本文關(guān)鍵詞：CastPCR法檢測(cè)EGFR驅(qū)動(dòng)突變?cè)诜伟┲械某醪綉?yīng)用探討

  更多相關(guān)文章： 肺癌 個(gè)體化治療 體細(xì)胞突變 EGFR基因 castPCR

【摘要】：目的：非小細(xì)胞肺癌患者的EGFR基因突變狀態(tài)是臨床使用EGFR TKIs的重要療效預(yù)測(cè)分子標(biāo)志物。因此,臨床治療前對(duì)肺癌患者進(jìn)行基因突變檢測(cè),可指導(dǎo)患者個(gè)體化用藥,減輕患者經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān),同時(shí)也可使EGFR TKIs的療效最大化。在治療過(guò)程中如能對(duì)患者的EGFR突變狀態(tài)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè),有利于早期療效及預(yù)后判斷。臨床上穩(wěn)定、高效的分子檢測(cè)平臺(tái)的建立是實(shí)現(xiàn)上述目標(biāo)的關(guān)鍵所在。本實(shí)驗(yàn)的主要目的：采用castPCR方法檢測(cè)腫瘤組織EGFR基因突變,研究初治肺腺癌患者EGFR基因突變狀況,初步系統(tǒng)評(píng)價(jià)castPCR法檢測(cè)]EGFR突變?cè)贜SCLC患者中的應(yīng)用價(jià)值并探討其與患者臨床生物學(xué)行為的相關(guān)性。由于部分晚期腫瘤患者難以取得合適的腫瘤組織標(biāo)本進(jìn)行分子檢測(cè),以及在EGFR TKIs治療中獲得性耐藥的存在,外周血清/血漿中的游離核酸以其蘊(yùn)含的豐富分子生物學(xué)信息吸引了廣泛關(guān)注。本研究中采用已知的突變細(xì)胞系DNA模擬外周血檢測(cè)的情況,初步分析論證了castPCR法檢測(cè)EGFR相關(guān)突變位點(diǎn)的敏感性,為后續(xù)基于肺癌患者外周血游離核酸中EGFR驅(qū)動(dòng)突變的檢測(cè)奠定了基礎(chǔ)。方法：1、收集2010年11月至2014年12月南京大學(xué)附屬鼓樓醫(yī)院103例初治的肺腺癌患者的臨床病理資料、腫瘤組織及配對(duì)的治療前外周血標(biāo)本。使用castPCR法檢測(cè)患者腫瘤組織標(biāo)本EGFR基因突變(外顯子19 de12235-2249和de12236-2250；外顯子20 T790M；外顯子21 L858R)。探討EGFR基因突變狀態(tài)與103例NSCLC患者臨床生物學(xué)行為之間的相關(guān)性。2、將EGFR基因突變細(xì)胞DNA按照一定比例稀釋到EGFR野生型DNA中,用castPCR法檢測(cè)突變,獲得檢測(cè)EGFR基因突變的敏感性。為后續(xù)檢測(cè)血漿游離核酸中EGFR驅(qū)動(dòng)突變奠定基礎(chǔ)。結(jié)果：103例肺腺癌患者腫瘤組織中共有54例檢出了存在至少一個(gè)位點(diǎn)的EGFR基因突變(突變率52.43%),其中敏感突變(外顯子19和／或外顯子21)為45人(43.69%),外顯子20突變?yōu)?1人(10.68%)。同時(shí)我們的研究發(fā)現(xiàn)部分患者存在敏感突變與敏感突變、敏感突變與耐藥突變共存的現(xiàn)象,其中外顯子19和20共突變2人,外顯子19和21共突變4人,外顯子20和21共突變1人。體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)表明castPCR法檢測(cè)EGFR基因外顯子19和外顯子21突變的敏感性為0.1%,外顯子20突變的敏感性為1%。結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)我們采用靈敏性高、特異性好的方法,通過(guò)對(duì)103例肺腺癌患者腫瘤組織EGFR基因突變狀態(tài)的檢測(cè),初步論證了該方法在肺癌EGFR驅(qū)動(dòng)突變檢測(cè)方面的臨床可行性。同時(shí),通過(guò)對(duì)模擬外周血游離核酸中微量突變存在的檢測(cè),證實(shí)了該方法后續(xù)進(jìn)一步檢測(cè)患者配對(duì)血漿游離核酸中EGFR突變的可行性。
【關(guān)鍵詞】：肺癌 個(gè)體化治療 體細(xì)胞突變 EGFR基因 castPCR
【學(xué)位授予單位】：南京大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R734.2
【目錄】：

