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中華蜜蜂(Apis cerana)毒液生物活性研究及其蜂針療法對實驗性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎小鼠的治療作用

發(fā)布時間:2017-05-23 19:17

  本文關(guān)鍵詞:中華蜜蜂(Apis cerana)毒液生物活性研究及其蜂針療法對實驗性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎小鼠的治療作用,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:到目前為止,類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis RA)的致病機(jī)制仍未厘清,它是一種慢性病,炎性滑膜炎是其主要的臨床表現(xiàn),屬于自身免疫疾病。RA的特征是出現(xiàn)侵襲性和對稱性的關(guān)節(jié)炎癥,往往是手、足小關(guān)節(jié)的多關(guān)節(jié),可以導(dǎo)致關(guān)節(jié)畸形及功能喪失。RA病程長,且致殘率高,發(fā)病一年內(nèi)致殘率20%,10年內(nèi)可達(dá)60%。近年來,類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎發(fā)病率呈上升趨勢,例如,中國RA的發(fā)病率為0.37%,發(fā)達(dá)國家的發(fā)病率為1%。由于RA本身的病理特點,加大了治療難度,同時加重了患者及患者家庭生理、心理和經(jīng)濟(jì)上的負(fù)擔(dān)。因此,對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎進(jìn)行早期的診斷和治療顯得尤其重要。蜜蜂蜂針治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎在中西醫(yī)療史上均有記載,蜂針療法具有“廉”、“便”、“靈”的特點。目前,對于蜂針療法研究報道主要是臨床療效研究,缺少蜂針療法對機(jī)體整體作用機(jī)制的研究;其次,蜂針療法的的操作過程、過敏測定和毒性反應(yīng)的判斷沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn),治療沒有系統(tǒng)的方案;再則,治療效果因人而異以及對治療效果的評估缺少科學(xué)、客觀的標(biāo)準(zhǔn)。因此,研究蜂針治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎是非常必要和重要的。本研究采用生物化學(xué)和藥理學(xué)的方法和技術(shù),分析測試中華蜜蜂(Apis cerana)毒液的理化性質(zhì)及其生物(或藥理)活性;再通過檢測小鼠血清中的TNF-α和IL-6,測定小鼠的脾和胸腺臟器指數(shù)以及觀察小鼠踝關(guān)節(jié)病理切片,考量中華蜜蜂蜂針療法對兩種實驗性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎小鼠的治療作用。我們實驗表明,重慶地區(qū)產(chǎn)的中華蜜蜂毒液單只守衛(wèi)蜂蜂毒蛋白平均含量為256.3μg;磷脂酶活性為56.79U/mg;透明質(zhì)酸酶活性為16.33U/mg;對金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌的最低抑制濃度分別為1.53μg/m L,0.42μg/mL,26.3μg/mL;在溶血活性方面,達(dá)到50%溶血時,蜂毒濃度是8.33μg/mL。動物模型實驗表明,蜂針療法可以顯著地降低佐劑(AA)、Ⅱ型膠原蛋白(CIA)誘導(dǎo)的的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎小鼠血清中TNF-α和IL-6的含量,減輕小鼠組織腫脹度,降低胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù);同時對踝關(guān)節(jié)具有明顯的保護(hù)作用。這些結(jié)果提示了中華蜜蜂蜂針療法治療AA和CIA小鼠是有效的。另外,通過比較蜂針留在小鼠身體上的時間,發(fā)現(xiàn)留針時間為5 min時,其治療的性價比最高。綜上所述,中華蜜蜂毒液具有較強(qiáng)的抗菌能力和溶血能力。通過對兩種實驗性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎小鼠模型進(jìn)行蜂針治療,肯定了使用中華蜜蜂蜂針療法對實驗性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎具有療效,但是治療作用機(jī)制還需要進(jìn)一步的研究。
【關(guān)鍵詞】:中華蜜蜂 蜂針療法 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎動物模型
【學(xué)位授予單位】:重慶師范大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R259
【目錄】:
  • 中文摘要5-7
  • 英文摘要7-11
  • 1 引言11-15
  • 1.1 研究的目的和意義11-13
  • 1.2 本研究的主要內(nèi)容13-14
  • 1.2.1 中華蜜蜂毒液的制備13
  • 1.2.2 中華蜜蜂粗毒蛋白質(zhì)含量及其生物活性的測定13
  • 1.2.3 中華蜜蜂蜂療對小鼠實驗性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎模型的治療作用13-14
