【摘要】：研究背景阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征(Obstructive Sleep Apnea Hypopnea Syndrome,OSAHS)是一種臨床常見的睡眠障礙疾病,與多種慢性病的發(fā)生率及病死率相關(guān),對(duì)人體造成很大的危害。OSAHS常合并多系統(tǒng)合并癥,近年來其合并癥也逐漸受到人們重視,尤其心血管疾病,此外可以進(jìn)一步誘發(fā)心血管疾病的高脂血癥、動(dòng)脈硬化也逐漸被關(guān)注,OSAHS與合并癥常互相影響,加重了患者身體及經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。目前OSAHS患者的治療方式以佩戴呼吸機(jī)聯(lián)合運(yùn)動(dòng)療法為主,但仍有一部分患者控制不佳,合并癥、并發(fā)癥控制較差,而中醫(yī)藥治療OSAHS對(duì)患者進(jìn)行整體論治,對(duì)原發(fā)病、合并癥、并發(fā)癥均干預(yù),取得了很好的療效,且副作用小,可有效改善患者癥狀。但目前也存在著中醫(yī)辨證分型尚不規(guī)范,OSAHS其合并癥中醫(yī)證型研究資料有限的問題。高脂血癥是由于脂質(zhì)代謝或運(yùn)轉(zhuǎn)異常所致的病癥,它可以通過引起全身的動(dòng)脈粥樣硬化從而導(dǎo)致冠心病、腦梗以及周圍血管疾病等動(dòng)脈硬化性疾病,危害人體健康。它常與OSAHS相伴發(fā),兩者相互影響,相互加重。常用的降脂藥存在影響肝功能、導(dǎo)致肌炎和肌病的風(fēng)險(xiǎn),聯(lián)合用藥可能增加了這些不良反應(yīng)的出現(xiàn),中醫(yī)藥治療降脂療效顯著,還具協(xié)同西藥的降脂作用、減少其臨床用量及毒副作用等優(yōu)點(diǎn)。祖國醫(yī)學(xué)認(rèn)為高脂血癥屬“痰濁”、“瘀血”等范疇,而動(dòng)脈硬化、OSAHS病機(jī)中亦有痰濁、瘀血,痰瘀互結(jié)證是其常見的證型。痰瘀同治法是其共同的治法,中藥丹萎片是痰瘀同治的代表方之一,具有調(diào)節(jié)血脂、改善動(dòng)脈硬化、治療心腦血管疾病的作用,但其對(duì)OSAHS誘導(dǎo)的高脂血癥、動(dòng)脈硬化是否有效尚需進(jìn)一步研究。OSAHS主要病理機(jī)制是慢性間歇性缺氧(Chronic Intermittent Hypoxia,CIH),它可以引起代謝紊亂,導(dǎo)致血脂異常、動(dòng)脈硬化,誘發(fā)心腦血管疾病的發(fā)生發(fā)展�，F(xiàn)代研究CIH可通過HIF-1-Angptl4信號(hào)通路導(dǎo)致血脂異常、動(dòng)脈硬化。以往研究已證實(shí)丹萎片具有抗炎、保護(hù)血管內(nèi)皮、抗動(dòng)脈硬化等作用,而適用于OSAHS誘導(dǎo)的血脂異常、動(dòng)脈硬化,但其療效及作用機(jī)制尚不清楚。本研究通過對(duì)載脂蛋白E(Apolipoprotein E,ApoE)--小鼠動(dòng)脈硬化(Arteriosclerosis,AS)模型進(jìn)行CIH處理,觀察HIF-1-Angptl4信號(hào)通路以及該通路可能上游靶點(diǎn)FIH-1在CIH誘導(dǎo)AS過程中的作用,同時(shí)給予丹萎片干預(yù),觀察其干預(yù)效果,并探索其干預(yù)間歇性低氧誘導(dǎo)動(dòng)脈硬化、血脂異常的機(jī)制。第一部分:阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征及其合并癥中醫(yī)證型規(guī)律研究目的:本研究通過回顧性研究對(duì)住院OSAHS患者進(jìn)行病史、合并癥及中醫(yī)證型采集,分析OSAHS和合并癥中醫(yī)證型特點(diǎn)、分布規(guī)律,及其與睡眠監(jiān)測結(jié)果的關(guān)系。