本文關(guān)鍵詞：雙硫侖增強(qiáng)垂體瘤細(xì)胞替莫唑胺化療敏感性的研究

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【摘要】：背景與目的:侵襲性垂體腺瘤的治療是目前神經(jīng)外科領(lǐng)域的一個(gè)難題,其高復(fù)發(fā)率和低治愈率一直是影響臨床療效的重要原因。替莫唑胺作為目前治療后放療和常規(guī)藥物治療(溴隱亭等)不敏感的垂體瘤的最后一線藥物,提高腫瘤對替莫唑胺的敏感性具有重要的意義。最近研究表明雙硫侖(DSF)能提高膠質(zhì)瘤對替莫唑胺(TMZ)的敏感性,雙硫侖(DSF)能否也在垂體瘤中提高腫瘤組織對替莫唑胺的敏感性目前尚未見報(bào)道。本課題針對雙硫侖(DSF)聯(lián)合替莫唑胺(TMZ)能否增強(qiáng)垂體瘤細(xì)胞對替莫唑胺化療敏感性進(jìn)行相關(guān)研究。方法:收集對術(shù)后放療和常規(guī)藥物治療(溴隱亭等)不敏感的垂體瘤組織6例,其中對替莫唑胺敏感的3例,對替莫唑胺不敏感的3例。應(yīng)用Western blot的方法檢測MGMT在垂體腺瘤組織內(nèi)的蛋白表達(dá)水平的變化。體外實(shí)驗(yàn)分別應(yīng)用TMZ,DSF和TMZ聯(lián)合DSF刺激垂體瘤細(xì)胞MMQ,CCK8法檢測細(xì)胞增殖。Western blot的方法檢測在垂體腺瘤細(xì)胞內(nèi)MGMT蛋白表達(dá)水平的變化。將MMQ垂體細(xì)胞皮下注射裸鼠,形成垂體瘤細(xì)胞裸鼠皮下移植瘤,應(yīng)用TMZ,DSF和TMZ聯(lián)合DSF刺激裸鼠,Brud和TUNEL染色法檢測細(xì)胞增殖和細(xì)胞凋亡。結(jié)果:Western blot結(jié)果顯示在術(shù)后放療和常規(guī)藥物治療(溴隱亭等)不敏感的垂體瘤組織中,對替莫唑胺敏感的腫瘤組織MGMT蛋白水平低,對替莫唑胺不敏感的腫瘤組織MGMT蛋白水平高。相對于單獨(dú)應(yīng)用TMZ或DSF,TMZ聯(lián)合DSF對垂體瘤MMQ細(xì)胞的細(xì)胞增殖均有抑制作用;Western blot結(jié)果表明TMZ聯(lián)合DSF使用明顯抑制MGMT蛋白的表達(dá);相對于單純TMZ,DSF組,TMZ聯(lián)合DSF能更加明顯的抑制移植瘤的生長;Brud和TUNEL染色法顯示TMZ聯(lián)合DSF能促進(jìn)細(xì)胞凋亡,抑制細(xì)胞增殖。結(jié)論:雙硫侖DSF聯(lián)合替莫唑胺TMZ使用可能抑制垂體瘤細(xì)胞增殖,并能夠抑制MGMT蛋白的表達(dá);雙硫侖DSF聯(lián)合替莫唑胺TMZ使用能夠通過促進(jìn)細(xì)胞凋亡,抑制細(xì)胞增殖途徑抑制體內(nèi)移植瘤的生長。
【關(guān)鍵詞】：侵襲性垂體瘤 雙硫侖 替莫唑胺 MGMT
【學(xué)位授予單位】：河南科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R736.4
【目錄】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-6
• 符號表6-10
• 第1章 緒論10-22
• 1.1 研究背景10-20
• 1.1.1 替莫唑胺的臨床應(yīng)用12-20
• 1.2 研究目的20-21
• 1.3 研究意義21-22
• 第2章 材料與方法22-36
• 2.1 實(shí)驗(yàn)分組22-23
• 2.2 主要試劑材料23
• 2.3 主要試驗(yàn)設(shè)備23-24
• 2.4 主要試劑配制方法24-27
• 2.5 免疫組化方法27-28
• 2.5.1 實(shí)驗(yàn)步驟27-28
• 2.5.2 免疫組化結(jié)果判讀方法28
• 2.6 Western blot分析28-31
• 2.6.1 樣品的制備28-29
• 2.6.2 蛋白定量29
• 2.6.3 Western blot制膠29
• 2.6.4 蛋白上樣29-30
• 2.6.5 蛋白電泳30
• 2.6.6 轉(zhuǎn)膜30
• 2.6.7 封閉非特異性抗原30
• 2.6.8 加一抗30
• 2.6.9 加二抗30-31
• 2.6.10增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光法（ECL)顯色31
• 2.7 TUNEL染色檢測細(xì)胞凋亡31-33
• 2.7.1 試劑配制31
• 2.7.2 實(shí)驗(yàn)步驟31-33
• 2.8 細(xì)胞培養(yǎng)33
• 2.9 CCK8方法33-34
• 2.9.1 細(xì)胞增值檢測34
• 2.9.2 細(xì)胞毒性檢測34
• 2.10 裸鼠皮下MMQ垂體瘤細(xì)胞移植瘤模型的建立34-35
• 2.10.1 裸鼠培養(yǎng)34-35
• 2.10.2 細(xì)胞準(zhǔn)備35
• 2.10.3 裸鼠移植瘤注射35
• 2.10.4 腫瘤大小測量35
• 2.10.5 移植瘤處理35
• 2.11 統(tǒng)計(jì)分析35-36
• 第3章 結(jié)果36-40
• 3.1 Western blot分析MGMT在替莫唑胺敏感垂體腺瘤組織和替莫唑胺耐藥垂體瘤組織中的表達(dá)36
• 3.2 CCK-8 檢測和Western blot檢測TMZ，DSF及TMZ與DSF聯(lián)合使用對MMQ垂體腺瘤細(xì)胞的增殖抑制作用和MGMT水平的變化36-37
• 3.3 TUNEL及BRDU檢測顯示TMZ，，DSF及TMZ與DSF聯(lián)合使用對MMQ垂體腺瘤細(xì)胞的促凋亡及抑制增殖作用37-40
• 第4章 討論40-46
• 第5章 結(jié)論46-47
• 參考文獻(xiàn)47-55
• 縮略語詞匯表55-56
• 致謝56-57
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果57

