【摘要】：背景族腺癌發(fā)病機制復雜,難以早期診斷,臨床上確診膜腺癌患者的手術可切除率低,術后生存期相對其他腫瘤較短。然而,關于膜腺癌發(fā)病機制的研巧表明,膜腺癌的發(fā)生經(jīng)歷了相當長的過程,從獲得關鍵的致病基因突變、逐漸發(fā)展為膜腺癌前病變、最終發(fā)展為膜腺癌,需要經(jīng)歷大約十年的時間。膜腺癌前病變?nèi)缒茉缙谠\斷、及時治療,可提高該疾病的治療效果;然而,略床上缺乏早期篩查膜腺癌前病變的標志物。MicroRNA是一種22個堿基長度的核糖核酸,能在血清中穩(wěn)定存在,是一種潛在的血清診斷標志物。Kras~(G12D)突變轉基因小鼠通過膚腺細胞特異性啟動子,僅在膜腺細胞內(nèi)產(chǎn)生具有致癌活性的Kras6i2D突變蛋白;該小鼠可自發(fā)經(jīng)妨巧常膜腺-膜腺癌前病變-膜腺癌"過程。通過構建繁殖Kras~(G12D)突變小鼠,并在膜腺癌前病變階段留取小鼠外周血清,通過microRNA芯片和實時定量PCR的方法,定量測定Kras~(G12D)小鼠外周血清中特異性高表達的microRNA,為臨床篩選族腺癌前病變的候選分子。目的1.飼養(yǎng)KraseisD轉基因小鼠,無藥物干預,培養(yǎng)族腺癌前病變自然病程組小鼠;2.通過雨蛙化,誘導Kras~(G12D);突變轉基因小鼠產(chǎn)生族腺炎,培養(yǎng)膜腺炎-族腺癌前病變組小鼠;3.通過microRNA忍片,篩選出膜腺炎-膜腺癌前病變中血清離表達microRNA;4.通過生物信息方法,篩選出microRNA分子作為驗證對象;5.通過實時定量PCR,檢測候選的microRNA在膜腺癌前病變血清的表達來量。方法1.通過剪取小鼠鼠患消化提取DNA;再通過特異性引物,擴增Kras~(G12D)突變基因和Cre重沮酶基因;進而確定小鼠基因型;2.通過腹腔注射雨蛙r，

本文編號：2582551