目的:探討晚期糖基化終末產物(advanced glycation end products,AGEs)對結直腸癌HCT116細胞上皮-間質轉化及腫瘤細胞干性的影響,及其可能的作用機制。方法:200μg/mL AGEs和200μg/mL AGEs聯(lián)合50μmol/L磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)特異性抑制劑LY294002處理HCT116細胞后,分別應用CCK-8法、劃痕愈合實驗、Transwell小室法、克隆形成實驗和腫瘤細胞成球實驗檢測HCT116細胞的增殖、遷移、侵襲、克隆形成和細胞成球能力。200μg/mL AGEs和200μg/mL AGEs聯(lián)合50μmol/L LY294002處理HCT116細胞球后,應用Transwell小室法檢測細胞的侵襲能力,FCM法檢測CD133+細胞球所占比例,蛋白質印跡法檢測HCT116細胞球中CD133、基質金屬蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和MMP-9蛋白的表達。不同濃度AGEs、200μg/mL AGEs和200μg/mL AGEs聯(lián)合...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要材料
    1.2 細胞及細胞培養(yǎng)
    1.3 CCK-8法檢測AGEs對HCT116細胞增殖的影響
    1.4 劃痕愈合實驗檢測AGEs對HCT116細胞遷移能力的影響
    1.5 Transwell小室法檢測AGEs對HCT116細胞侵襲能力的影響
    1.6 克隆形成實驗檢測AGEs對HCT116細胞克隆形成能力的影響
    1.7 腫瘤細胞球形成實驗檢測AGEs對HCT116細胞成球能力的影響
    1.8 Transwell小室法檢測AGEs對HCT116細胞球侵襲能力的影響
    1.9 FCM法檢測AGEs對HCT116細胞球表面CD133表達的影響
    1.1 0 蛋白質印跡法檢測AGEs對HCT116細胞球CD133、MMP-2和MMP-9蛋白表達的影響
    1.1 1 蛋白質印跡法檢測AGEs對HCT116細胞RAGE、PI3K信號通路分子和EMT標志蛋白表達的影響
    1.1 2 統(tǒng)計學方法
2 結果
    2.1 AGEs促進HCT116細胞增殖、遷移及侵襲
    2.2 AGEs促進HCT116細胞的克隆形成和細胞成球
    2.3 AGEs促進HCT116細胞球的侵襲
    2.4 AGEs上調CD133+HCT116細胞球比例
    2.5 A G E s上調H C T 1 1 6細胞球C D 1 3 3、MMP-2和MMP-9蛋白表達水平
    2.6 AGEs上調HCT116細胞中RAGE、p-PI3K、p-Akt、N-cadherin和vimentin蛋白的表達水平
3 討論



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