  • 1.3 本研究的技術(shù)路線14-15
  • 2 中華蜜蜂毒液的制備及理化性質(zhì)15-23
  • 2.1 主要儀器與設(shè)備15
  • 2.2 材料與試劑15-17
  • 2.2.1 藥品16
  • 2.2.2 試劑及配置16-17
  • 2.3 方法與步驟17-19
  • 2.3.1 中華蜜蜂毒液的制備17
  • 2.3.2 蜜蜂毒液蛋白質(zhì)含量的測定17-18
  • 2.3.3 中華蜜蜂毒液磷脂酶A2活性測定18-19
  • 2.3.4 中華蜜蜂毒液透明質(zhì)酸酶的活性測定19
  • 2.3.5 中華蜜蜂毒液抗菌活性測定19
  • 2.3.6 中華蜜蜂毒液溶血活性測定19
  • 2.4 結(jié)果19-21
  • 2.4.1 蜜蜂蜂毒蛋白含量的測定19-20
  • 2.4.2 中華蜜蜂毒液磷脂酶A2活性測定20
  • 2.4.3 中華蜜蜂毒液透明質(zhì)酸酶活性測定20
  • 2.4.4 中華蜜蜂毒液抗菌活性測定20-21
  • 2.4.5 中華蜜蜂毒液的溶血活性測定21
  • 2.5 討論21-23
  • 3 中華蜜蜂毒液對實驗性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎小鼠的治療作用23-45
  • 3.1 主要儀器與設(shè)備23
  • 3.2 材料與試劑23-25
  • 3.2.1 藥品24
  • 3.2.2 藥品配置24-25
  • 3.3 方法與步驟25-28
  • 3.3.1 小鼠類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎模型的制備25
  • 3.3.2 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎小鼠的治療25
  • 3.3.3 小鼠足跖腫脹度的測定25-26
  • 3.3.4 小鼠炎癥因子及類風(fēng)濕因子的測定26-27
  • 3.3.5 小鼠脾、胸腺臟器系數(shù)檢測27
  • 3.3.6 小鼠關(guān)節(jié)組織切片的觀察27-28
  • 3.4 實驗結(jié)果28-42
  • 3.4.1 小鼠足跖腫脹度變化測定28-33
  • 3.4.2 小鼠腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的測定33-37
  • 3.4.3 小鼠白細(xì)胞介素-6(IL-6)的測定37-40
  • 3.4.4 小鼠脾臟、胸腺系數(shù)的測定40-42
  • 3.4.5 小鼠關(guān)節(jié)切片42
  • 3.5 討論42-45
  • 4 全文小結(jié)45-47
  • 5 文獻(xiàn)綜述47-55
  • 5.1 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎診斷標(biāo)準(zhǔn)47-48
  • 5.1.1 美國風(fēng)濕病學(xué)會(ACR)1987分類標(biāo)準(zhǔn)47
  • 5.1.2 中醫(yī)證候分型標(biāo)準(zhǔn)47-48
  • 5.2 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的治療48-50
  • 5.2.1 西醫(yī)治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎48
  • 5.2.2 中醫(yī)治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎48-49
  • 5.2.3 中西結(jié)合治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎49-50
  • 5.2.4 其它療法50
  • 5.3 中華蜜蜂50-52
  • 5.4 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎模型研究進(jìn)展52-55
  • 5.4.1 單純疾病模型52-53
  • 5.4.2 抗CⅡ抗體誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎( CAIA) 模型53
  • 5.4.3 抗血清轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎( STIA) 模型53
  • 5.4.4 鏈球菌誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎模型53
  • 5.4.5 病癥結(jié)合模型53-55
  • 參考文獻(xiàn)55-62
  • 附錄62-64
  • 致謝64

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 朱金明;蜂針治愈怪癥[J];蜜蜂雜志;2003年11期

2 趙憲朝 ,趙凌羅;蜂針真奇妙 患者稱神效[J];養(yǎng)蜂科技;2003年03期

3 李萬瑤;間隔一定時間后用蜂針治療的探討[J];中國養(yǎng)蜂;2005年03期

4 魏明珠;蜂針在傳統(tǒng)醫(yī)療上的應(yīng)用[J];蜜蜂雜志;2005年06期

5 李萬瑤;施景中;;蜂針刺激表皮疼痛的防治[J];針灸臨床雜志;2005年12期

6 戴耀宗;;蜂針治頑疾[J];蜜蜂雜志;2006年05期

7 朱澤顯;;如何加速蜂針療效[J];中國蜂業(yè);2006年11期

8 孫s

本文編號:388864


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