【摘要】：目的:探討靶向CDC42基因mi R-185對胃癌細胞MGC803增殖凋亡的影響及其可能作用機制。方法:根據(jù)前期基因芯片結(jié)果及生物信息學(xué)軟件對相關(guān)mi RNA的分析,篩選出在胃癌細胞與正常胃粘膜上皮細胞差異表達的mi RNA,及其可能的靶基因。實時熒光定量PCR驗證基因芯片結(jié)果。將mi R-185 mimic和Sh NC質(zhì)粒載體分別瞬時轉(zhuǎn)染至MGC-803細胞,倒置熒光顯微鏡及實時定量PCR檢測轉(zhuǎn)染效率。CCK-8法檢測細胞活力繪制細胞生長曲線,細胞集落形成檢測細胞增殖力,流式細胞學(xué)檢測細胞周期及細胞凋亡。QRT-PCR、Western blot檢測CDC42的m RNA及蛋白表達水平。結(jié)果:利用前期基因芯片結(jié)果及生物信息學(xué)篩選出mi R-185作為研究對象,且CDC42可能為其靶基因,實時定量PCR驗證表明,mi R-185在胃癌細胞系MGC803、SGC7901較正常胃粘膜上皮細胞GES-1表達下調(diào)。倒置熒光顯微鏡和q RT-PCR檢測結(jié)果顯示,瞬時轉(zhuǎn)染mi R-185 mimic的MGC803細胞中,mi R-185表達水平顯著升高。CCK-8檢測結(jié)果顯示,mi R-185-mimic轉(zhuǎn)染組細胞增殖明顯受到抑制;細胞集落形成結(jié)果顯示:瞬間轉(zhuǎn)染mi R-185 mimic能抑制MGC803細胞集落形成。流式細胞學(xué)檢測細胞周期及細胞凋亡結(jié)果顯示:轉(zhuǎn)染mi R-185 mimic的MGC803細胞能促使G1期停滯及促進細胞凋亡,QRT-PCR、Western blot檢測結(jié)果顯示,瞬間轉(zhuǎn)染mi R-185mimic組較瞬間轉(zhuǎn)染Sh NC組、轉(zhuǎn)染試劑對照組及空白對照組CDC42的m RNA及蛋白表達水平均降低。結(jié)論:1、Mi R-185在胃癌細胞中表達下調(diào)。2、Mi R-185能夠抑制MGC-803細胞增殖,促進細胞凋亡。3、Mi R-185可能通過靶向調(diào)控CDC42基因抑制胃癌細胞系MGC803增殖,促進其凋亡。
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.2

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本文編號：2546719