前列腺癌是臨床常見的男性惡性腫瘤之一,其發(fā)生發(fā)展與患者年齡以及雄激素水平密切相關(guān),隨著我國人民生活質(zhì)量水平不斷提高,人民平均壽命延長,我國前列腺癌的發(fā)病率呈現(xiàn)持續(xù)增長趨勢。前列腺癌患者易發(fā)生轉(zhuǎn)移與復發(fā),這也是導致患者死亡的主要原因。因此探尋前列腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)機制,對于前列腺癌的防治具有重要意義。非肌細胞肌球蛋白Ⅱ（Nonmuscle MyosinⅡ,NMⅡ）由兩條重鏈（Nonmuscle myosin heavy chain,NMHC）、兩條基本輕鏈（Essential Light Chain,ELC）和兩條調(diào)節(jié)輕鏈（Regulatory Light Chain,RLC）組成。NMHC能夠與肌動蛋白結(jié)合,通過自身磷酸化直接調(diào)控細胞運動。人類NMHCⅡ包括三種亞型,分別為NMHCⅡA、NMHCⅡB以及NMHCⅡC。NMHCⅡA由MYH9基因編碼,在機體的免疫應(yīng)答、細胞的遷移、黏附及腫瘤轉(zhuǎn)移等病理生理過程中發(fā)揮重要作用。然而在前列腺癌中,NMHCⅡA是否能夠影響癌細胞轉(zhuǎn)移目前并不清楚。長非編碼RNA（long noncoding RNA,lncRNA）是一類長度超過200單位核苷酸的非編碼R... 

【文章來源】：吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

Oncomine數(shù)據(jù)庫分析NMHCⅡA編碼基因MYH9的表達。

采用western Blot檢測良性前列腺增生細胞系BPH-1、前列腺癌細胞系PC3及前列腺癌細胞系PC3高轉(zhuǎn)移型亞細胞系PC3M中NMHCⅡA的蛋白表達水平,結(jié)果顯示：與前列腺癌細胞PC3、PC3M相比,良性前列腺增生細胞BPH-1中NMHCⅡA表達水平較低,差別具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；與前列腺癌細胞PC3M相比,前列腺癌細胞PC3中NMHCⅡA表達較低,差別具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。（圖3.2）3.2 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞株的構(gòu)建、篩選及鑒定

利用含有 GFP、針對MYH9基因（NMHCⅡA編碼基因）的慢病毒（sh MYH9）及含有 GFP的陰性對照病毒（空載）分別感染前列腺癌細胞PC3M,感染成功后細胞發(fā)綠色熒光。用嘌呤霉素篩選出穩(wěn)定感染細胞后,擴增培養(yǎng),使用熒光顯微鏡觀察可見穩(wěn)定感染的細胞發(fā)出綠色熒光,計算可得各組細胞感染效率均達到80%以上。（圖3.3）3.2.2 穩(wěn)定感染細胞株的鑒定


本文編號：3379904