發(fā)布時間：2017-06-25 03:14

  本文關鍵詞：硼替佐米耐藥多發(fā)性骨髓瘤細胞基因表達譜分析，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景：多發(fā)性骨髓瘤是一種起源于漿細胞的惡性克隆性增殖疾病,好發(fā)于中老年,我國的平均發(fā)病年齡大約58歲,北美和歐洲約為70歲。我國人口的老齡化使得多發(fā)性骨髓瘤的發(fā)病率逐年升高。迄今為止,臨床上采用的放化療、自體/異體干細胞移植和靶向藥物治療多發(fā)性骨髓瘤,提高了患者生活質量、延長生存期,但仍無法治愈。硼替佐米是一種蛋白酶體抑制劑,通過靶向作用于泛素-蛋白酶體系統(tǒng),抑制核因子NF-κB的活性促進細胞凋亡,進而發(fā)揮抗腫瘤作用。目前硼替佐米已成為多發(fā)性骨髓瘤的首選藥物,硼替佐米、地塞米松和/或傳統(tǒng)化療藥物組成的聯(lián)合化療方案是多發(fā)性骨髓瘤的標準治療選擇。隨著硼替佐米臨床上的廣泛應用,原發(fā)或繼發(fā)耐藥也隨之產生。多發(fā)性骨髓瘤對硼替佐米的耐藥機制極為復雜,研究發(fā)現(xiàn)可能與NF-κB通路、PSMB5突變及漿細胞去分化有關。然而至今尚未完全闡明,尤其是不同于現(xiàn)有腫瘤多發(fā)耐藥的耐藥機制。因此,我們需要深入研究探尋預防及逆轉其耐藥的靶點。目的：應用基因芯片技術分析硼替佐米敏感多發(fā)性骨髓瘤細胞株KM3與耐藥多發(fā)性骨髓瘤細胞株KM3/BTZ基因表達的差異性,探討硼替佐米耐藥相關基因及耐藥發(fā)生機制。方法：1.采用Affymetrix U133 plus 2.0全基因組表達譜芯片,分析KM3與KM3/BTZ之間的基因表達。2.采用RT-PCR法進一步檢測基因表達的差異性。3.采用Western Blot法進一步檢測差異基因蛋白表達水平的差異性。4.采用RT-PCR法檢測初診多發(fā)性骨髓瘤患者與難治復發(fā)多發(fā)性骨髓瘤患者差異基因的表達。5.運用分子注釋系統(tǒng)MAS3.0軟件和已知耐藥相關基因進行數(shù)據(jù)分析。結果：1. KM3/BTZ與KM3相比,670個基因的表達具有差異性,差異表達10倍以上基因32個,主要涉及轉錄調控、信號傳導通路等生物效應過程分子；HSPB2、ZNF及MS4A家族部分基因在KM3中低表達,然而在KM3/BTZ中明顯上調；2.RT-PCR法檢測顯示,在KM3和KM3/BTZ細胞中,除JUN基因,其他7個基因(CA12、CYP1B1、EPB41L3、HSPB2、MS4A4A、SDPR、PAWR)與芯片檢測表達差異結果相符。3. Western Blot法檢測顯示,Par4蛋白表達與芯片檢測表達差異結果相符。4.復發(fā)進展MM患者PAWR基因表達水平(0.034±0.013),明顯低于初診MM患者PAWR基因表達水平(0.11±0.053),P0.05。5.采用分子注釋系統(tǒng)(MAS)3.0中的GO生物學過程對基因表達差異富集分析顯示,耐藥細胞株相對于原代細胞株上調基因的表達差異主要參與免疫反應、依賴DNA的轉錄調節(jié)、轉錄、信號轉導、絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)、細胞黏附及神經系統(tǒng)發(fā)育等方面。下調基因主要集中在信號轉導、離子轉運、依賴DNA的轉錄調節(jié)、轉導及細胞黏附。結論：1.在KM3與KM3/BTZ篩選中,ZNF、MS4A家族部分成員以及另外30個表達差異10倍以上的基因,均有可能與多發(fā)性骨髓瘤硼替佐米耐藥相關,尤其是PAWR基因。2.全基因數(shù)據(jù)篩選和耐藥相關基因具體分析,是探討多發(fā)性骨髓瘤細胞耐藥機制的理想方法之一
【關鍵詞】：多發(fā)性骨髓瘤 硼替佐米 耐藥 基因芯片
【學位授予單位】：山東大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R733.3
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 符號說明11-12
• 前言12-15
• 材料與方法15-31
• 結果31-33
• 討論33-38
• 結論38-39
• 附表39-42
• 附圖42-46
• 參考文獻46-50
• 致謝50-51
• 碩士研究生期間發(fā)表的文章51-52
• 附件52

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本文編號：480577