本文關(guān)鍵詞：miR-3195對(duì)人喉癌Hep-2細(xì)胞增殖的抑制作用及其機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： 喉癌 Hep-2細(xì)胞株 miR-3195 抑制增殖

【摘要】：研究目的:本實(shí)驗(yàn)探討miR-3195在人喉癌Hep-2細(xì)胞中的增殖作用及機(jī)制,通過(guò)構(gòu)建穩(wěn)定高表達(dá)miR-3195的喉癌Hep-2細(xì)胞株,觀(guān)察miR-3195高表達(dá)后對(duì)人喉癌細(xì)胞株Hep-2裸鼠移植瘤增殖能力的影響,了解喉癌中miR-3195的生物學(xué)功能,通過(guò)生物信息學(xué)分析miR-3195可能調(diào)控的靶基因,初步分析其分子機(jī)制。方法:1、應(yīng)用MTT實(shí)驗(yàn)觀(guān)察miR-3195過(guò)表達(dá)后對(duì)喉癌Hep-2細(xì)胞增殖能力的影響。2、建立裸鼠移植瘤模型裸鼠皮下注入miR-3195 5.7倍/Hep-2,psh RNA-miR/Hep-2和Hep-2三組細(xì)胞建立人喉癌異種移植瘤模型,監(jiān)測(cè)三種不同細(xì)胞接種后裸鼠移植瘤的腫瘤形成及腫瘤生長(zhǎng)情況。3、生物信息學(xué)分析對(duì)miR-3195可能的靶基因進(jìn)行預(yù)測(cè)。4、Western blot驗(yàn)證miR-3195與其靶基因在喉癌細(xì)胞中的調(diào)控關(guān)系。結(jié)果:1、通過(guò)MTT比色法分析顯示,以Hep-2組,psh RNA-miR/Hep-2及miR-3195 5.7倍/Hep-2細(xì)胞為研究對(duì)象,觀(guān)察miR-3195高表達(dá)后對(duì)喉癌Hep-2增殖能力的影響,其結(jié)果表明,miR-3195 5.7倍/Hep-2組細(xì)胞增殖落后Hep-2組和psh RNA-miR/Hep-2組,表明miR-3195高表達(dá)后抑制Hep-2細(xì)胞的增殖。2、三組細(xì)胞皮下接種后在裸鼠體內(nèi)均成瘤,接種psh RNA-miR/Hep-2細(xì)胞和Hep-2細(xì)胞組移植瘤較接種miR-3195 5.7倍/Hep-2細(xì)胞組移植瘤生長(zhǎng)快。接種后30天處死裸鼠,psh RNA-miR/Hep-2細(xì)胞和Hep-2細(xì)胞組移植瘤重量明顯高于miR-3195 5.7倍/Hep-2細(xì)胞組。3、靶基因預(yù)測(cè)軟件預(yù)測(cè)miR-3195 3’UTR特異性靶基因,發(fā)現(xiàn)有4個(gè)與腫瘤相關(guān),其中預(yù)測(cè)結(jié)果顯示:miR-3195與ST3GAL23’UTR有2個(gè)結(jié)合位點(diǎn),miR-3195與TBX1 3’UTR有1個(gè)結(jié)合位點(diǎn)。4、Western blot蛋白印記法檢測(cè)miR-3195與其靶基因ST3GAL2、TBX1在喉癌細(xì)胞中的調(diào)控關(guān)系:結(jié)果表明:miR-3195 5.7倍/Hep-2組較psh RNA-miR/Hep-2細(xì)胞和Hep-2組TBX1蛋白表達(dá)量明顯下降,而ST3GAL2則下降不明顯,提示miR-3195抑制喉癌的增殖可能與抑制TBX1基因表達(dá)有關(guān)。結(jié)論:1、miR-3195高表達(dá)后可以抑制喉癌Hep-2細(xì)胞株的增殖。2、miR-3195高表達(dá)后可能通過(guò)下調(diào)TBX1基因的表達(dá)水平,進(jìn)而抑制喉癌Hep-2細(xì)胞株的增殖。
【關(guān)鍵詞】：喉癌 Hep-2細(xì)胞株 miR-3195 抑制增殖
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R739.65
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 主要中英文縮略語(yǔ)表9-11
• 第1章 前言11-15
• 第2章 材料和方法15-25
• 第3章 結(jié)果25-33
• 第4章 討論33-37
• 第5章 結(jié)論37-39
• 參考文獻(xiàn)39-43
• 綜述：長(zhǎng)鏈非編碼RNA在喉癌中的表達(dá)及意義43-49
• 參考文獻(xiàn)47-49
• 攻讀碩士學(xué)位期間完成、發(fā)表論文情況49-51
• 致謝51

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