MYC是一個轉錄因子,隸屬于bHLH-LZ家族,其常與Max相互作用形成二聚體靶向特定DNA序列（CACGTG）調控眾多基因轉錄,因其介導了超過30%的腫瘤發(fā)生而作為經典癌基因為人們所熟知。大部分腫瘤如卵巢癌、乳腺癌及結腸癌等都存在MYC的基因擴增和異常激活。人類基因組約15%的基因受MYC轉錄調控,例如E2F2、CDKN1A、CCND1等。MYC通過調控眾多基因的轉錄,在促進血管形成、促進腫瘤發(fā)生,以及誘導腫瘤細胞惡性增殖和分化及等方面占據重要地位。最近研究表明,MYC能夠調控腫瘤細胞代謝。雖然大量研究解析了 MYC在腫瘤中的生物學功能,也有眾多靶基因陸續(xù)被發(fā)現(xiàn)。但是仍然存在很多機制沒有闡明。2015年Nature文章報道MYC介導的腫瘤細胞依賴剪接體生存,MYC與剪接因子BUD31存在合成致死效應,靶向剪接體可有效殺死MYC介導的腫瘤,但是MYC依賴剪接體生存的機制在該文章中并沒有闡明。本課題論證了 MYC能夠通過轉錄調控致癌剪接因子的表達促進腫瘤細胞存活。剪接是指pre-mRNA內含子被剪掉,外顯子被拼接的過程。其發(fā)生在細胞核中,由snRNP識別pre-mRNA剪接位點,經兩次轉... 

【文章來源】：山東大學山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數】：72 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１Ａ）；通過ＧＥＰＩＡ２網站對ＭＹＣ的預后進行分析，發(fā)現(xiàn)ＭＹＣ高表??達的高級別漿液性卵巢癌患者預后較差（圖１Ｂ）

．?＿＿■＿???ｉｍ?—．??■■?ｓ?？？？■．■．＿．■■?＿＿＇．ｖ．＇．－＿ｔ．，?．，．－１．＇．．＇?１?■■■．＿■■？■＂??猶．＿?‘；，■？．：？?－＇＊：：■＊??ＭＶＣ＇?ｊ??■＊＝■４＊?ｍ??ＰＯＬＲ２Ａ?ｊ！??－：．全?＿＿？■？？，■＊？氣《４?■—?，?Ｉ?？？？?■?Ａ?ｉ?１?．＿■＿＿＿?！蠱？?ｍ?－ｊｍｍＪＫｍＪｋｍｊｋ＿＊?＿■？?ｍ?ｍ？ｍ?？＿？??？＿？???圖１：?ＭＹＣ在ＨＧＳＯＣ中拷貝數增加并與剪接因子關系密切??Ａ．?ＴＣＧＡ數據庫分析卵巢癌患者中ＭＹＣ表達量的遺傳變化。Ｂ．?ＭＹＣ轉基因小鼠進??行ＧＯ分析對各項事件發(fā)生數量排序，其中選擇性剪接事件改變占第三位。Ｃ．ＨＧＳＯＣ中??ＭＹＣ高表達與預后不良相關。Ｄ．ＣｈＩＰ－ｓｅｑ分析預測ＭＹＣ對ＰＱＢＰ１和ＳＨＢ１有潛在調控。??２．ＭＹＣ過表達和敲低細胞系的構建??為驗證ＭＹＣ對剪接因子ＰＱＢＰ１和ＳＦ３Ｂ１是否存在調控作用，我們構建了??ＭＹＣ過表達和敲低細胞系。過表達病毒載體購買自吉凱公司，敲低病毒載體為??實驗室構建。敲低細胞系的建立，從Ｓｉｇｍａ官網獲取ｓｉ－ＭＹＣ序列，ＰＣＲ擴增后??克隆到ＰＬＫＯ／Ｔｅｔ－ｏｎ載體。慢病毒的包裝使用經典慢病毒三質粒包裝體系，包括??—個目的質粒ＰＬＫＯ－ｓｈ－ＭＹＣ和兩個包裝質粒ｐｓＰＡＸ－２和ＰＭＤ２Ｇ。使用ｌｉｐｏ２０００??轉染２９３Ｔ細胞，然后４８?ｈ、７２?ｈ后收兩次病毒液，０．４５?ｐＭ濾器過濾病毒液備??用。�。�?ｍＬ病毒液感染Ａ２７８０、ＳＫＯＶ３、ＨＥＹ、ＨＯ８９１０等卵巢癌

圖４：?ＭＹＣ轉錄調控ＰＱＢＰＫ?ＳＦ３Ｂ１??


本文編號：3024355