【摘要】：目的研究循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTCs)及其上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)與結(jié)直腸癌臨床資料的相關(guān)性。方法收集2016.03.01-2017.3.31在廣東省人民醫(yī)院普外一區(qū)(胃腸專(zhuān)業(yè)組)行手術(shù)治療并接受CTCs檢測(cè)的結(jié)直腸癌患者的臨床資料,采用CanpatrolTM二代CTC檢測(cè)技術(shù)分別于術(shù)前2h、術(shù)后2周檢測(cè)患者的CTCs、并用EMT標(biāo)記物進(jìn)行CTC分型,分析CTC及其不同表型與患者臨床資料的相關(guān)性。結(jié)果共收集到68例合乎要求的結(jié)直腸癌患者,其中男性39例,女性29例;≥60歲33例,60歲35例;右半結(jié)腸癌14例,左半結(jié)腸癌23例,直腸癌31例;腫瘤直徑5cm 44例,≥5cm 24例;按TNM臨床分期:Ⅰ期7例、Ⅱ期14例、Ⅲ期35例、Ⅳ期12例;Ⅲ期患者中轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)≤枚17例,3枚18例。CTCs可以分成上皮型、間質(zhì)型及上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的過(guò)渡狀態(tài)三種類(lèi)型;85.29%(58/68)的患者術(shù)前檢測(cè)出CTCs,其中EMT型及間質(zhì)型CTCs比例明顯高于上皮型,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);患者年齡≥60歲組與60歲組之間、男女之間CTCs檢出率及各亞型的比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);右半結(jié)腸癌患者總CTCs、EMT型及間質(zhì)型CTCs的平均檢測(cè)值均高于左半及直腸癌患者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);但右半、左半及直腸癌三組患者之間上皮型CTCs的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);腫瘤最大直徑5cm及≥5cm二組患者之間CTC檢出率的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),腫瘤最大直徑≥5cm患者總CTCs、EMT型及間質(zhì)型CTCs的平均檢測(cè)值均略高于5cm患者,≥5cm患者的上皮型CTCs略低于5cm患者,但以上二組之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);Ⅳ期患者CTCs檢測(cè)率、總CTCs、EMT型及間質(zhì)型CTCs平均值均高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),Ⅳ期患者的上皮型CTCs亦高于另外三組患者但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);對(duì)未出現(xiàn)淋巴結(jié)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的Ⅰ、Ⅱ期患者CTCs進(jìn)行比較,分析T分期與CTCs的關(guān)系,Ⅰ期的CTC檢出率及CTC平均值均略低于Ⅱ期患者,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);對(duì)Ⅱ期高�；颊哌M(jìn)行比較,高�；颊呓M總CTCs平均檢測(cè)值高于低危組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),高危組的EMT型CTCs及間質(zhì)型CTCs的平均值均高于低危組、高危組的上皮型CTCs平均值低于低危組,但以上數(shù)值差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);Ⅲ期患者中,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)3個(gè)患者組總平均CTCs值、上皮型、EMT型及間質(zhì)型CTCs均高于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)≤3個(gè)患者組,但只有間質(zhì)型CTCs數(shù)值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);術(shù)前術(shù)后比較,除ⅣV期患者術(shù)后CTC檢測(cè)率仍為100%外,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期結(jié)直腸癌患者行根治術(shù)后CTC檢測(cè)率及各型數(shù)值均明顯下降;相關(guān)分析顯示,CTC總數(shù)與間質(zhì)型CTC均與TNM臨床分期相關(guān)(P值均0.05),腫瘤分期越晚,CTC總數(shù)及間質(zhì)型CTC數(shù)目越多,而上皮型CTC與臨床分期未觀察到明顯相關(guān)性;CTCs總數(shù)、上皮型及間質(zhì)型均與CEA值呈正相關(guān)(P值均0.05),均與Ca19-9及腫瘤最大徑無(wú)明顯相關(guān),只有EMT型及間質(zhì)型CTCs與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)目呈正相關(guān)(P0.05)。結(jié)論循環(huán)腫瘤細(xì)胞(尤其是間質(zhì)型CTC)與結(jié)直腸癌患者的臨床分期、腫瘤部位、高危因素、以及轉(zhuǎn)移密切相關(guān);腫瘤細(xì)胞的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化在結(jié)直腸癌的轉(zhuǎn)移中具有重要作用。
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：R735.34
【圖文】：