方法:采用單中心、回顧性研究,納入中國中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院2014年1月至2018年12月期間呼吸科住院的,明確診斷為OSAHS的數(shù)據(jù)齊全的患者77例。按照《鼾癥中醫(yī)診療專家共識(shí)意見》,分為痰濕內(nèi)阻、痰瘀互結(jié)、痰熱內(nèi)蘊(yùn)、氣虛痰瘀、肺脾氣虛、脾腎兩虛6個(gè)證型。建立數(shù)據(jù)庫,對(duì)患者一般情況、中醫(yī)證型分布及與睡眠監(jiān)測結(jié)果的關(guān)系、OSAHS合并癥及與中醫(yī)證型的關(guān)系等進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。結(jié)果:1 一般情況:本課題共入選OSAHS患者77例,男性40例,女性37例,年齡最大為80歲,最小為31歲,平均年齡63.82±11.44歲,平均體重指數(shù)(Body Mass Index,BMI)28.91±4.45kg/m2。其中輕度 OSAHS 患者 28 例,中度患者19例,重度患者30例。OSAHS疾病程度與BMI進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)重度OSAHS患者BMI明顯高于輕度及中度患者,結(jié)果顯示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2中醫(yī)證型分析2.1中醫(yī)證型分布:痰瘀互結(jié)證患者26例,占總數(shù)的33.8%,痰濕內(nèi)阻證患者19例,占總數(shù)的24.7%,痰熱內(nèi)蘊(yùn)證患者15例,占總數(shù)的19.5%,氣虛痰瘀證患者11例,占總數(shù)的14.3%。脾腎兩虛證患者4例,占總數(shù)5.2%,肺脾氣虛2例,占總數(shù)2.6%。2.2中醫(yī)證型兼證情況:15例患者存在兼證,占整體的19.5%。其中痰瘀互結(jié)+脾腎兩虛9例,肺脾氣虛+痰濕內(nèi)阻2例,脾腎兩虛+痰濕內(nèi)阻4例。單純實(shí)證包括痰瘀互結(jié)、痰濕內(nèi)阻、痰熱內(nèi)蘊(yùn)證者共51例,虛實(shí)夾雜證者26例。2.3中醫(yī)證型與睡眠監(jiān)測結(jié)果之間的比較2.3.1各組中醫(yī)證型呼吸紊亂指數(shù)(Apnea Hyponea Index,AHI)之間的比較:痰濕內(nèi)阻、痰熱內(nèi)蘊(yùn)兩組AHI明顯小于痰瘀互結(jié)、氣虛痰瘀、痰瘀互結(jié)脾腎兩虛三組AHI,P0.05,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。痰瘀互結(jié)、氣虛痰瘀、痰瘀互結(jié)脾腎兩虛三組AHI之間無明顯差異,P0.05,痰濕內(nèi)阻、痰熱內(nèi)蘊(yùn)組AHI之間無明顯差異,P0.05。2.3.2各組中醫(yī)證型患者LSpO2之間的比較:痰濕內(nèi)阻、痰熱內(nèi)蘊(yùn)兩組LSpO2明顯高于痰瘀互結(jié)、氣虛痰瘀、痰瘀互結(jié)脾腎兩虛三組LSp02,P0.05,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。痰濕內(nèi)阻、痰熱內(nèi)蘊(yùn)兩組LSp02之間無明顯差異,P0.05,痰瘀互結(jié)、氣虛痰瘀、痰瘀互結(jié)脾腎兩虛三組LSpC2之間無明顯差異,P0.05。2.3.3各組中醫(yī)證型OSAHS嚴(yán)重程度比較:痰濕內(nèi)阻、痰熱內(nèi)蘊(yùn)證OSAHS患者疾病程度以輕度、中度為主,而痰瘀互結(jié)、氣虛痰瘀、痰瘀互結(jié)脾腎兩虛證OSAHS患者疾病程度以中、重度為主。2.4各中醫(yī)證型合并癥情況患者OSAHS合并癥情況統(tǒng)計(jì):高脂血癥是發(fā)病率最高的合并癥,56例,占72%,其次是高血壓52例,占67%,慢性呼吸系統(tǒng)疾病32例,占41%,糖尿病28例,占36%,冠心病27例,占35%,胃食管反流病24例,占31%,中風(fēng)10例,占13%。