【摘要】：近年來研究表明,疼痛感知的形成是腦內(nèi)廣泛分布且等級性強的多個大腦皮層和皮層下中樞結(jié)構(gòu)間相互聯(lián)系的神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)參與編碼、加工和調(diào)節(jié)的。現(xiàn)代疼痛研究已從單一模式研究轉(zhuǎn)變?yōu)榇竽X的疼痛感知-情緒-認知多維模式(The neural network associated with the sensory, affective and cognitive dimensions of pain,NNSACP)研究。頭痛作為直接的中樞性疼痛,與知覺、情緒和認知腦功能屬性緊密相連。眾所周知,突觸傳遞與疼痛研究具有密切關(guān)系。近年來,海馬作為邊緣系統(tǒng)的一個關(guān)鍵組成部分,除了與學習記憶及情緒有關(guān),海馬也被認為在疼痛傳導(dǎo)通路中也占有重要地位,參與各種疼痛信息的處理,多數(shù)的錐體細胞可對各類傷害性刺激做出反應(yīng)。而且疼痛引起了海馬的形態(tài)改變和一些生理機制變化,影響了海馬的記憶和情緒功能。因此,我們選擇正天丸對海馬神經(jīng)回路突觸傳遞的影響作為本研究的重點之一,以具有代表性的哺乳動物內(nèi)嗅區(qū)-齒狀回-CA3側(cè)枝-CA1海馬三級神經(jīng)回路為研究靶點。從不同的視角來揭示了正天丸對頭痛治療作用的分子機制。實驗共分為四個部分：第一部分正天丸對硝酸甘油所致大鼠頭痛模型的行為學作用研究目的研究正天丸對硝酸甘油誘發(fā)的實驗性頭痛大鼠行為學的影響。方法SD大鼠共分為5組：空白組,硝酸甘油模型組,正天丸低、高劑量(0.54,1.08g/kg),陽性藥物西比靈組。連續(xù)灌胃給藥10天,末次給藥半小時后,采用皮下注射硝酸甘油來復(fù)制模型,通過觀察大鼠耳紅出現(xiàn)及消失的時間,前肢撓頭,后肢撓頭,爬籠,甩頭等指標來評價正天丸對其一般行為學的影響。結(jié)果1.基本行為表現(xiàn)：注射硝酸甘油后動物立即出現(xiàn)活動增加,前肢頻繁撓頭,煩躁不安,于造模后30 min達到頂峰,60 min以后動物活動逐漸減少,出現(xiàn)倦臥狀態(tài)。2.耳紅：正常組始終沒有出現(xiàn)耳紅現(xiàn)象,而模型組在注射硝酸甘油最早2.1 min出現(xiàn)耳紅現(xiàn)象,平均在4 min出現(xiàn)耳紅；耳紅消失時間最早在63 min,平均消失時間為76.2 min。3.撓頭次數(shù)：模型組大鼠的前肢、后肢撓頭次數(shù)均顯著性的增加(P0.001,P0.001)；正天丸高劑量組也可顯著降低前肢、后肢撓頭次數(shù)(P0.001,P0.01)；正天丸低劑量組可顯著降低前肢撓頭次數(shù)(P0.05),但對后肢撓頭次數(shù)沒有顯著影響(P0.05)；西比靈作為陽性對照,表現(xiàn)出了與正天丸低劑量相似的作用。4.爬籠次數(shù)：正天丸高劑量可減少大鼠爬籠次數(shù),但無顯著性差異(P0.05),正天丸低及西比靈組沒有減少大鼠的爬籠次數(shù),與模型組相較無顯著性差異(P0.05,P0.05)。5.甩頭次數(shù)：正天丸低、高劑量及西比靈組均可以顯著性減少大鼠的甩頭次數(shù)(P 0.05, P 0.01, P 0.001)。結(jié)論硝酸甘油成功構(gòu)建了大鼠頭痛模型,且正天丸可顯著緩解硝酸甘油誘發(fā)的頭痛基本癥狀。第二部分正天丸對海馬內(nèi)嗅區(qū)前穿質(zhì)-齒狀回通路突觸傳遞的作用研究目的研究正天丸對大鼠海馬內(nèi)嗅區(qū)前穿質(zhì)-齒狀回突觸傳遞的影響。方法采用在體場電位記錄方法,大鼠烏來糖麻醉后,將其頭部于耳桿0.5-06 cm處固定在腦立體定位儀上,參照大鼠腦立體定位圖譜定位PP及DG區(qū)位置,用顱鉆按照圖譜位置在大鼠腦上打孔,用來放置記錄電極R和刺激電極S。以Dur: 100 μs, Interl:30s的刺激方波記錄基礎(chǔ)刺激誘發(fā)出穩(wěn)定的PS波形。穩(wěn)定記錄30min后,給予高頻刺激誘導(dǎo)突觸長時程增強(LTP)形成,并研究正天丸低、高劑量(0.54,108 g/kg)及陽性藥物西比靈對海馬前穿質(zhì)-齒狀回通路突觸傳遞的影響。結(jié)果與空白組相比較,模型組高頻刺激后各個時間段PS增幅值均降低(P0.05)：與模型組比較,正天丸高、低劑量組及西比靈組的高頻刺激后各個時間段PS增幅值均明顯增加(P0.001,P0.01,P0.05)。結(jié)論整體大鼠電生理實驗中,硝酸甘油誘發(fā)的頭痛可明顯降低海馬前穿質(zhì)-齒狀回通路PS增幅值；正天丸低、高劑量和西比靈可顯著性增加前穿質(zhì)-齒狀回通路PS增幅值；結(jié)果顯示正天丸對海馬前穿質(zhì)-齒狀回通路突觸傳遞有顯著的增強作用。第三部分正天丸對海馬腦片Shaffer側(cè)枝-CA1通路突觸傳遞的作用研究目的采用離體胞外記錄海馬區(qū)場電位的方法,利用急性腦片,觀察正天丸對大鼠海馬Shaffer側(cè)枝-CA1通路突觸傳遞的作用。方法用振動切片機將海馬切成厚度為350μm的腦片,通過離體胞外記錄海馬區(qū)場電位的方法,調(diào)節(jié)微操縱器將刺激電極置于由海馬CA3區(qū)錐體細胞發(fā)出而投射于CA1區(qū)的Schaffer側(cè)支纖維上,記錄電極置于CA1區(qū)的錐體細胞胞體層下方。腦片置于持續(xù)灌流的通以混合氧的人工腦脊液(artificial cerebrospinal fluid, ACSF)液中,通過AxoScope系統(tǒng)記錄正天丸低、高劑量(0.54,108 g/kg)及陽性藥物西比靈對大鼠海馬Shaffer側(cè)枝-CA1通路突觸傳遞的作用。結(jié)果與空白組相較,模型組高頻刺激后各個時間段fEPSP斜率增幅值均降低(P0.05)；與模型組比較,正天丸高、低劑量組及西比靈組高頻刺激后各個時間段fEPSP斜率增幅值均明顯增加(P0.001,P0.01,P0.01)。結(jié)論急性海馬腦片電生理實驗中,硝酸甘油誘發(fā)的頭痛可明顯降低腦片Shaffer側(cè)枝-CA1區(qū)fEPSP斜率增幅值；正天丸低、高劑量和西比靈組可顯著性增加腦片Shaffer側(cè)枝-CA1通路fEPSP斜率增幅值。結(jié)果顯示正天丸能顯著增強海馬腦片Shaffer側(cè)枝-CA1通路突觸傳遞。第四部分正天丸頭痛治療中TRP V1的作用機制研究目的研究正天丸對大鼠海馬、皮層中TRPV1蛋白表達的影響,以探索正天丸對頭痛臨床治療作用的分子機制。方法將大鼠分為3組,空白組、硝酸甘油模型組和正天丸給藥組。連續(xù)灌胃給藥10天,末次給藥結(jié)束后斷頭取腦,分離海馬及皮層。通過Western Blotting技術(shù),研究正天丸對海馬結(jié)構(gòu)和皮層中TRPV1蛋白表達的影響。結(jié)果與空白組相比,模型組大鼠海馬和皮層中TRPV1蛋白表達水平均明顯升高(P0.01,P0.01)；與模型組相比,正天丸高劑量組大鼠海馬組織和皮層中TRPV1蛋白表達量都顯著性降低(P0.01,P0.05)。結(jié)論正天丸能降低海馬和皮層中TRPV1蛋白的表達,這可能是正天丸對頭痛臨床治療作用的重要分子作用機制。
