用高通量測序分析轉(zhuǎn)染miR-199b-5p mimics后足細(xì)胞中差異表達(dá)基因,并對miR-199b-5p靶基因進(jìn)行基因功能（GO）富集分析和信號通路（Pathway）富集分析。結(jié)果:qRT-PCR結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染miR-199b-5p mimics足細(xì)胞中miR-199b-5p表達(dá)水平較對照組升高（P <0. 05）。流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示,NC組細(xì)胞凋亡率（32. 97±1.45）%,轉(zhuǎn)染mimics組細(xì)胞凋亡率（25.51±0.94）%較對照組下降（P<0.05）。高通量測序發(fā)現(xiàn),過表達(dá)miR-199b-5p足細(xì)胞中有10... 

【文章來源】：皖南醫(yī)學(xué)院學(xué)報. 2018,37(06)

【文章頁數(shù)】：4 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗材料
    1.2 實(shí)驗方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        1.2.3 RNA提取及qRT-PCR細(xì)胞轉(zhuǎn)染48 h后, 按Trizol試劑盒說明書操作, 每孔加0.5 m L Trizol提取NC組和mimics組細(xì)胞的總RNA。
        1.2.4 流式Annexin V-PE/7-AAD檢測足細(xì)胞凋亡
        1.2.5 RNA高通量測序
    1.3 統(tǒng)計分析
2 結(jié)果
    2.1 轉(zhuǎn)染miR-199b-5p mimics后足細(xì)胞中miR-199b-5p的表達(dá)
    2.2 過表達(dá)miR-199b-5p對足細(xì)胞凋亡的影響
    2.3 基因表達(dá)譜變化
    2.4 基因功能富集分析
3 討論



本文編號：3645723