本文關鍵詞：miR-495基因啟動子甲基化對胃癌細胞的PRL-3基因表達影響研究

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【摘要】：目的:探討在胃癌腹膜侵襲轉移中靶向調控PRL-3的內源性micro RNA分子mi R-495基因上游Cp G島甲基化對胃癌細胞的PRL-3基因表達影響。方法:培養(yǎng)2株正常胃黏膜上皮細胞系(GES-1和HFE-145)和4株轉移潛能不同的胃癌細胞系(MKN28,SGC7901,MKN45,BGC823),用Western Blot方法檢測細胞中PRL-3蛋白水平,用q RT-PCR技術檢測細胞中mi R-495表達情況,通過甲基化特異性PCR(MSP)及亞硫酸氫鈉測序法(bisulfite genomic sequencing,BSP)檢測mi R-495基因啟動子甲基化水平,Transwell小室實驗檢測4種腫瘤細胞侵襲及轉移能力。利用不同濃度(0u M、1u M、5u M、10u M)的DNA甲基轉移酶抑制劑5-氮雜胞苷-2’-脫氧胞苷(5-aza-2’-dc)處理后,37℃、5%CO2的孵箱繼續(xù)孵育48小時,同樣利用以上方法測定PRL-3蛋白水平、mi R-495表達情況、mi R-495基因啟動子甲基化水平以及腫瘤細胞侵襲及轉移能力的變化。結果:胃癌細胞在DNA甲基轉移酶抑制劑5-氮雜胞苷-2’-脫氧胞苷去甲基化處理后,mi R-495表達均明顯增加,且明顯抑制了PRL-3蛋白及m RNA的表達,Transwell侵襲遷移實驗表明,胃癌細胞在去甲基化處理后,侵襲和遷移能力均明顯下降。結論:在胃癌腹膜侵襲轉移中靶向調控PRL-3的內源性micro RNA分子mi R-495基因上游Cp G島甲基化使mi R-495表達下調,進而導致胃癌腹膜轉移中PRL-3
【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R735.2

【參考文獻】

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本文編號：1299901