[Abstract]:In recent years , it has been shown that the formation of pain perception is widely distributed in the brain and the neural network associated with the central structures in the cortex is involved in coding , processing and regulation .
The disappearance time of the ear was at least 63 minutes , the average disappearance time was 76.2 min . 3 . The number of deflection of the front and hind limbs of the model group was significantly increased ( P0.001 , P0.001 ) .
In the high dose group , the number of deflection of the forelimbs and hind limbs could be significantly decreased ( P0.001 , P0.01 ) .
There was no significant influence on the number of deflection of the forelimbs ( P0.05 ) .
4 . There was no significant difference ( P 0.05 , P 0.01 , P 0.001 ) . Objective To study the effect of Zhengtian Pill on the synaptic transmission of preperal - dentate gyrus in the hippocampus of rats . The results were compared with blank group . Conclusion In the electrophysiological experiment of the whole rat , glyceryl trinitrate - induced headache can significantly reduce the amplitude of PS in the pre - hippocampal puncture - dentate gyrus ;
Low , high and Sibianling could significantly increase the value of PS in the pre - wear - dentate gyrus ;
The effect of Zhengtian Pill on the synaptic transmission of Shaffer ' s side branch - CA1 pathway in hippocampus was studied .
Compared with model group , the slope of fEPSP increased significantly after high frequency stimulation ( P 0.001 , P0.01 , P0.01 ) . Conclusion In the electrophysiological experiment of acute hippocampal slices , glyceryl trinitrate - induced headache can significantly decrease the slope amplitude of fEPSP in the Shaffer - CA1 region of the brain slices .
In the fourth part , the effects of Zhengtian Pill on the expression of TRPV protein in hippocampus and cortex of rat hippocampus were studied . The results showed that the expression level of TRpv1 protein in hippocampus and cortex of rats was significantly higher than that in blank group ( P0.01 , P0.01 ) .
Compared with the model group , the expression of TRpv1 protein in hippocampus and cortex of the high - dose group was significantly lower than that in model group ( P0.01 , P0.05 ) . Conclusion It may be an important molecular mechanism for the clinical treatment of headache .
【學位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R277.7