其中無合并癥的患者7人,合并1種合并癥患者6人,合并2種合并癥患者15人,合并3種合并癥的患者有19人,合并3種以上合并癥的患者30人。中醫(yī)證型與OSAHS合并癥之間的關(guān)系:合并高脂血癥的OSAHS患者常見于痰瘀互結(jié)、痰濕內(nèi)阻證;合并冠心病的OSAHS患者常見證型為痰濕內(nèi)阻、痰熱內(nèi)蘊(yùn)證;合并高血壓的OSAHS患者常見于痰濕內(nèi)阻、痰瘀互結(jié)證;合并中風(fēng)的OSAHS患者常見于痰瘀互結(jié)證;合并糖尿病的OSAHS患者常見于痰瘀互結(jié)證;合并胃食管反流的OSAHS患者常見于痰熱內(nèi)蘊(yùn)證;合并慢性呼吸系統(tǒng)疾病的OSAHS患者常見于痰濕內(nèi)阻證。結(jié)論:本組OSAHS患者的中醫(yī)證型分布為痰瘀互結(jié)證痰濕內(nèi)阻證痰熱內(nèi)蘊(yùn)證氣虛痰瘀證脾腎兩虛證肺脾氣虛證,以實(shí)證為主,虛實(shí)夾雜次之,痰瘀互結(jié)證最為常見。不同證型的睡眠監(jiān)測結(jié)果不同,痰濕內(nèi)阻、痰熱內(nèi)蘊(yùn)證OSAHS患者疾病程度以輕度、中度為主,而痰瘀互結(jié)、氣虛痰瘀、痰瘀互結(jié)脾腎兩虛證OSAHS患者疾病程度以中、重度為主。OSAHS常伴發(fā)多種合并癥,高脂血癥是發(fā)病率最高的合并癥,常見中醫(yī)證型為痰瘀互結(jié),其他心腦血管疾病、代謝性疾病、消化疾病、呼吸系統(tǒng)疾病均可見。中醫(yī)證型與合并癥的發(fā)生具有一定的關(guān)系,可以指導(dǎo)OSAHS及其合并癥的治療。第二部分:丹萎片干預(yù)慢性間歇低氧誘導(dǎo)的血脂異常和動(dòng)脈硬化小鼠模型的研究研究一丹萎片干預(yù)間歇性低氧誘導(dǎo)的血脂異常及動(dòng)脈硬化小鼠模型療效評(píng)價(jià)目的:評(píng)價(jià)丹萎片治療間歇性低氧誘導(dǎo)的血脂異常及動(dòng)脈硬化小鼠模型的有效性。方法:12周齡的雄性ApoE-/-小鼠16只,分為4組,每組4只,假手術(shù)組(Sham)不進(jìn)行CIH造模。CIH+生理鹽水組進(jìn)行CIH處理,同時(shí)每天生理鹽水(2ml/次)灌胃1次。CIH+Angptl4抗體組進(jìn)行CIH處理,同時(shí)Angpt14免疫組化抗體(30mg/kg)每周腹腔注射。CIH+丹萎片組進(jìn)行CIH處理,同時(shí)丹萎片(250mg/kg)每天灌胃1次。每組干預(yù)4周后取材,采集眶后血液,離心取血清。動(dòng)物處死留取附睪脂肪墊,心臟組織標(biāo)本,放入-80℃冰箱中保存。動(dòng)物處死后從左心室緩慢灌流磷酸鹽緩沖液,分離主動(dòng)脈弓。進(jìn)行指標(biāo)檢測,ELISA檢測血清脂質(zhì),試劑盒測定血清脂蛋白,脂蛋白脂酶(Lipoproteinlipase,LPL)活性檢測試劑盒檢測血清LPL活性,HE和免疫組化觀察動(dòng)脈斑塊形態(tài)性質(zhì)。結(jié)果:1各組ApoE-/-小鼠血清脂質(zhì)和脂蛋白測定CIH組TC、TG、LDL、VLDL等與Sham組相比較,P0.01,兩組差異明顯,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說明CIH可以導(dǎo)致小鼠血脂異常。Angptl4抗體組其TC、TG、LDL、VLDL與CIH組結(jié)果相比較,P0.01,兩組差異明顯,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,AngptI4抗體可以減輕CIH誘導(dǎo)的血脂異常,降低血脂。丹萎片組其TC、TG、LDL、VLDL與CIH組結(jié)果相比較,P0.01,兩組差異明顯,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,丹蔞片可以干預(yù)CIH誘導(dǎo)的血脂異常,改善血脂代謝。