目的和意義:急性髓細胞白血�。ˋML）是一種高度侵襲性的血液惡性腫瘤,其發(fā)生發(fā)展與某些基因改變密切相關。其中的FLT3-ITD突變是AML中的常見突變,伴有該突變的患者預后不良。近年來,人們致力于開發(fā)FLT3酪氨酸激酶抑制劑,但單藥使用效果有限,因而嘗試FLT3抑制劑聯(lián)合其他種類藥物的應用。本研究著眼于伴FLT3-ITD突變AML的藥物聯(lián)合治療,探討FLT3抑制劑ASP2215聯(lián)合HDAC抑制劑SAHA作用FLT3-ITD突變細胞株的藥物協(xié)同性及協(xié)同作用機制,為將來這兩類藥物聯(lián)合治療FLT3-ITD突變AML提供理論基礎。方法:以不同濃度的ASP2215、SAHA單藥或兩藥聯(lián)合處理伴FLT3-ITD突變的MV4-11細胞株,CCK-8法檢測細胞活性,細胞甩片后瑞氏染色觀察細胞形態(tài)變化,流式細胞術檢測細胞凋亡及細胞周期,蛋白免疫印跡檢測FLT3及下游分子STAT5的磷酸化水平,凋亡相關蛋白caspase-3/9,Mcl-1,Bcl-xL,Bcl-2和Bax以及周期相關蛋白cyclin D1、CDK 6和P27^Kip1蛋白的表達水平,使用實時定量PCR技術檢測cycl... 

【文章來源】：上海交通大學上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

FLT3受體結構示意圖

圖 1. FLT3 受體結構示意圖。Figure 1. Schematic diagram of FLT3 receptor structureFLT3 受體為單次跨膜糖蛋白，從 N 端到 C 端依次為：包含 5 個免疫球蛋白樣結構域的胞外結構域（ED）；跨膜結構域(TD)；胞內(nèi)近膜結構域（JMD）；酪氨酸激酶結構域 1（TKD 1）；激酶間插入序列（KI）；酪氨酸激酶結構域 2（TKD2）。其中串聯(lián)重復序列（ITD）插入的區(qū)域通常位于JMD 和 TKD1 內(nèi)。

上海交通大學碩士學位論文V4-11 髓系細胞株含 FLT3-ITD 純合突變MV4-11 細胞株委托中科院細胞生物研究所購自美國 ATCC。提取 MV4 THP-1 細胞株的基因組 DNA，設計針對 FLT3 基因 14，15 號外顯子的 PCR，對基因組 DNA 行 PCR 擴增，擴增產(chǎn)物經(jīng) 2.5%瓊脂糖凝膠電泳。實驗結果，相對于 THP-1 細胞的野生型 FLT3，MV4-11 細胞為 FLT3-ITD 純合突變（ 3A）。 代測序結果確定了 13 號染色體 FLT3 等位基因 14 號外顯子內(nèi)純合 入 了 段 30bp 的 串 聯(lián) 重 復 片 段 ， 插 入 的 重 復 片 段 序 列 CGTTGATTTCAGAGAATATGAATATGATC（見圖 3B）。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]組蛋白去乙�；种苿㏒BHA對急性髓細胞白血病細胞的殺傷作用[J]. 徐燕華,楊春梅,錢文斌.  浙江大學學報(醫(yī)學版). 2012(05)



本文編號：3404151