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 朱曉松 ,邵黎;突觸傳遞的新發(fā)現(xiàn)[J];生理科學進展;2003年04期

2 徐海偉;范曉棠;;以突觸傳遞為主線講好神經(jīng)系統(tǒng)活動基本規(guī)律的體會[J];山西醫(yī)科大學學報(基礎(chǔ)醫(yī)學教育版);2006年06期

3 ;N型和Q型鈣離子通道在海馬突觸傳遞中的作用[J];神經(jīng)科學;1994年02期

4 馬蓓,易必達,邢寶仁;不同甾體激素對交感神經(jīng)節(jié)突觸傳遞快速作用的比較[J];中國神經(jīng)科學雜志;1999年01期

5 郭百凱,張文根;多巴胺與慢突觸傳遞[J];寶雞文理學院學報(自然科學版);2001年01期

6 高放,劉世文;突觸傳遞可塑性分子水平的機理研究[J];中國康復(fù)醫(yī)學雜志;2003年09期

7 陳戈明,蔣敏捷,陳志雄;突觸傳遞長時程抑制的研究進展[J];生理科學進展;1997年03期

8 張霞;突觸及突觸傳遞的研究概況[J];動物醫(yī)學進展;2004年06期

9 姜巖;;離子型谷氨酸受體對海馬突觸傳遞長時程增強的影響[J];內(nèi)蒙古民族大學學報(自然科學版);2009年06期

10 劉少林，趙明瑞，，張均田;黃皮酰胺對清醒自由活動大鼠齒狀回突觸傳遞的影響[J];藥學學報;1999年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 梁華為;沈岳良;陳志雄;夏強;;兩種指標在評價海馬突觸傳遞效率長時程抑制時的差異[A];中國生理學會第21屆全國代表大會暨學術(shù)會議論文摘要匯編[C];2002年