2各組ApoE-/-小鼠血清脂蛋白脂肪酶(LPL)活性測定CIH組LPL活性與Sham組相比較,P0.01,兩組差異明顯,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,與Sham組相比,CIH組小鼠血清中LPL的活性水平均顯著降低,說明CIH可造成LPL活性減低,阻礙血脂的清除,造成血脂的升高。Angpt14抗體組LPL活性與CIH組相比,P0.01,兩組差異明顯,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,提示Angptl4抗體組可能通過中和Angptl4,從而升高LPL活性,達(dá)到降低血脂的目的。丹萎片組其LPL活性與CIH相比,P0.01,兩組差異明顯,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,丹萎片干預(yù)后LPL活性顯著升高,丹萎片通過升高LPL活性改善血脂代謝。3動(dòng)脈斑塊形態(tài)性質(zhì)觀察主動(dòng)脈弓HE染色后,與Sham組相比,CIH組的動(dòng)脈粥樣硬化斑塊面積顯著增加,動(dòng)脈壁變厚,管腔變狹窄。與CIH組相比,Angptl4組和丹萎片組的動(dòng)脈粥樣硬化斑塊面積顯著降低,動(dòng)脈壁厚度有一定程度的變窄,動(dòng)脈粥樣硬化的病變有所緩解。與CIH組相比,Angpt14抗體組和丹萎片組的動(dòng)脈粥樣硬化斑塊CD68染色面積顯著降低,染色強(qiáng)度減弱,動(dòng)脈壁厚度有一定程度的變窄,動(dòng)脈粥樣硬化的病變有所緩解。結(jié)論:間歇性低氧處理可加重ApoE-/-小鼠的動(dòng)脈粥樣硬化病變,升高血脂。而通過Angptl4抗體和丹萎片的干預(yù),小鼠的動(dòng)脈粥樣硬化情況有緩解,血脂下降。本實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了丹萎片干預(yù)治療CIH誘導(dǎo)的動(dòng)脈硬化、血脂異常的有效性,但其干預(yù)機(jī)制尚需進(jìn)一步探索。研究二丹萎片干預(yù)慢性間歇低氧誘導(dǎo)的血脂異常和動(dòng)脈硬化的機(jī)制研究目的:探索HIF-1-Angptl4通路以及其可能上游靶點(diǎn)FIH-1在慢性間歇低氧誘導(dǎo)的血脂異常和動(dòng)脈硬化過程中的作用,以及丹萎片的可能干預(yù)機(jī)制。方法:取實(shí)驗(yàn)一中處死的各組動(dòng)物附睪脂肪墊、心臟組織標(biāo)本,按照實(shí)驗(yàn)一分組分為4組,進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測各組小鼠附睪脂肪墊、心臟組織中FIH-1、Angptl4、HIF-1、LPL 的 mRNA 表達(dá)量。并用 Western blot 檢測各組小鼠附睪脂肪墊、心臟組織中FIH-1、Angpt14、HIF-1、LPL的蛋白水平。結(jié)果:1 ApoE-/-小鼠的附睪脂肪墊組織qRT-PCR檢測結(jié)果與Sham組相比,CIH組的低氧誘導(dǎo)因子抑制因子-1(Factor inhibiting hypoxia-inducible factor-1,FIH-1)mRNA的表達(dá)水平顯著降低,Angptl4mRNA的表達(dá)水平顯著增加,低氧誘導(dǎo)因子-1(Hypoxia-induciblefactor-1,HIF-1)mRNA 表達(dá)水平顯著增加,P0.01,差異有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;LPL mRNA表達(dá)水平無顯著性差異,P0.05,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與CIH組相比,Angptl4抗體組的FIH-1 mRNA表達(dá)水平顯著上升,LPL mRNA表達(dá)水平顯著上升,Angpt14 mRNA表達(dá)水平顯著升高,HIF-1mRNA的表達(dá)水平均顯著降低,P0.01,差異有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與CIH組相比,丹蔞片干預(yù)組的FIH-1 