本文關(guān)鍵詞：人肝癌組織中肝癌干細(xì)胞的分離培養(yǎng)與鑒定

  更多相關(guān)文章： 肝癌組織 腫瘤干細(xì)胞 CD133 CD90 裸鼠成瘤

【摘要】：目的體外分離及培養(yǎng)人肝癌組織中的肝癌干細(xì)胞并鑒定其生物學(xué)特性。方法收集臨床肝癌患者術(shù)后肝癌組織,用酶消化法分離肝癌細(xì)胞,將其接種于無(wú)血清培養(yǎng)基中培養(yǎng),并在超低粘附24孔板中觀察肝癌干細(xì)胞克隆球生長(zhǎng)情況;用MTT比色法檢測(cè)肝癌干細(xì)胞增值能力;用肝癌干細(xì)胞表面標(biāo)記物CD90、CD133抗體,采用流式細(xì)胞儀鑒定并分選CD90+細(xì)胞、CD90-細(xì)胞,CD133+細(xì)胞、CD133-細(xì)胞,將4種不同細(xì)胞組成CD90+細(xì)胞CD133+細(xì)胞、CD90-細(xì)胞CD133+細(xì)胞、CD133-細(xì)胞CD90+細(xì)胞及CD133-細(xì)胞CD90-細(xì)胞,分別接種于裸鼠皮下觀察其成瘤能力并記錄腫瘤體積;將裸鼠成瘤后的組織進(jìn)行HE染色。結(jié)果在無(wú)血清培養(yǎng)基中,肝癌干細(xì)胞可以形成少量的細(xì)胞克隆球;MTT比色法檢測(cè),在連續(xù)72小時(shí)里,肝癌干細(xì)胞克隆球始終處于持續(xù)增值狀態(tài);采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)顯示肝癌干細(xì)胞表面標(biāo)記物CD90、CD133陽(yáng)性率分別是7.2%、8.8%,并成功分選出CD90+細(xì)胞、CD90-細(xì)胞、CD133+細(xì)胞、CD133-細(xì)胞,將組成的4種不同細(xì)胞組分別接種于裸鼠皮下,結(jié)果顯示,CD90+細(xì)胞CD133+細(xì)胞、CD90-細(xì)胞CD133+細(xì)胞及CD133-細(xì)胞CD90+細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)均形成腫瘤,且CD90+細(xì)胞CD133+細(xì)胞組在最短時(shí)間內(nèi)出現(xiàn)了較高的致瘤能力。而CD133-細(xì)胞CD90-細(xì)胞在整個(gè)過(guò)程中未見(jiàn)腫瘤形成。將裸鼠體內(nèi)的腫瘤經(jīng)HE染色,其結(jié)果與人肝癌組織病理特點(diǎn)相似。結(jié)論成功建立了從人肝癌組織中分離培養(yǎng)肝癌干細(xì)胞的方法;培養(yǎng)得到的肝癌干細(xì)胞能在無(wú)血清培養(yǎng)基中形成克隆球,且具有較強(qiáng)的增值能力;部分細(xì)胞表達(dá)CD90+細(xì)胞和CD133+細(xì)胞,且在裸鼠體內(nèi)形成腫瘤;肝癌組織中CD90+細(xì)胞和CD133+細(xì)胞具有肝癌干細(xì)胞特性,可能為肝癌干細(xì)胞。
【關(guān)鍵詞】：肝癌組織 腫瘤干細(xì)胞 CD133 CD90 裸鼠成瘤
【學(xué)位授予單位】：寧夏醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R735.7
【目錄】：

• 摘要4-5
• 英文摘要5-7
• 符號(hào)說(shuō)明7-9
• 前言9-13
• 第一部分人肝癌組織中肝癌干細(xì)胞分離培養(yǎng)與分選13-27
• 1 實(shí)驗(yàn)材料13-15
• 2 實(shí)驗(yàn)方法及步驟15-19
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果19-22
• 4 討論22-27
• 第二部分裸鼠皮下人肝癌干細(xì)胞成瘤模型27-35
• 1 實(shí)驗(yàn)材料27
• 2 實(shí)驗(yàn)方法及步驟27-29
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果29-31
• 4 討論31-35
• 結(jié)論35-36
• 參考文獻(xiàn)36-41
• 綜述41-55
• 綜述參考文獻(xiàn)51-55
• 致謝55-56
• 個(gè)人簡(jiǎn)介56

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本文編號(hào)：526019