本文關(guān)鍵詞：EN2在結(jié)腸癌中的表達(dá)及其與增殖凋亡的關(guān)系

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【摘要】：目的:EN2是一種同源異型盒基因,在多種惡性腫瘤中呈高表達(dá),但其在結(jié)腸癌發(fā)生發(fā)展中的作用尚不清楚。本研究旨在探討EN2蛋白在結(jié)腸癌組織中的表達(dá),并探討其與臨床病理因素的關(guān)系,并進(jìn)一步探討EN2對結(jié)腸癌細(xì)胞增殖凋亡的影響。方法:收集2012年12月至2013年9月在南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院外科手術(shù)切除的新鮮94例結(jié)腸癌及相應(yīng)癌旁組織,分別用免疫組織化學(xué)和western blot檢測結(jié)腸癌中EN2的表達(dá)。以化學(xué)合成法合成的兩對特異性EN2-si RNA,并成功轉(zhuǎn)染至結(jié)腸癌細(xì)胞內(nèi)。用Western blot、RT-PCR技術(shù)分別檢測轉(zhuǎn)染si RNA后的EN2蛋白的表達(dá)情況,確定抑制效果更佳的si RNA。以MTT法檢測結(jié)腸癌細(xì)胞的增殖,并應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果:1)免疫組織化學(xué)檢測發(fā)現(xiàn)EN2蛋白主要表達(dá)于細(xì)胞漿,結(jié)腸癌組織中EN2蛋白的表達(dá)強(qiáng)度65.9%(62/94)明顯高于癌旁組織(P0.05)。Western blot檢測結(jié)果與免疫組織化學(xué)檢測結(jié)果相似。2)通過與臨床病理資料分析,EN2高表達(dá)與腫瘤大小、浸潤程度、淋巴結(jié)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移密切相關(guān),有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者EN2表達(dá)陽性率明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(P0.05)。3)結(jié)腸癌細(xì)胞中EN2呈高表達(dá)。si RNA 1干擾效果更明顯,通過轉(zhuǎn)染si RNA1和對照組,發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染48h后,干擾組增殖能力受到明顯抑制(P0.05);細(xì)胞凋亡率明顯增加(P0.05)。結(jié)論:1)EN2蛋白主要在結(jié)腸癌細(xì)胞漿表達(dá),結(jié)腸癌組織和細(xì)胞中EN2高表達(dá)。2)EN2高表達(dá)與腫瘤大小、浸潤程度、淋巴結(jié)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移密切相關(guān),有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者EN2表達(dá)陽性率更高。3)下調(diào)EN2的表達(dá)明顯抑制結(jié)腸癌細(xì)胞增殖,并促進(jìn)細(xì)胞的凋亡。
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.35

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本文編號：1194832