mRNA表達(dá)水平顯著上升,LPL mRNA表達(dá)水平顯著上升,Angpt14 mRNA表達(dá)水平顯著降低,HIF-1mRNA的表達(dá)水平均顯著降低,P0.01,差異有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2 ApoE-/-小鼠的心臟組織qRT-PCR檢測結(jié)果與Sham組相比,CIH干預(yù)后,FIH-1mRNA表達(dá)水平顯著降低,HIF-1 mRNA表達(dá)水平顯著升高,P0.01,差異有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Angptl4 mRNA、LPL mRNA表達(dá)水平無顯著性差異。與CIH組相比,Angpt14抗體組和丹蔞片組的FIH-1 mRNA表達(dá)水平顯著升高,HIF-1 mRNA表達(dá)水平顯著降低,P0.01,差異有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Angptl4 mRNA、LPL mRNA表達(dá)水平無顯著性差異。3 ApoE-/-小鼠的附睪脂肪墊組織Western blot檢測結(jié)果與Sham組相比,CIH組的FIH-1蛋白的表達(dá)水平顯著降低,Angptl4、HIF-1蛋白的表達(dá)水平顯著增加,P0.01,差異有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;LPL蛋白的表達(dá)水平無顯著性差異,P0.05。與CIH組相比,Angpt14體組和丹萎片組的FIH-1、LPL蛋白的表達(dá)水平顯著上升,Angptl4、HIF-1蛋白的表達(dá)水平顯著降低,P0.01,差異有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4 ApoE-/-小鼠的心臟組織Western blot檢測結(jié)果。與Sham組相比,CIH干預(yù)后FIH-1蛋白表達(dá)水平顯著降低,HIF-1蛋白表達(dá)水平顯著升高,P0.01,差異有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;Angptl4、LPL蛋白表達(dá)水平無顯著性差異,P0.05,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與CIH組相比,Angpt14抗體組和丹萎片組的FIH-1蛋白表達(dá)水平顯著升高,HIF-1蛋白表達(dá)水平顯著降低,P0.01,差異有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;Angptl4、LPL蛋白表達(dá)水平無顯著性差異,P0.05,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:丹萎片可能通過影響附睪脂肪墊HIF-1-Angpt14信號(hào)通路及該通路可能上游靶點(diǎn)FIH-1治療慢性間歇低氧誘發(fā)的血脂異常和動(dòng)脈硬化,為中醫(yī)痰瘀同治法干預(yù)OSAHS誘導(dǎo)的血脂異常和動(dòng)脈硬化提供了研究參考。
【圖文】：

臨床研宄３７２篇，未報(bào)道血脂指標(biāo)的文獻(xiàn)４２篇，剔除未提供血脂指標(biāo)數(shù)據(jù)的文逡逑獻(xiàn)１篇，最終納入１０篇１４＿１３１隨機(jī)對(duì)照研究，均為在中文期刊發(fā)表的研究，，納入排逡逑除過程見圖１。逡逑中英文數(shù)據(jù)庫初篩逡逑文獻(xiàn)ｎ＝４２５邐邐逡逑＂＂＂｜邐｜剔除非隨機(jī)對(duì)照臨逡逑邐ＬＺＩＺ＂邐床研究邋ｎ＝３７２逡逑臨床隨機(jī)＇對(duì)照砑究；逡逑１１＝５３邐邐逡逑１邐￣邋＿邐ｊ剔除未報(bào)道血脂指逡逑＾邐Ｉ邐：邐＾邋標(biāo)的文獻(xiàn)ｎ＝４２逡逑報(bào)道了血脂指標(biāo)的逡逑文獻(xiàn)ｎ：Ｕ邐邐逡逑｜邐ｊ剔

本文編號(hào)：2695248