目的:結(jié)腸癌作為常見的消化道惡性腫瘤,其發(fā)病率和死亡率都在逐年上升。結(jié)腸癌由于手術(shù)后易復(fù)發(fā),易產(chǎn)生放、化療耐受等特點,目前的臨床治療方法效果都不甚理想。腫瘤干細(xì)胞（cancer stem cell,CSC）是腫瘤組織中數(shù)量較少的一個亞群,具有自我更新和無限增殖能力,能夠多向分化并且長期處于“休眠”狀態(tài),不易被傳統(tǒng)的放、化療殺死,成為腫瘤轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)的關(guān)鍵因素,把腫瘤干細(xì)胞作為靶點來治療腫瘤的策略成為腫瘤治療的新突破口。樹突狀細(xì)胞（dendritic cell,DC）是目前發(fā)現(xiàn)的功能最強(qiáng)的專職抗原提呈細(xì)胞,能夠激活T細(xì)胞,誘導(dǎo)發(fā)揮免疫應(yīng)答,增強(qiáng)T淋巴細(xì)胞特異性殺傷腫瘤的能力。大量研究顯示,用DC制備抗腫瘤疫苗,能夠有效激活免疫細(xì)胞的抗腫瘤應(yīng)答。DC疫苗的效能主要受限于DC分離培養(yǎng)技術(shù)、負(fù)載抗原的免疫原性、疫苗應(yīng)用方式等。目前,應(yīng)用最廣泛的負(fù)載抗原是腫瘤細(xì)胞的全裂解物（lyasates）,但其負(fù)載效果尚有待提高。研究表明,由細(xì)胞自噬產(chǎn)生的自噬小體,因其含有缺損的核糖體產(chǎn)物（defective ribosomal products,DRiPs）,錯誤折疊的蛋白質(zhì)等,具有作為新型負(fù)載抗原的潛力,... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

無血清培養(yǎng)條件下CD44+CT-26細(xì)胞的生長（scalebar＝100m）

4.2 CD44+CT-26 細(xì)胞的鑒定4.2.1 誘導(dǎo)分化實驗收集分選得到的 CD44+CT-26 細(xì)胞無血清培養(yǎng)后形成的細(xì)胞球，離心后用含10%FBS 的 1640 進(jìn)行培養(yǎng)。觀察發(fā)現(xiàn)，成懸浮生長狀態(tài)的細(xì)胞球貼壁并且逐漸呈放射狀延展開來，伸出的細(xì)胞呈貼壁生長。第 5 天，細(xì)胞球基本平鋪于培養(yǎng)皿中，貼壁生長良好（圖 4.2）。提示 CD44+CT-26 細(xì)胞經(jīng)過誘導(dǎo)后能夠分化成為CT-26 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞。

4.2 CD44+CT-26 細(xì)胞誘導(dǎo)分化實驗（scale bar＝200 m細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞表面標(biāo)志物集 CT-26 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞和分選后無血清培養(yǎng)穩(wěn)定傳代的 式細(xì)胞儀上檢測中 CD44 在兩種細(xì)胞中陽性表達(dá)的百分比。結(jié)腸癌細(xì)胞系中，CD44+細(xì)胞比例為 4.07%（圖 4.3 左），無6 細(xì)胞中，CD44+細(xì)胞的比例為 98.0%（圖 4.3 右）。該結(jié)果了 CD44+的細(xì)胞，并且通過無血清培養(yǎng)維持了高度的腫瘤干

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Immune responses of dendritic cells combined with tumor-derived autophagosome vaccine on hepatocellular carcinoma[J]. Yongxiang Yi,Jianbo Han,Liang Zhao,Chunying Wang,Yuan Fang,Qiang Wei,Liang Hu,Junmao Liu,Yufeng Zhang,Lili Wang.  Chinese Journal of Cancer Research. 2015(06)
[2]腫瘤干細(xì)胞的分離與純化研究進(jìn)展[J]. 王榕,蔣敬庭,楊伊林,吳昌平.  中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2009(01)



本文編號：3212254