本文關(guān)鍵詞：乳腺癌髓源性抑制細(xì)胞（MDSC）對(duì)B細(xì)胞功能影響的研究

  更多相關(guān)文章： 髓源性抑制細(xì)胞(MDSCs) B淋巴細(xì)胞 免疫球蛋白

【摘要】：目的:探索小鼠乳腺癌模型中髓源性抑制細(xì)胞MDSCs對(duì)B細(xì)胞功能的影響,闡明MDSCs對(duì)B細(xì)胞功能調(diào)控的具體機(jī)制。方法:建立4T1-BALB/C小鼠乳腺癌模型,檢測(cè)荷瘤小鼠隨著時(shí)間的延長(zhǎng),小鼠脾臟的變化;用CD19作為B細(xì)胞的特異性表型,Gr-1和CD11b作為MDSCs的特異性表型,通過(guò)流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)荷瘤小鼠脾中MDSCs和B細(xì)胞比例的變化,同樣通過(guò)流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)荷瘤小鼠和正常小鼠脾和血中B細(xì)胞相關(guān)表型分子4-1BBL、CD80、CD86、MHCⅡ、CCR6、CD62L、PD-1和PD-L1的表達(dá)情況。通過(guò)磁珠分選技術(shù),從荷瘤小鼠脾臟細(xì)胞中分選出MDSCs,非荷瘤對(duì)照組小鼠脾臟中分選出B細(xì)胞,將MDSCs和B細(xì)胞按照3:1和5:1的比例共孵育,同時(shí)設(shè)置單獨(dú)B細(xì)胞組做對(duì)照。運(yùn)用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)MDSCs與B細(xì)胞共培養(yǎng)后對(duì)B細(xì)胞表型4-1BBL、CD80、CD86、MHCⅡ、CCR6、CD62L、PD-1和PD-L1的影響。運(yùn)用Brdu技術(shù)標(biāo)記共培養(yǎng)的B細(xì)胞,檢測(cè)B細(xì)胞的增殖情況。同時(shí)收集共培養(yǎng)的上清,運(yùn)用ELISA技術(shù)檢測(cè)培養(yǎng)上清中B細(xì)胞抗體Ig A、Ig M和Ig G的分泌情況。結(jié)果:4T1-BALB/C小鼠乳腺癌模型中,小鼠脾臟的大小,重量和細(xì)胞數(shù)都隨著荷瘤時(shí)間延長(zhǎng)而增加,并且小鼠脾臟中MDSCs的比例隨著荷瘤時(shí)間延長(zhǎng)出現(xiàn)了明顯升高的趨勢(shì),B細(xì)胞的比例則出現(xiàn)明顯下降趨勢(shì),荷瘤21天達(dá)到最低。流式結(jié)果顯示,與非荷瘤小鼠相比,荷瘤小鼠脾臟中B細(xì)胞的表型CD86、MHCⅡ、CCR6、CD62L、PD-1和PD-L1都出現(xiàn)了明顯下降趨勢(shì),且B細(xì)胞表型分子4-1BBL、CD62L、PD-L1和MHCⅡ在荷瘤鼠外周血中表達(dá)也明顯下降。體外MDSCs和B細(xì)胞的共孵實(shí)驗(yàn)中,B細(xì)胞的表型變化與荷瘤體系中B細(xì)胞變化基本一致,說(shuō)明MDSCs影響B(tài)細(xì)胞表面分子的表達(dá)。MDSCs和B細(xì)胞共孵育體系中5:1組與對(duì)照組相比,B細(xì)胞的增殖明顯降低。ELISA結(jié)果顯示,與MDSCs共培養(yǎng)后,B細(xì)胞體系中Ig M分泌濃度出現(xiàn)下降趨勢(shì),Ig A和Ig G的濃度則呈升高趨勢(shì)。結(jié)論:腫瘤中的MDSCs可能抑制B細(xì)胞的正常免疫功能,誘導(dǎo)B細(xì)胞高分泌Ig A和Ig G,低分泌Ig M。
【關(guān)鍵詞】：髓源性抑制細(xì)胞(MDSCs) B淋巴細(xì)胞 免疫球蛋白
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R730.5