2 李震;羅層;�，�;呂卓敏;劉丹娜;陳軍;;新生大鼠脊髓背角網(wǎng)絡(luò)突觸傳遞的特性:興奮性氨基酸及其離子型受體的作用[A];中國神經(jīng)科學學會第六屆學術(shù)會議暨學會成立十周年慶祝大會論文摘要匯編[C];2005年

3 �，�;羅層;李震;呂卓敏;劉丹娜;陳軍;;新生大鼠脊髓背角網(wǎng)絡(luò)突觸傳遞的特性:抑制性氨基酸及其離子型受體的作用[A];中國神經(jīng)科學學會第六屆學術(shù)會議暨學會成立十周年慶祝大會論文摘要匯編[C];2005年

4 伊峰;張雪寒;李葆明;;大鼠前額葉腎上腺素能α-2A受體的激活壓抑突觸傳遞[A];中國生理學會第八屆全國青年生理學工作者學術(shù)會議論文摘要[C];2009年

5 潘平越;蔡倩;林琳;陸佩華;段樹民;盛祖杭;;SNAP-29分子對突觸傳遞的調(diào)節(jié)作用[A];中國神經(jīng)科學學會第六屆學術(shù)會議暨學會成立十周年慶祝大會論文摘要匯編[C];2005年

6 顧勤花;胡斌;陸巍;;斑馬魚嗅球僧帽細胞谷氨酸突觸傳遞的在體功能研究[A];Proceedings of the 7th Biennial Meeting and the 5th Congress of the Chinese Society for Neuroscience[C];2007年

7 高翠英;崔秀玉;張然;邵國;呂國蔚;;低氧預(yù)適應(yīng)對小鼠海馬CA1區(qū)突觸傳遞效應(yīng)的影響[A];Proceedings of the 7th Biennial Meeting and the 5th Congress of the Chinese Society for Neuroscience[C];2007年

8 萬業(yè)宏;菅忠;文治洪;王玉英;胡三覺;;混沌動作電位序列在大鼠初級傳入纖維和脊髓背角神經(jīng)元之間的突觸傳遞特征的研究[A];中國神經(jīng)科學學會第六屆學術(shù)會議暨學會成立十周年慶祝大會論文摘要匯編[C];2005年

9 王淑珍;肖鵬;許世彤;;NO在齒狀回習得性長時程增強中的作用[A];第八屆全國心理學學術(shù)會議文摘選集[C];1997年

10 苗青;;膽紅素影響脊髓背角神經(jīng)元突觸傳遞導(dǎo)致梗阻性黃疸大鼠痛閾的升高[A];2010中華醫(yī)學會全國麻醉學術(shù)年會論文匯編[C];2010年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 于海若;他們打開了大腦之門[N];健康報;2000年

2 魯白;我的導(dǎo)師得了諾貝爾獎[N];光明日報;2000年

3 本報記者 李雪墨;頂級生物學科學家開講科博會[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報;2002年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 陳瑩;Ⅰ海馬LTP誘發(fā)蛋白酶體介導(dǎo)SPAR蛋白降解 Ⅱ突觸—核信使蛋白Jacob調(diào)節(jié)突觸傳遞[D];復(fù)旦大學;2013年

2 羅樂;毒蕈堿型膽堿能系統(tǒng)對海馬突觸傳遞和可塑性的調(diào)控及鉛的作用[D];中國科學技術(shù)大學;2008年

3 陳祖昕;Munc13蛋白調(diào)控萼狀突觸的突觸傳遞和可塑性的作用機制研究[D];華中科技大學;2013年

4 朱國旗;MPTP調(diào)節(jié)海馬突觸傳遞和活性依賴可塑性的細胞機制研究[D];復(fù)旦大學;2012年

5 任思強;PKCλ在突觸傳遞長時程增強中的作用及機制研究[D];南京醫(yī)科大學;2013年

6 丁娟;天然藥物A對單眼形覺剝奪大鼠視皮質(zhì)突觸傳遞效能影響及相關(guān)分子機制研究[D];天津醫(yī)科大學;2008年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 陳玉晴;γ分泌酶抑制劑DAPT對海馬突觸傳遞和活性依賴可塑性的作用及其機制研究[D];復(fù)旦大學;2013年

2 孫軍花;基于大腦NNSACP網(wǎng)絡(luò)模式正天丸頭痛治療作用的機制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2016年

本文編號：2137408