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抑制CtBP2表達(dá)可減少食管鱗癌血管生成限制腫瘤進(jìn)展

發(fā)布時間:2021-01-03 08:00
  目的研究CtBP2在調(diào)控食管鱗狀細(xì)胞癌(Esophageal Squamous Cell Carcinoma,ESCC)血管生成中的作用,初步探討CtBP2影響食管鱗癌血管生成可能的分子機(jī)制。方法(1)在組織水平,分別采用Western Blot法和免疫組織化學(xué)染色技術(shù),對比食管鱗癌癌組織和癌旁正常組織中CtBP2的表達(dá);采用免疫熒光技術(shù),對比癌組織和癌旁正常組織中微血管數(shù)量。(2)在細(xì)胞水平,應(yīng)用細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù),構(gòu)建五種細(xì)胞系:轉(zhuǎn)染Flag-CtBP2質(zhì)粒的細(xì)胞系、轉(zhuǎn)染CtBP2 siRNA質(zhì)粒的細(xì)胞系、轉(zhuǎn)染Flag-Empty質(zhì)粒的細(xì)胞系、轉(zhuǎn)染Empty siRNA質(zhì)粒的細(xì)胞系、未轉(zhuǎn)染的ECA109細(xì)胞系,分別與血管內(nèi)皮細(xì)胞共培養(yǎng),建立五組共培養(yǎng)細(xì)胞體系。(3)對五組共培養(yǎng)細(xì)胞體系,用Western Blot法分別檢測CtBP2表達(dá)量和CD31表達(dá)量;分別行血管成管實(shí)驗(yàn),檢測CtBP2表達(dá)水平對腫瘤血管新生的影響。(4)對五組共培養(yǎng)細(xì)胞,分別應(yīng)用EdU核酸標(biāo)記技術(shù)、流式細(xì)胞儀、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn),檢測CtBP2表達(dá)水平對血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、凋亡和遷移能力的影響。(5)對五組共培養(yǎng)細(xì)胞,分別用... 

【文章來源】:南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】:70 頁

【學(xué)位級別】:博士

【圖文】:

抑制CtBP2表達(dá)可減少食管鱗癌血管生成限制腫瘤進(jìn)展


對比癌組織和癌旁正常組織的CtBP2表達(dá)水平和微血管數(shù)量

食管鱗癌,轉(zhuǎn)染方法,血管新生,細(xì)胞系


圖 2:檢測食管鱗癌細(xì)胞系中 CtBP2 與血管新生的關(guān)系,食管鱗癌細(xì)胞ECA109 的培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染方法見材料與方法部分。A:用 Western Blot 檢測 CtBP2和 CD31 含量。與對照組相比,食管鱗癌細(xì)胞 ECA109 轉(zhuǎn)染了含 Flag-CtBP2 的質(zhì)粒后,CtBP2 過表達(dá);食管鱗癌細(xì)胞 ECA109 轉(zhuǎn)染了含 CtBP2 siRNA 的質(zhì)粒

食管鱗癌,血管內(nèi)皮細(xì)胞,細(xì)胞系,凋亡


圖 3:檢測食管鱗癌細(xì)胞系中 CtBP2 表達(dá)量對血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、凋亡和遷移的影響。食管鱗癌細(xì)胞培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染方法見材料與方法部分,分組同上。A 和B:用 EdU 核酸標(biāo)記技術(shù),觀察血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖能力(×400)。與對照組相比,過表達(dá) CtBP2 組血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖數(shù)量明顯增多,抑制表達(dá) CtBP2 組血

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]中國腫瘤登記地區(qū)2007年腫瘤發(fā)病和死亡分析[J]. 陳萬青,張思維,鄭榮壽,雷正龍,李光琳,鄒小農(nóng),趙平.  中國腫瘤. 2011(03)



本文編號:2954620

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