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基于exosome裂解超濾液的DC/CTL細胞誘導及其治療胰腺癌的實驗研究

發(fā)布時間:2020-12-07 11:54
  目的:探索人胰腺癌細胞來源的exosome及exosome裂解超濾液對DC/CTL混合細胞抗腫瘤活性的影響及機制。方法:采用超速離心法提取SW1990細胞(人胰腺癌細胞系)釋放的exosome,低滲法裂解exosome,超濾法去除exosome來源的微小RNA并提純exosome裂解超濾液。將exosome及其裂解超濾液分別負載到人外周血來源的未成熟樹突狀細胞(imDC)上并與細胞毒性T淋巴細胞(CTL)共培養(yǎng),7天后Elisa法檢測各組培養(yǎng)液上清液中TNF-a和穿孔素蛋白的濃度,CCK-8法檢測DC/CTL昆合細胞對SW1990細胞的殺傷活性。結(jié)果:E-DC/CTL組(exosome致敏組)、DC/CTL組(未致敏組)、EL-DC/CTL組(exosome裂解超濾液致敏組)平均TNF-a濃度分別為129.54、189.72、207.13pg/ml;穿孔素蛋白平均濃度分別為2.68、3.71、3.92ng/ml, E-DC/CTL組低于DC/CTL組(P<0.05),EL-DC/CTL組與DC/CTL組無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。三組對SW1990的體外實驗殺傷率分別為3... 

【文章來源】:浙江大學浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:40 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

基于exosome裂解超濾液的DC/CTL細胞誘導及其治療胰腺癌的實驗研究


exosome電鏡照片

未成熟,毛刺,細胞表面


呈球形,少量懸浮。5d后細胞表面的毛刺進一步增多,7d后細胞表面粗鏈,有不規(guī)則毛刺狀突起,可見毛刺樣樹突,為典型的DC形態(tài)(圖3.3 )。DC用exosome以及exosome裂解超濾液刺激后在形態(tài)上無顯著差異(圖3.4、圖3.5、圖3.6 )。.?‘… 著無IM▲義、- :? ;■、』▲圖3.3:未成熟DC 圖3.4: exosome刺激的DC9

毛刺,超濾液,形態(tài),未成熟


有不規(guī)則毛刺狀突起,可見毛刺樣樹突,為典型的DC形態(tài)(圖3.3 )。DC用exosome以及exosome裂解超濾液刺激后在形態(tài)上無顯著差異(圖3.4、圖3.5、圖3.6 )。.?‘… 著無IM▲義、- :? ;■、』▲圖3.3:未成熟DC 圖3.4: exosome刺激的DC9

【參考文獻】:
期刊論文
[1]Antitumor activities of human autologous cytokineinduced killer(CIK)cells against hepatocellular carcinoma cells in vitro and in vivo[J]. Fu-Sheng Wang Ming-Xu Liu Bing Zhang Ming Shi Zhou-Yun Lei Wen-Bing Sun Qing-You Du Ju-Mei Chen,Division of Biological Engineering,Beijing Institute of Infectious Diseases,Beijing 100039,China Wen-Bing Sun,Department of Surgery,Beijing Hospital of Infectious Diseases,Beijing 100039,China.  World Journal of Gastroenterology. 2002(03)



本文編號:2903199

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