本文關(guān)鍵詞：miR-106a在肝細(xì)胞癌中高表達(dá)并促進(jìn)肝癌細(xì)胞進(jìn)展的機(jī)制研究

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【摘要】：目的::異常表達(dá)的mi RNA現(xiàn)廣泛認(rèn)為在多種惡性腫瘤中發(fā)揮著重要作用,包括肝細(xì)胞癌(HCC)。研究表明,異常表達(dá)的mi R-106a與多種惡性腫瘤有著密切的相關(guān)性。然而,mi R-106a在HCC中的表達(dá)尚未完全闡明。我們的研究試圖將mi R-106a作為HCC的一個(gè)潛在診斷和預(yù)后的生物標(biāo)志物,探索mi R-106a的轉(zhuǎn)錄激活的機(jī)制和可能的靶基因,以及在體外HCC細(xì)胞株中的功能。方法:首選,我們運(yùn)用q RT-PCR技術(shù)檢測35對HCC組織標(biāo)本和HCC細(xì)胞株中mi R-106a表達(dá)水平高低,接著采用BSP甲基化測序技術(shù)檢測HCC細(xì)胞株中mi R-106a啟動(dòng)子區(qū)域Cp G島甲基化狀態(tài),來推測過表達(dá)的mi R-106a是否與mi R-106a啟動(dòng)子區(qū)域低甲基化狀態(tài)有關(guān)。我們進(jìn)一步運(yùn)用BSP技術(shù)比較了經(jīng)5-Aza處理前后HCC細(xì)胞株中mi R-106a啟動(dòng)子區(qū)域甲基化狀態(tài)的變化。與此同時(shí),我們運(yùn)用雙熒光素酶報(bào)告基因檢測實(shí)驗(yàn)預(yù)測mi R-106a潛在的功能靶基因。最后,體外實(shí)驗(yàn)中探索了mi R-106a對腫瘤細(xì)胞的侵襲、凋亡、增殖及細(xì)胞周期的影響。結(jié)果::q RT-PCR結(jié)果顯示mi R-106a在HCC癌組織中的表達(dá)水平明顯高于癌旁組織。q RT-PCR,BSP檢測分析HCC細(xì)胞株中mi R-106a的表達(dá)與啟動(dòng)子區(qū)域甲基化狀態(tài)的相關(guān)性,得出結(jié)論為:mi R-106a啟動(dòng)子區(qū)域甲基化狀態(tài)與mi R-106a表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)性。在線生物軟件預(yù)測mi R-106a靶基因后,再通過雙熒光素酶報(bào)告基因檢測證實(shí)TIMP2,TP53INP1,CDKN1A可能為mi R-106a的直接靶基因。體外實(shí)驗(yàn)探索mi R-106a功能,得出結(jié)論:高表達(dá)mi R-106a的HCC細(xì)胞株相對于低表達(dá)mi R-106a的細(xì)胞株具有更強(qiáng)的侵襲、抗凋亡、增殖能力,同時(shí)具有更短的細(xì)胞周期。結(jié)論::本研究中,我們率先證實(shí)了mi R-106a在HCC癌組織中高表達(dá),且mi R-106a啟動(dòng)子區(qū)域甲基化狀態(tài)與mi R-106a表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)性。TIMP2,TP53INP1和CDKN1A可能為mi R-106a的直接靶基因。同時(shí),過表達(dá)mi R-106a的HCC細(xì)胞株表現(xiàn)為更強(qiáng)的侵襲、抗凋亡、增殖能力及更短的細(xì)胞周期。簡而言之,未來mi R-106a可作為HCC有效的候選生物標(biāo)志物及治療靶向。
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.7

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 Sumadi Lukman Anwar;Ulrich Lehmann;;DNA methylation,microRNAs,and their crosstalk as potential biomarkers in hepatocellular carcinoma[J];World Journal of Gastroenterology;2014年24期

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本文編號(hào)：1204282