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化肝通絡(luò)方對(duì)大鼠活化的肝星狀細(xì)胞增殖的影響及其作用機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2018-04-23 20:47

  本文選題:化肝通絡(luò)方 + 原發(fā)性膽汁性肝硬化; 參考:《南京中醫(yī)藥大學(xué)》2016年碩士論文


【摘要】:目的:進(jìn)行原發(fā)性膽汁性肝硬化體外研究,探索化肝通絡(luò)方對(duì)大鼠肝星狀細(xì)胞增殖的影響及其作用機(jī)制。方法:1.含藥血清的制備:40只清潔級(jí)SD大鼠隨機(jī)分為化肝通絡(luò)方高劑量組(73.7g/kg/d)、中劑量組(36.8g/kg/d)、低劑量組(18.4g/kg/d)及空白組(0.9%NaCl),持續(xù)灌胃7天,每天1次,每次2m1,最后1天灌胃之前禁食24h,最后一次灌胃1h后腹主動(dòng)脈采血,靜置,離心,補(bǔ)體滅活,過(guò)濾細(xì)菌,分裝,-80℃凍存。2.藥物成分測(cè)定:質(zhì)譜分析藥物組成并與標(biāo)準(zhǔn)品比對(duì),確定其藥物成分。3.化肝通絡(luò)方對(duì)大鼠活化肝星狀細(xì)胞增殖的影響:MTT法測(cè)定不同組別含藥血清作用于活化肝星狀細(xì)胞24h后,各組之間OD值的改變,確定藥物對(duì)細(xì)胞增殖的影響。4.化肝通絡(luò)方影響活化肝星狀細(xì)胞增殖作用機(jī)制研究:不同組別含藥血清和空白組血清作用于相同條件活化肝星狀細(xì)胞24h,提取蛋白后western blot法檢測(cè)TGF-β1、smad2/3、 smad7蛋白質(zhì)的表達(dá),確定本方對(duì)TGF-β/smad通路的影響。結(jié)果:1.含藥血清制備:質(zhì)譜分析對(duì)照品與中藥原液,確定藥液中含有化肝通絡(luò)方有效成分。2.化肝通絡(luò)方對(duì)大鼠肝星狀細(xì)胞增殖的影響:中藥作用后的細(xì)胞DO值顯著下降,說(shuō)明本方對(duì)肝星狀細(xì)胞的增殖起到抑制作用,但是低劑量組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),中、高劑量組差異明顯(**P0.01)。3.化肝通絡(luò)方影響肝星狀細(xì)胞增殖作用機(jī)制研究:western blot檢測(cè)結(jié)果顯示與空白組相比含藥血清低劑量組TGF-β1、smad2/3蛋白無(wú)明顯差異(*P0.05),中高劑量組含量下降(*P0.05);含藥血清中高劑量組smad7蛋白表達(dá)明顯上升(*P0.05),低劑量組差異不顯(P0.05)。結(jié)論:1.化肝通絡(luò)方藥液含有目標(biāo)成分。2.化肝通絡(luò)方含藥血清對(duì)活化肝星狀細(xì)胞增殖活動(dòng)具有抑制作用。3.化肝通絡(luò)方治療原發(fā)性膽汁性肝硬化的其中一條路徑是通過(guò)TGF-β/smad信號(hào)通路實(shí)現(xiàn)。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of Huagan Tongluo recipe on the proliferation of rat hepatic stellate cells in vitro. Method 1: 1. Preparation of serum containing drugs: 40 clean SD rats were randomly divided into high dose group (73.7 g / kg / d), middle dose group (36.8 g / kg / d), low dose group (18.4g / kg / d) and blank group (0.9g / kg / d). The abdominal aorta was collected, resting, centrifuged, complement inactivated, filtrated bacteria, and frozen at 80 鈩,

本文編號(hào):1793578

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