目的:研究apocynin（APO）對氧化偶氮甲烷（azoxymethane,AOM）/葡聚糖硫酸鈉（dextran sulfate sodium,DSS）誘導(dǎo)的結(jié)腸癌（colorectal cancer,CRC）小鼠溫?zé)嶂委煟╤yperthermia,HT）的影響并初步探討其作用機(jī)制。方法:1.實(shí)驗(yàn)分組及小鼠CRC實(shí)驗(yàn)動物模型的構(gòu)建:60只4-6周齡的雄性balb/c小鼠,適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后,隨機(jī)分為四組（對照組、AOM/DSS組、AOM/DSS+HT組、AOM/DSS+HT+APO組）,每組15只。對照組小鼠實(shí)驗(yàn)開始前1天給予單次腹腔注射0.9%無菌生理鹽水,不作其他處理,全程飲用新鮮水至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。AOM/DSS組實(shí)驗(yàn)開始前1天單次腹腔注射10mg/kg的AOM溶液,第8天給予2%DSS溶液飲用連續(xù)7天,更換成新鮮飲用水喂養(yǎng)14天,再重復(fù)DSS/新鮮飲用水2個循環(huán)。AOM/DSS+HT組,在第一個循環(huán)后應(yīng)用加熱裝置對小鼠腹部持續(xù)加熱1h（38℃-40℃）。AOM/DSS+HT+APO組,在第一個循環(huán)后應(yīng)用加熱裝置的同時,每天固定時間給予腹腔注射30mg/kg的APO溶液。2.實(shí)驗(yàn)過程... 

【文章來源】：河南大學(xué)河南省

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

建立AOM/DSS誘導(dǎo)的CRC模型小鼠的過程

材料和方法5建模過程如圖1所示：圖1建立AOM/DSS誘導(dǎo)的CRC模型小鼠的過程圖2小鼠加熱裝置圖采用實(shí)驗(yàn)室自行設(shè)計(jì)的加熱膜用于加熱，加熱膜的外圍直徑約20mm，加熱的有效面積直徑大約為15mm，加熱平均功率為0.4W/cm2，將溫控器調(diào)整控制溫度約38℃-40℃。加熱膜用無菌膠帶粘貼至小鼠腹部，然后用無菌膠帶沿小鼠腹部進(jìn)行包裹。2.2實(shí)驗(yàn)標(biāo)本采集及處理實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，小鼠禁食8-12小時，采用頸椎脫臼法將其處死，解剖取盲腸至肛門部腸管，測量長度，進(jìn)行拍照，迅速將腸管放入盛有PBS器皿中，沿腸管縱軸剖開，清洗腸內(nèi)容物，觀察腸黏膜損傷情況，用濾紙吸干水分，將結(jié)腸分為五段，第一段取病變明顯部位約0.5cm×1.0cm組織放入4%多聚甲醛固定，用于石蠟包埋，進(jìn)行蘇木素-伊紅染色（Hematoxylinandeosinstain，HE）。第二段約0.5cm×1.0cm組織，放入干燥EP

結(jié)果15結(jié)果1.各組小鼠的一般情況、體重變化隨著AOM/DSS造模時間延長，與對照組相比，其余組小鼠均出現(xiàn)不同程度的精神狀態(tài)差、進(jìn)食少、腹瀉、血便癥狀。AOM/DSS組小鼠第一輪循環(huán)出現(xiàn)精神倦耽腹瀉、進(jìn)食少、少量血便，第二輪和第三輪循環(huán)上述情況逐漸加重，并有肛門脫垂現(xiàn)象。AOM/DSS+HT組在第一輪循環(huán)出現(xiàn)精神差、進(jìn)食少、腹瀉，第二輪和第三輪循環(huán)上述情況加重，開始出現(xiàn)血便、肛門脫垂現(xiàn)象。AOM/DSS+HT+APO組小鼠第一輪循環(huán)精神狀態(tài)正常、進(jìn)食少、間斷腹瀉，第二輪和第三輪循環(huán)上述情況加重，并出現(xiàn)血便。由圖3可見，實(shí)驗(yàn)開始后對照組小鼠體重平穩(wěn)增長，AOM/DSS組、AOM/DSS+HT組及AOM/DSS+HT+APO組小鼠體重增長均較慢，并且在飲用2%DSS溶液后體重出現(xiàn)下降的情況，停用2%DSS溶液后體重逐漸回升。由表8可見，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，與對照組小鼠平均體重（37.64±3.03）相比，AOM/DSS組小鼠平均體重(31.1±1.95)明顯減輕，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01）。AOM/DSS+HT組小鼠平均體重（33.89±1.89）和AOM/DSS+HT+APO組小鼠平均體重（36.57±1.98）與AOM/DSS組小鼠平均體重相比，有不同程度的增加（P<0.05或P<0.01），與AOM/DSS+HT組小鼠平均體重相比，AOM/DSS+HT+APO組小鼠平均體重進(jìn)一步增加（P<0.05）。圖3各組小鼠的體重變化情況Fig.3Changesinbodyweightofmiceineachgroup


本文編號：3134580