• 常用英文縮略詞5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 緒論10-20
• 前言10
• 惡性腫瘤的個(gè)體化治療10-16
• 參考文獻(xiàn)16-20
• 第一部分 CastPCR法檢測(cè)肺腺癌患者腫瘤組織EGFR基因突變20-38
• 前言20-23
• 材料和方法23-27
• 結(jié)果27-30
• 討論30-34
• 參考文獻(xiàn)34-38
• 第二部分 CastPCR法檢測(cè)游離核酸中驅(qū)動(dòng)突變的探討38-50
• 前言38-39
• 材料和方法39-44
• 結(jié)果和討論44-48
• 參考文獻(xiàn)48-50
• 全文總結(jié)50-51
• 綜述51-63
• 參考文獻(xiàn)58-63
• 研究生期間發(fā)表的文章63-64
• 致謝64-65

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 常秀青 ,Tony Sheldon;低焦油含量香煙與肺腺癌發(fā)病率上升有關(guān)[J];英國(guó)醫(yī)學(xué)雜志(中文版);2002年01期

2 鄧小梅,何權(quán)瀛;細(xì)支氣管肺泡細(xì)胞癌與其他類型肺腺癌的對(duì)比分析[J];中國(guó)呼吸與危重監(jiān)護(hù)雜志;2005年03期

3 楊長(zhǎng)青;王蓮芳;;飛行人員右肺腺癌1例[J];海軍醫(yī)學(xué)雜志;2006年04期

4 陳小兵;閆明;羅素霞;李寧;鄒宏志;韓黎麗;;84例青年肺腺癌早期誤診原因分析[J];實(shí)用診斷與治療雜志;2007年09期

5 陳小兵;閆明;曾軍杰;羅素霞;;青年女性肺腺癌首發(fā)癥狀及早期誤診原因分析[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生;2009年06期

6 周琪;段亮;姜格寧;丁嘉安;;青年男性肺腺癌臨床特征對(duì)預(yù)后的影響[J];中國(guó)癌癥雜志;2009年08期

7 張文麗;;以高熱為首發(fā)癥狀的肺腺癌病例并文獻(xiàn)復(fù)習(xí)[J];甘肅醫(yī)藥;2013年07期

8 郭哲;肺腺癌病人的預(yù)防性頭顱照射[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(腫瘤學(xué)分冊(cè));1988年06期

9 劉福升，李險(xiǎn)峰，楊愛(ài)民，王彤;肺腺癌誤診肺結(jié)核16例分析[J];中國(guó)防癆雜志;1994年01期

10 余偉江;放療及合并化療治療Ⅲ期肺腺癌療效分析[J];腫瘤防治研究;1994年04期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 孫強(qiáng);顧春東;雷霆;王金;李錦繡;;浸潤(rùn)性周圍型小肺腺癌(≤2cm)不同病理亞型的比較[A];第13屆全國(guó)肺癌學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2013年

2 袁明遠(yuǎn);;周圍型肺腺癌病灶的放射學(xué)分類及其臨床價(jià)值[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第16次全國(guó)放射學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2009年

3 顧國(guó)浩;;生物芯片在肺腺癌診斷中的應(yīng)用進(jìn)展[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第八次全國(guó)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)分會(huì)成立30周年慶典大會(huì)資料匯編[C];2009年

4 林嘉穎;吳一龍;楊學(xué)寧;喬貴賓;王坤;陳剛;;不同預(yù)后的肺腺癌患者酪氨酸激酶信號(hào)傳導(dǎo)通路異常的初步探討[A];第三屆中國(guó)腫瘤學(xué)術(shù)大會(huì)教育論文集[C];2004年

5 湯秀英;吳立紅;張燁;;肺腺癌的超微觀察及異質(zhì)性探討[A];第八次全國(guó)電子顯微學(xué)會(huì)議論文摘要集（Ⅰ）[C];1994年

6 徐芝君;應(yīng)可凈;;胸部CT基本正常肺腺癌伴慢性DIC一例并文獻(xiàn)復(fù)習(xí)[A];浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸系病分會(huì)成立三十周年慶典活動(dòng)暨2008年呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

7 邵艷;洪偉俊;寧允葉;胥武劍;李強(qiáng);;肺腺癌惡性轉(zhuǎn)化相關(guān)蛋白的初步篩查[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)年會(huì)——2011（第十二次全國(guó)呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議）論文匯編[C];2011年

8 王恩華;;解讀及評(píng)價(jià)國(guó)際多學(xué)科肺腺癌分類[A];2012年浙江省病理學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2012年

