本文關(guān)鍵詞：尼古丁通過上調(diào)CD147對(duì)卵巢癌HO-8910的影響

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【摘要】：卵巢癌是婦科三大惡性腫瘤之一,也是最致命的婦科惡性腫瘤,由于其解剖位置深,早期無明顯癥狀且發(fā)病迅速,70%的患者診斷時(shí)已為晚期,5年生存率30%。雖然近些年來卵巢癌治療手段取得了較大進(jìn)展,但是治療失敗和疾病轉(zhuǎn)移仍無法避免。隨著全球女性吸煙者的增加,越來越多研究組織認(rèn)為吸煙是卵巢癌的潛在危險(xiǎn)因素。其中尼古丁是香煙的主要成分,有許多研究顯示尼古丁在許多體系中可以通過誘導(dǎo)細(xì)胞周期進(jìn)程,上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化、遷移、侵襲、血管生成、逃避凋亡促進(jìn)腫瘤的增長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。但吸煙是否與卵巢癌直接相關(guān)仍然爭(zhēng)議不斷,有研究認(rèn)為吸煙與粘液性卵巢癌密切相關(guān),但與漿液性卵巢癌的關(guān)系不明確。漿液性卵巢癌(serous ovarian carcinoma,SOC)是所有婦科癌癥中最常見且死亡率最高的亞型,因此,即使吸煙導(dǎo)致漿液性卵巢癌進(jìn)展程度很小,但對(duì)于世界范圍內(nèi)的影響而言其重要性是不可小覷的。CD147在人體內(nèi)廣泛分布,參與多種生理功能,且與腫瘤的增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移等過程密切相關(guān)。CDl47已被證實(shí)表達(dá)于多種人類腫瘤細(xì)胞中。CD147通過刺激成纖維細(xì)胞分泌基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs),其中MMPs家族中的MMP2、MMP9與腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的關(guān)系最為密切,通過降解細(xì)胞外基質(zhì),在許多癌癥侵襲、轉(zhuǎn)移和進(jìn)展中發(fā)揮重要作用。CD147的表達(dá)水平與腫瘤的惡性程度相關(guān),與癌癥患者的不良預(yù)后相關(guān),是一個(gè)潛在的預(yù)測(cè)癌癥發(fā)生和侵襲的生物標(biāo)記物。目的:探討尼古丁對(duì)卵巢癌HO-8910細(xì)胞系增殖、遷移作用的影響,及在這一過程中CD147的作用及其分子機(jī)制,為闡明CD147在尼古丁引起的細(xì)胞增殖、遷移作用的分子機(jī)制提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:1.體外培養(yǎng)卵巢癌HO-8910細(xì)胞系,用不同濃度的尼古丁處理,作用一段時(shí)間后,用MTT(四甲基偶氮唑鹽)比色法檢測(cè)細(xì)胞的增殖情況,用劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的遷移情況,用westernblot檢測(cè)cd147、mmp2、mmp9表達(dá)情況。2.先用sirnacd147沉默cd147基因,再用1um尼古丁處理,分別用mtt、劃痕實(shí)驗(yàn)、westernblot檢測(cè)細(xì)胞的增殖、遷移情況及cd147、mmp2、mmp9表達(dá)情況。3.先用erk抑制劑u0126抑制erk信號(hào)通路,再用1um尼古丁處理,用westernblot檢測(cè)u0126對(duì)細(xì)胞cd147、mmp2、mmp9的表達(dá)的影響。結(jié)果:1.尼古丁對(duì)卵巢癌ho-8910細(xì)胞作用適宜濃度和時(shí)間的確定用mtt法檢測(cè)細(xì)胞的存活率,結(jié)果顯示:尼古丁在一定范圍內(nèi)促進(jìn)ho-8910細(xì)胞增殖,隨著濃度的增高而增高,1um時(shí)為最大,若繼續(xù)增加尼古丁的濃度,則細(xì)胞生長(zhǎng)明顯受到抑制;尼古丁對(duì)ho-8910細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用隨時(shí)間的增加而增加,存在時(shí)間依賴關(guān)系。