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-9
• 縮略語(yǔ)/符號(hào)說(shuō)明9-11
• 前言11-14
• 研究現(xiàn)狀、成果11-12
• 研究目的、方法12-14
• 1 對(duì)象和方法14-23
• 1.1 材料與儀器14-15
• 1.1.1 細(xì)胞系14
• 1.1.2 研究對(duì)象14
• 1.1.3 研究試劑14-15
• 1.1.4 研究?jī)x器15
• 1.2 試劑配制15-16
• 1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)液的配制15-16
• 1.2.2 細(xì)胞凍存液的配制16
• 1.2.3 0.5%BSA溶液的配制16
• 1.3 研究方法16-22
• 1.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)16-18
• 1.3.2 脾細(xì)胞提取18-19
• 1.3.3 磁珠分選腫瘤相關(guān)MDSCs和B細(xì)胞19-20
• 1.3.4 脾細(xì)胞表面流式抗體標(biāo)記20-21
• 1.3.5 腫瘤相關(guān)MDSCs與B細(xì)胞共孵育21
• 1.3.6 Brdu實(shí)驗(yàn)檢測(cè)B細(xì)胞的增殖情況21-22
• 1.3.7 ELISA檢測(cè)22
• 1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法22-23
• 2 結(jié)果23-32
• 2.1 4T1-BALB/C小鼠乳腺癌模型脾中MDSCs和B細(xì)胞比例的變化及B細(xì)胞表型變化23-28
• 2.1.1 4T1乳腺癌荷瘤小鼠脾臟隨時(shí)間的變化情況23
• 2.1.2 4T1乳腺癌小鼠脾臟中MDSCs和B細(xì)胞的比例隨時(shí)間的變化情況23-24
• 2.1.3 4T1乳腺癌荷瘤小鼠21天脾臟中MDSCs和B細(xì)胞的具體變化情況24-25
• 2.1.4 4T1乳腺癌荷瘤小鼠脾臟中B細(xì)胞表型的變化情況25-26
• 2.1.5 4T1乳腺癌荷瘤小鼠外周血中B細(xì)胞表型的變化情況26-27
• 2.1.6 4T1乳腺癌荷瘤小鼠外周血中CD19+CD62L-B細(xì)胞比例變化情況27-28
• 2.2 腫瘤相關(guān)MDSCs與B細(xì)胞共孵后B細(xì)胞表型及功能出現(xiàn)變化28-32
• 2.2.1 腫瘤相關(guān)MDSCs與B細(xì)胞共孵后，，B細(xì)胞表型變化28-29
• 2.2.2 腫瘤相關(guān)MDSCs與B細(xì)胞共孵后，B細(xì)胞增殖變化29-30
• 2.2.3 腫瘤相關(guān)MDSCs與B細(xì)胞共孵體系中B細(xì)胞抗體分泌情況30-32
• 3 討論32-39
• 3.1 4T1-BALB/C動(dòng)物模型32-33
• 3.2 B細(xì)胞的表面分子及功能特點(diǎn)33-36
• 3.3 Breg細(xì)胞的表面分子及功能特點(diǎn)36
• 3.4 在免疫系統(tǒng)中MDSCs對(duì)B細(xì)胞功能的影響36-37
• 3.5 在腫瘤中MDSCs對(duì)B細(xì)胞功能的影響37-38
• 3.6 結(jié)語(yǔ)38-39
• 結(jié)論39-40
• 參考文獻(xiàn)40-48
• 發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明48-49
• 綜述 腫瘤中MDSCs在免疫抑制機(jī)制方面的研究進(jìn)展49-64
• 綜述參考文獻(xiàn)56-64
• 致謝64-65
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷65

本文編號(hào)：739276