目的:鐵死亡（Ferroptosis）是一種新的調(diào)節(jié)性細(xì)胞死亡形式,是鐵離子依賴的脂質(zhì)過(guò)氧化物（Lipid reactive oxygen species,lipid ROS）累積到致死水平所導(dǎo)致的細(xì)胞死亡。鐵死亡不能被凋亡抑制劑如壞死穩(wěn)定素（Necrostatin-1）或自噬抑制劑如氯喹（Chloroquine）抑制,但是可被鐵離子螯合劑如去鐵胺（Deferoxamine）或者合成的抗氧化劑如ferrostatin-1抑制。鐵死亡主要涉及鐵離子代謝、脂質(zhì)過(guò)氧化以及system Xc--GSH-GPX4軸。細(xì)胞內(nèi)鐵離子穩(wěn)態(tài)與細(xì)胞對(duì)鐵離子的吸收、排出和存儲(chǔ)有關(guān)。細(xì)胞內(nèi)鐵離子調(diào)節(jié)蛋白的失調(diào)會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)Fe2+過(guò)量的積累并通過(guò)Fenton反應(yīng)促進(jìn)lipid ROS產(chǎn)生。System Xc-是一種廣泛存在于磷脂雙層膜中的氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,溶質(zhì)載體家族7成員11（Solute carrier family 7 member 11,SLC7A11）編碼的輕鏈?zhǔn)莝ystem Xc-特有的亞基,且SLC7A11的表達(dá)水平通常與system Xc-的活性呈正相關(guān)。細(xì)胞通過(guò)system Xc-攝取細(xì)胞外胱氨... 

【文章頁(yè)數(shù)】：78 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語(yǔ)
第一部分:GDF15對(duì)Erastin誘導(dǎo)的胃癌細(xì)胞鐵死亡的影響
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 細(xì)胞系
        2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.3 主要實(shí)驗(yàn)材料和儀器
            2.3.1 相關(guān)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)材料
            2.3.2 主要儀器
        2.4 生物信息學(xué)網(wǎng)址和計(jì)算機(jī)分析軟件
        2.5 實(shí)驗(yàn)方法
            2.5.1 細(xì)胞培養(yǎng)
            2.5.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
            2.5.3 細(xì)胞總RNA的提取
            2.5.4 c DNA合成和實(shí)時(shí)定量PCR
            2.5.5 Western blotting
            2.5.6 Erastin、sorafenib和ferrostatin-1 儲(chǔ)存液及工作液配制
            2.5.7 CCK-8 檢測(cè)細(xì)胞活性
            2.5.8 細(xì)胞狀態(tài)觀察
            2.5.9 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
            2.5.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)分析
    3 結(jié)果
        3.1 Erastin誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞鐵死亡
        3.2 敲低GDF15促進(jìn)erastin誘導(dǎo)的胃癌細(xì)胞鐵死亡
        3.3 敲低GDF15促進(jìn)erastin在裸鼠體內(nèi)的抗腫瘤活性
    4 討論
    5 結(jié)論
第二部分:GDF15對(duì)Erastin誘導(dǎo)的胃癌細(xì)胞中SLC7A11表達(dá)和功能的影響及其機(jī)制初步研究
    6 前言
    7 材料和方法
        7.1 細(xì)胞系
        7.2 主要實(shí)驗(yàn)材料和儀器
            7.2.1 相關(guān)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)材料
            7.2.2 主要儀器
        7.3 生物信息學(xué)網(wǎng)址和計(jì)算機(jī)分析軟件
        7.4 實(shí)驗(yàn)方法
            7.4.1 細(xì)胞培養(yǎng)
            7.4.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
            7.4.3 細(xì)胞總RNA的提取
            7.4.4 c DNA合成和實(shí)時(shí)定量PCR
            7.4.5 Western blotting
            7.4.6 免疫共沉淀
            7.4.7 谷氨酸釋放檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
            7.4.8 谷胱甘肽檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
            7.4.9 脂類過(guò)氧化物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
            7.4.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)分析
    8 結(jié)果
        8.1 敲低GDF15對(duì)胃癌細(xì)胞中鐵死亡相關(guān)基因表達(dá)的影響
        8.2 GDF15介導(dǎo)erastin對(duì)胃癌細(xì)胞MGC803中SLC7A11表達(dá)的影響
        8.3 GDF15對(duì)胃癌細(xì)胞中system Xc-功能的影響
        8.4 GDF15介導(dǎo)erastin對(duì)胃癌細(xì)胞MGC803中system Xc-功能的影響
        8.5 GDF15對(duì)胃癌細(xì)胞MGC803中SLC7A11表達(dá)調(diào)節(jié)的初步機(jī)制
    9 討論
    10 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)介



本文編號(hào)：3650087