３）棄去凍存液，加入含有１０％胎牛血清的ＲＰＭ１－１６４０培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，逡逑并將其移入培養(yǎng)瓶中，在５％Ｃ０２、３７°Ｃ恒溫條件下培養(yǎng)，隔天換液。逡逑４）當(dāng)細(xì)胞增殖并鋪滿培養(yǎng)瓶底約８０％－９０％時(shí)，棄去培養(yǎng)液，ＤＰＢＳ液清洗逡逑后加入０．２５％胰酶ｌｍｌ靜置ｌｍｉｎ左右，倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)，逡逑當(dāng)細(xì)胞變圓縮小后加入含有１０％胎牛血清的ＲＰＭＩ－１６４０培養(yǎng)液重懸細(xì)逡逑胞，將細(xì)胞按１：２或１：３進(jìn)行分瓶培養(yǎng)（具體由細(xì)胞數(shù)量決定）。逡逑２．２對(duì)ＣＴＣ進(jìn)行分離和分型逡逑采用Ｃａｎｐａｔｒｏｌ？二代ＣＴＣ檢測(cè)技術(shù)，首先裂解外周血中的紅細(xì)胞，采用國(guó)逡逑際公認(rèn)卟ｍ孔徑的納米膜截留ＣＴＣｓ，實(shí)現(xiàn)對(duì)所有類(lèi)型ＣＴＣｓ的分離，最大程度逡逑保留腫瘤細(xì)胞原始信息，然后結(jié)合多重ＲＮＡ原位雜交（ＲＮＡ－１ＳＨ）技術(shù)，排除逡逑表達(dá)ＣＤ邋４５＋白細(xì)胞，對(duì)富集ＣＴＣｓ進(jìn)行特異性基因核酸定位，對(duì)ＣＴＣｓ進(jìn)行精逡逑準(zhǔn)分型，包括上皮型ＣＴＣｓ邋（表達(dá)ＥｐＣＡＭ，ＣＫ８／１８／１９）、間質(zhì)型ＣＴＣｓ邋（表達(dá)逡逑Ｖｉｍｅｎｔｉｎ、ｔｗｉｓｔ）、ＥＭＴＣＴＣｓ以及腫瘤細(xì)胞團(tuán)塊ＣＴＭ邋（如圖２）。逡逑

捐獻(xiàn)的血液中，依次進(jìn)行紅細(xì)胞裂解、過(guò)濾、ＲＮＡ－ＩＳＨ后，用熒光顯微鏡計(jì)數(shù)逡逑細(xì)胞，并重復(fù)５次。結(jié)果表明，富集過(guò)程為線性（Ｒ２邋＝邋０．９９９），平均檢測(cè)率達(dá)逡逑８０％以上（８０％？８９％邋）（如圖５，表３邋）。逡逑２１逡逑

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 ;Effect and mechanism of the Twist gene on invasion and metastasis of gastric carcinoma cells[J];World Journal of Gastroenterology;2008年16期

2 梁春林,張國(guó)利,陳志奇,張奇兵,梁龍彥,白山,陳克林,黃海濤;乳腺癌、胃癌及大腸癌患者外周血CK20的檢測(cè)與其臨床病理分期相關(guān)性研究[J];中國(guó)臨床醫(yī)學(xué);2004年04期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 劉巧珍;循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTC)及循環(huán)腫瘤干細(xì)胞(CTSC)的檢測(cè)與結(jié)直腸癌臨床資料的相關(guān)性分析[D];福建醫(yī)科大學(xué);2014年

本文編號(hào)：2714892