【摘要】：目的:通過檢測腦轉移瘤中腫瘤干細胞標志物Musashi1(Msi1)及Numb的表達情況,探討二者在腦轉移瘤發(fā)生發(fā)展中的作用,進一步明確腫瘤干細胞在腦轉移瘤形成中的作用,以期為腦轉移瘤發(fā)病的分子生物學機制提供新的思路與方向。方法:1選取51例經手術切除的腦轉移瘤標本,29例原發(fā)腫瘤標本,15例正常人腦組織標本。一部分置于10%福爾馬林溶液中固定,常規(guī)制作蠟塊保存;另一部分在新鮮狀態(tài)下放入-80℃低溫冰箱中保存。2設定腦轉移瘤組與原發(fā)腫瘤組為實驗組,正常腦組織組為對照組。采用免疫組織化學SP法及逆轉錄-聚合酶鏈反應(Reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)的方法分別對Msi1與Numb蛋白及mRNA在各組織中進行檢測。每張切片隨機取10個高倍視野,在高倍鏡(×400)下依據(jù)染色強度分數(shù)進行半定量分析;對電泳圖像中的目的基因mRNA表達水平進行半定量分析,測定目的基因灰度值,以內參GAPDH的OD值標化目的基因的OD值,作為相對表達量,進行統(tǒng)計學分析。3收集所有患者的詳細資料,應用統(tǒng)計軟件SPSS21.0對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析,計量資料用t檢驗,計數(shù)資料用χ2檢驗,等級資料用Spearman相關分析進行檢驗,連續(xù)變量資料用Pearson相關分析進行檢驗,以上均為雙側檢驗,以P0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。結果:1 Msi1蛋白及mRNA在不同組織中表達情況免疫組化結果顯示:Msi1蛋白在腦轉移瘤、原發(fā)腫瘤及正常腦組織中的陽性表達率分別為60.8%(31/51)、65.5%(19/29)及13.3%(2/15)。其中Msi1蛋白在腦轉移瘤與原發(fā)腫瘤間的表達差異不明顯,不具有統(tǒng)計學意義(P0.05);Msi1蛋白在腦轉移瘤中的表達顯著高于在正常腦組織中的表達,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);Msi1蛋白在原發(fā)腫瘤中的表達顯著高于在正常腦組織中的表達,差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05)。Rt-pcr結果顯示:msi1mrna在腦轉移瘤、原發(fā)腫瘤及正常腦組織中的相對表達量分別為0.78±0.50、0.60±0.36及0.38±0.29。其中msi1mrna在腦轉移瘤與原發(fā)腫瘤間的表達差異不明顯,不具有統(tǒng)計學意義(p0.05);msi1mrna在腦轉移瘤中的表達顯著高于在正常腦組織中的表達,差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05);msi1mrna在原發(fā)腫瘤中的表達顯著高于在正常腦組織中的表達,差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05)。2 Numb蛋白及mrna在不同組織中表達情況免疫組化結果顯示:numb蛋白在腦轉移瘤、原發(fā)腫瘤及正常腦組織中的陽性表達率分別為33.3%(17/51)、31.0%(9/29)及73.3%(11/15)。其中numb蛋白在腦轉移瘤與原發(fā)腫瘤間的表達差異不明顯,不具有統(tǒng)計學意義(p0.05);numb蛋白在腦轉移瘤中的表達顯著低于在正常腦組織中的表達,差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05);numb蛋白在原發(fā)腫瘤中的表達顯著低于在正常腦組織中的表達,差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05)。Rt-pcr結果顯示:numbmrna在腦轉移瘤、原發(fā)腫瘤及正常腦組織中的相對表達量分別為0.34±0.21、0.47±0.31及2.42±1.82。其中numbmrna在腦轉移瘤與原發(fā)腫瘤間的表達差異不明顯,不具有統(tǒng)計學意義(p0.05);numbmrna在腦轉移瘤中的表達顯著低于在正常腦組織中的表達,差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05);numbmrna在原發(fā)腫瘤中的表達顯著低于在正常腦組織中的表達,差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05)。3 Msi1與numb在腦轉移瘤中表達相關性分析在腦轉移瘤組織中,蛋白表達經spearman相關性分析,msi1蛋白與numb蛋白的表達呈負線性相關(r=-0.258,p0.05);基因表達經pearson相關性分析,msi1基因與numb基因mrna相對表達呈負線性相關(r=-0.345,p0.05)。4 Msi1與numb在腦轉移瘤中的表達與患者臨床病理資料間的分析Msi1與numb在腦轉移瘤中的表達情況與患者的性別、年齡及組織來源均無關(均p0.05)。結論:1Msi1蛋白及mrna在腦轉移瘤及原發(fā)腫瘤中高表達;numb蛋白及mrna在腦轉移瘤及原發(fā)腫瘤中低表達,說明二者表達異常可能在腦轉移瘤形成過程中發(fā)揮重要作用。2Msi1與Numb在腦轉移瘤及原發(fā)腫瘤中呈負線性相關,推測Msi1與Numb在腦轉移瘤發(fā)生中可能存在調控機制。3腫瘤干細胞標志物Msi1在腦轉移瘤及原發(fā)腫瘤中高表達,推測腫瘤干細胞可能在腦轉移瘤中存在。4Msi1與Numb在腦轉移瘤中的表達與患者的性別、年齡及組織來源無關。
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R739.41

【參考文獻】

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1 汪洋;張繼;牟永告;;乳腺癌腦轉移患者的臨床特點與預后[J];西部醫(yī)學;2016年08期

2 余仔軍;侯和磊;張曉春;;靶向VEGF/VEGFR通路治療胃癌的研究進展[J];臨床腫瘤學雜志;2016年06期

3 盛佳鈺;陳紅風;;MK2206對三陰性乳腺癌順鉑耐藥細胞增殖及耐藥性的影響[J];腫瘤學雜志;2016年04期

4 郝立群;趙輝;楊永凈;王成;;Her-2陽性轉移性乳腺癌的生物靶向治療[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學;2016年08期

本文編號：2736253