9 宋正波;朱慧能;郭振英;吳偉;孫文勇;張沂平;;肺腺癌新分類在預(yù)測(cè)Ⅰ期非小細(xì)胞肺腺癌預(yù)后中的價(jià)值[A];第13屆全國(guó)肺癌學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2013年

10 趙燕妮;曹菊;牟向東;闕呈立;;肺腺癌影像反復(fù)波動(dòng)病例報(bào)告一例并文獻(xiàn)復(fù)習(xí)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)年會(huì)——2013第十四次全國(guó)呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

1 丁香;日發(fā)現(xiàn)肺腺癌的預(yù)測(cè)因子[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2007年

2 仇逸邋孫國(guó)根;吸煙丈夫的妻子,患肺腺癌風(fēng)險(xiǎn)高[N];新華每日電訊;2007年

3 曾理;肺腺癌早診研究關(guān)注“起源”[N];健康報(bào);2008年

4 記者 李天舒　胡德榮;為何不吸煙者也患肺癌[N];健康報(bào);2010年

5 記者 胡德榮;非吸煙肺腺癌人群致癌基因突變譜建立[N];健康報(bào);2011年

6 高原;或與MiR-21分子有關(guān)[N];廣東科技報(bào);2009年

7 海飛魚;探索肺癌突變基因[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2008年

8 健康時(shí)報(bào)記者 王志勝;一樣的腫瘤,不一樣治法[N];健康時(shí)報(bào);2009年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 孫正亮;肺腺癌的分子分型特征及其與病理分型的關(guān)聯(lián)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

2 楊欣;肺腺癌預(yù)后相關(guān)的臨床病理因素分析及分子病理研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

3 鄭華;篩選肺腺癌相關(guān)血清自身抗體標(biāo)志物[D];北京市結(jié)核病胸部腫瘤研究所;2010年

4 張揚(yáng);肺腺癌致癌基因突變研究[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

5 張麗;基于IASLC/ATS/ERS國(guó)際多學(xué)科新分類的肺腺癌影像學(xué)及相關(guān)研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

6 楊繼要;肺腺癌腫瘤相關(guān)抗原的篩選鑒定及克隆表達(dá)[D];鄭州大學(xué);2006年

7 何萍;染色體15q25.1區(qū)域基因多態(tài)性與中國(guó)南方人群肺腺癌易感性的關(guān)聯(lián)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2014年

8 李亞光;PI3K-Akt通路與肺腺癌術(shù)后患者預(yù)后的相關(guān)性研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2012年

9 趙偉鵬;肺腺癌淋巴管生成相關(guān)基因的篩選和初步鑒定[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2009年

10 劉亞嵐;水通道蛋白3在人體多種器官正常和癌組織中的表達(dá)及意義[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2007年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 蘇帆;rhPDCD5蛋白對(duì)肺腺癌A549細(xì)胞化療作用的研究[D];石河子大學(xué);2015年

2 卜靜;順鉑聯(lián)合雷帕霉素、3-MA對(duì)肺腺癌A549細(xì)胞及其裸鼠原位移植瘤的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

3 韓承剛;寶石CT灌注成像在肺腺癌生物治療療效評(píng)價(jià)中的應(yīng)用價(jià)值[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

4 展峰峰;肺腺癌患者組織中EML4-ALK融合基因與TYMS mRNA表達(dá)的關(guān)系[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

5 趙玉澤;Ago2蛋白在EGFR突變的肺腺癌患者中的表達(dá)及臨床意義[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

6 孫天宇;轉(zhuǎn)錄輔助因子4過(guò)表達(dá)與肺腺癌淋巴轉(zhuǎn)移和預(yù)后的相關(guān)性[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

7 崔巍;肺腺癌患者外周血IL-17A~+T細(xì)胞和相關(guān)細(xì)胞因子檢測(cè)及意義[D];浙江大學(xué);2015年

8 趙鳳芝;bFGF單抗聯(lián)合Lobaplatin抑制肺腺癌細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移和誘導(dǎo)凋亡的機(jī)制研究[D];暨南大學(xué);2015年

9 邊猛;溫通法聯(lián)合化療對(duì)EGFR-TKIs耐藥后的脾腎陽(yáng)虛型肺腺癌患者的臨床療效觀察[D];河南中醫(yī)學(xué)院;2015年

10 高正亞;Ⅰ期肺腺癌患者外周血和淋巴結(jié)中CK19及LUNX mRNA的表達(dá)與微轉(zhuǎn)移的相關(guān)性研究[D];蘇州大學(xué);2015年

，

本文編號(hào)：738403