本文關(guān)鍵詞：GRHL2基因促進(jìn)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的增殖和克隆形成

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【摘要】：目的:研究GRHL2(Grainy head-like 2)在非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中的表達(dá)情況以及其對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞增殖、克隆形成及遷移的影響。方法:首先通過(guò)蛋白印跡實(shí)驗(yàn)檢測(cè)GRHL2在非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞與正常人支氣管上皮細(xì)胞中的蛋白表達(dá)是否存在明顯差異;進(jìn)而選取A549和H1299兩株肺癌細(xì)胞,分為四組:NC組為無(wú)處理陰性對(duì)照組;CON組為轉(zhuǎn)染非特異性si RNA的陰性對(duì)照組;Si-1組為轉(zhuǎn)染GRHL2 siRNA1實(shí)驗(yàn)組;Si-2組為轉(zhuǎn)染GRHL2 siRNA2實(shí)驗(yàn)組。分別進(jìn)行RNA干擾實(shí)驗(yàn)與蛋白表達(dá)鑒定,再采用細(xì)胞結(jié)晶紫染色實(shí)驗(yàn)、低血清實(shí)驗(yàn)、克隆形成實(shí)驗(yàn)和劃痕實(shí)驗(yàn)等方法,探索GRHL2對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞增殖、克隆形成、遷移的影響。結(jié)果:蛋白印跡試驗(yàn)的結(jié)果顯示非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞A549、H1299、SPC-A1、H292中GRHL2的蛋白表達(dá)水平較正常人支氣管上皮細(xì)胞明顯升高(P0.05)。敲低GRHL2的表達(dá)可明顯降低非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的增殖、克隆形成(P0.05),而對(duì)其遷移能力無(wú)明顯影響(P0.05)。結(jié)論:GRHL2基因的蛋白表達(dá)水平在非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中表達(dá)明顯上調(diào);GRHL2可發(fā)揮促進(jìn)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞增殖、克隆的作用,然而對(duì)其遷移能力無(wú)明顯影響。
【關(guān)鍵詞】：非小細(xì)胞肺癌 GRHL2 細(xì)胞增殖
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R734.2
【目錄】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-7
• 中英文縮略詞表7-8
• 第1章 引言8-10
• 第2章 材料與方法10-19
• 2.1 材料10-12
• 2.1.1 細(xì)胞10
• 2.1.2 主要試劑10-11
• 2.1.3 主要儀器設(shè)備11-12
• 2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和方法步驟12-19
• 2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)（以100mm培養(yǎng)皿為例）12-13
• 2.2.2 Western-Blot13-15
• 2.2.3 siRNA轉(zhuǎn)染15-16
• 2.2.4 結(jié)晶紫實(shí)驗(yàn)檢測(cè)肺癌細(xì)胞增殖情況16-17
• 2.2.5 低血清實(shí)驗(yàn)17
• 2.2.6 克隆形成實(shí)驗(yàn)17
• 2.2.7 劃痕實(shí)驗(yàn)17-18
• 2.2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理18-19
• 第3章 結(jié)果19-24
• 3.1 GRHL2在非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞與正常支氣管上皮細(xì)胞中的表達(dá)情況19
• 3.2 敲低GRHL2對(duì)細(xì)胞增殖、克隆形成、遷移能力的影響19-24
• 3.2.1 基因干擾效果鑒定19-20
• 3.2.2 結(jié)晶紫實(shí)驗(yàn)20-21
• 3.2.3 低血清實(shí)驗(yàn)21
• 3.2.4 細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)21-22
• 3.2.5 劃痕實(shí)驗(yàn)22-24
• 第4章 討論24-27
• 第5章 結(jié)論與展望27-28
• 5.1 結(jié)論27
• 5.2 展望27-28
• 致謝28-29
• 參考文獻(xiàn)29-32
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果32-33
• 綜述 GRHL2基因在腫瘤領(lǐng)域的研究新進(jìn)展33-37
• 參考文獻(xiàn)36-37

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本文編號(hào)：840335