本文選題：慢性乙型肝炎　切入點(diǎn)：肝郁脾虛證　出處：《成都中醫(yī)藥大學(xué)》2016年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

【摘要】：目的擬對(duì)課題組前期運(yùn)用iTRAQ聯(lián)合LC-MS/MS技術(shù)篩選出的慢性乙型肝炎(CHB)肝郁脾虛、脾胃濕熱證的血清特異性表達(dá)蛋白進(jìn)行驗(yàn)證。首先擬獲取肝郁脾虛、脾胃濕熱證的歷史沿革和二證證本質(zhì)現(xiàn)代研究概況、已得成果、以及問(wèn)題和不足,為實(shí)驗(yàn)研究提供理論參考。其次擬運(yùn)用Western Blot技術(shù)對(duì)篩選出的FETUA、 PLTP、PF4V等5個(gè)特異性表達(dá)蛋白進(jìn)行驗(yàn)證,以驗(yàn)證其可靠性。方法本文主要從文獻(xiàn)研究和實(shí)驗(yàn)研究?jī)蓚�(gè)方面展開(kāi)。首先對(duì)肝郁脾虛、脾胃濕熱兩證的相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行縱向和橫向研究�？v向研究為：探索二的源流脈絡(luò)和歷史沿革;橫向研究為：采用題名和摘要相結(jié)合的方法在清華同方CNKI系列數(shù)據(jù)庫(kù)檢索二證的證本質(zhì)研究文獻(xiàn),檢索日期為起始日期不限至2016年1月1日,最終納入肝郁脾虛證157篇,脾胃濕熱證129篇,并對(duì)納入的文獻(xiàn)從年度分布、相關(guān)疾病、分子研究等方面進(jìn)行計(jì)量和頻數(shù)分析。其二,納入CHB肝郁脾虛證、脾胃濕熱證樣本各9例,正常對(duì)照樣本6例,運(yùn)用Western Blot技術(shù)檢測(cè)其上述5種血清特異性蛋白在各組間的表達(dá)變化情況,并用GraphPad Prism 5軟件分析各組蛋白的灰度值。結(jié)果1.通過(guò)文獻(xiàn)研究發(fā)現(xiàn)：肝郁脾虛、脾胃濕熱證證本質(zhì)研究大多采用方證相關(guān)、病證結(jié)合方式；研究涉及的疾病,肝郁脾虛證以乙型肝炎為主,占比達(dá)33%,脾胃濕熱證以各種胃炎為多,占比達(dá)58%；分子機(jī)制方面：肝郁脾虛證軸研究以下丘腦-垂體-靶腺軸(腎上腺、甲狀腺、腸腺)為熱點(diǎn),信號(hào)通路研究有幾十條之多,未見(jiàn)統(tǒng)一者,蛋白的研究則涉及神經(jīng)、內(nèi)分泌、消化、免疫等多系統(tǒng)；脾胃濕熱證則主要集中于腸道甜味覺(jué)通路中受體細(xì)胞及信號(hào)關(guān)鍵分子和NF-KB炎癥信號(hào)通路兩條通路,蛋白研究包括水通道蛋白(AQP),熱休克蛋白(HSP),血液中胃動(dòng)素(MTL)等數(shù)十種蛋白。2.CHB肝郁脾虛證組和正常組比較：PF4V、PSMA6差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),PF4V前期篩選下調(diào),驗(yàn)證亦下調(diào),趨勢(shì)相符；PSMA6前期篩選上調(diào),驗(yàn)證亦上調(diào),趨勢(shì)相符。CHB脾胃濕熱證組和正常組比較：FETUA、CATC、PLTP差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05), FETUA、CATC、PLTP前期篩選上調(diào),此次驗(yàn)證亦上調(diào),3者表達(dá)趨勢(shì)篩選、驗(yàn)證均相符。3.上述驗(yàn)證蛋白表達(dá)譜與文獻(xiàn)分析結(jié)果以及課題組其它組學(xué)結(jié)果匯總分析發(fā)現(xiàn),某些通路和蛋白功能有相似性,但并未完全重合。CHB肝郁脾虛證的分子機(jī)制與酶活性調(diào)節(jié)、免疫反應(yīng)、趨化因子介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、血小板活化等功能相關(guān)；CHB脾胃濕熱證的分子機(jī)制與炎癥反應(yīng)、脂質(zhì)結(jié)合、免疫反應(yīng)等功能相關(guān)。結(jié)論1.上述二證現(xiàn)代證本質(zhì)的研究結(jié)果較為豐富,但也存在差異性較大、特異性較差的問(wèn)題,因此應(yīng)嘗試建立病證結(jié)合的肝郁脾虛證、脾胃濕熱證多指標(biāo)聯(lián)合診斷；另外,隨著組學(xué)技術(shù)的整體性研究特色逐漸展現(xiàn),其廣泛運(yùn)用于未來(lái)中醫(yī)證本質(zhì)的研究必然是大勢(shì)所趨。2.經(jīng)過(guò)前期篩選和本次驗(yàn)證,PF4V、PSMA6作為CHB肝郁脾虛證的證候特異性表達(dá)蛋白較為可靠；FETUA、CATC、PLTP作為CHB脾胃濕熱證證候特異性表達(dá)蛋白較為可靠。3.獲取的CHB肝郁脾虛證和脾胃濕熱證蛋白表達(dá)譜和其他及本課題組其它組學(xué)成果間存在某些關(guān)聯(lián),但并未完全重合,故下一步需運(yùn)用對(duì)證候療效確切藥物進(jìn)行干預(yù),以動(dòng)態(tài)觀察上述指標(biāo)的變化。
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【學(xué)位授予單位】：成都中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R259

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1643434