2.尼古丁對(duì)卵巢癌ho-8910細(xì)胞cd147、mmp2、mmp9表達(dá)的影響用westernblot檢測(cè)不同濃度尼古丁(0、0.1、1、10um)處理ho-8910細(xì)胞48小時(shí)后cd147、mmp2、mmp9的表達(dá)情況,結(jié)果顯示:隨著濃度的增加,細(xì)胞cd147、mmp2、mmp9的表達(dá)水平越高,1um時(shí)為最大;用1um尼古丁分別作用于ho-8910細(xì)胞0、24、48、72小時(shí),結(jié)果顯示:隨著作用時(shí)間的延長(zhǎng),細(xì)胞cd147、mmp2、mmp9的表達(dá)水平越高,存在時(shí)間依賴關(guān)系。3.尼古丁對(duì)卵巢癌ho-8910細(xì)胞erk活性的影響用westernblot檢測(cè)不同濃度尼古丁(0、0.1、1、10um)處理ho-8910細(xì)胞48小時(shí),erk磷酸化水平表達(dá)情況,結(jié)果顯示:隨著濃度的增高,細(xì)胞p-erk水平也逐漸增高,1um時(shí)為最大。4.cd147對(duì)尼古丁促進(jìn)卵巢癌ho-8910細(xì)胞erk活性及增殖、遷移的影響用尼古丁與cd147sirna轉(zhuǎn)染后的ho-8910細(xì)胞作用,用mtt比色法、westernblot、劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組細(xì)胞,結(jié)果顯示:cd147基因的沉默可導(dǎo)致細(xì)胞cd147、mmp2、mmp9表達(dá)及erk磷酸化水平的降低,同時(shí)細(xì)胞的增殖和遷移能力下降。5.erk抑制劑對(duì)尼古丁上調(diào)卵巢癌ho-8910細(xì)胞cd147、mmp2、mmp9作用的影響用尼古丁與erk抑制劑u0126預(yù)處理后的ho-8910細(xì)胞作用,用westernblot檢測(cè)各組細(xì)胞,結(jié)果顯示:ERK信號(hào)通路的抑制可導(dǎo)致細(xì)胞CD147、MMP2、MMP9表達(dá)水平降低。結(jié)論:1.尼古丁作用于卵巢癌HO-8910細(xì)胞系后,可以選擇性的增加細(xì)胞CD147的表達(dá),進(jìn)而上調(diào)MMP2和MMP9的表達(dá),導(dǎo)致細(xì)胞增殖和遷移能力增強(qiáng)。2.尼古丁這種促進(jìn)增殖和遷移的作用可以被CD147siRNA所抑制,提示CD147在尼古丁介導(dǎo)的增殖和遷移作用中起關(guān)鍵作用。3.在尼古丁作用過程中,發(fā)現(xiàn)ERK信號(hào)通路活化,且ERK抑制劑U0126可以抑制尼古丁介導(dǎo)的CD147、MMP2、MMP9的上調(diào),提示ERK信號(hào)通路在尼古丁介導(dǎo)的增殖和遷移過程中必不可少。
【關(guān)鍵詞】：卵巢癌 尼古丁 CD147
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R737.31
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• Abstract7-11
• 引言11-13
• 1 材料與方法13-20
• 2 結(jié)果20-27
• 3 討論27-30
• 4 結(jié)論30-31
• 參考文獻(xiàn)31-36
• 綜述36-46
• 參考文獻(xiàn)42-46
• 英文縮略詞表46-47
• 致謝47-49

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1 吳娟;邵淑麗;;多西紫杉醇對(duì)卵巢癌HO-8910細(xì)胞的增殖抑制及誘導(dǎo)凋亡的研究[J];中國(guó)藥物與臨床;2009年05期

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

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本文編號(hào)：818669