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 曾明月;郭鵬翔;王季石;;苯扎貝特聯(lián)合醋酸甲羥孕酮治療急性髓系白血病療效觀察分析[J];重慶醫(yī)學(xué);2014年06期

2 李冬果;韓松;劉翠英;李俊發(fā);;低氧預(yù)適應(yīng)和大腦中動脈阻塞小鼠腦內(nèi)差異microRNAs鑒定[J];北京生物醫(yī)學(xué)工程;2013年05期

3 趙楊;鄧侃;姚勇;連偉;王任直;幸兵;;垂體腺瘤卒中后自愈1例報(bào)告[J];中華神經(jīng)外科疾病研究雜志;2014年02期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 汪正廣;黃芪提取物聯(lián)合5-Fu/CDDP治療胃癌及IL-6/STAT3信號通路在其機(jī)制中的作用研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2013年

2 趙冬冬;垂體卒中：臨床表現(xiàn)和手術(shù)預(yù)后[D];浙江大學(xué);2013年

3 王鳳霞;中華真地鱉（Eupolyphaga sinensis）抗腫瘤蛋白分離純化及其體外抗轉(zhuǎn)移活性研究[D];山東大學(xué);2013年

4 祁冰;HIF-1α、MMP-9在重癥急性胰腺炎肺損傷發(fā)病機(jī)制中的作用及大黃素干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2014年

5 田愛平;體內(nèi)及體外研究IL-6在肝細(xì)胞肝癌血管再生中的調(diào)控作用[D];蘭州大學(xué);2014年

6 李曉鵬;垂體瘤出血壞死臨床特征分析[D];華中科技大學(xué);2014年

7 谷春;冠脈不穩(wěn)定斑塊生物標(biāo)志物及其調(diào)節(jié)機(jī)制的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2015年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 張翔;RABEX-5信號通路對乳腺癌增殖、轉(zhuǎn)移的影響及機(jī)理探討[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年

2 吳海龍;海參體壁中膠原蛋白酶的研究[D];集美大學(xué);2013年

3 高雪萍;MicroRNA-214對大鼠心肌梗死后心肌纖維化的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2014年

4 趙華;Ki-67、PTTG、VEGF與垂體瘤卒中的相關(guān)性[D];山東大學(xué);2014年

5 張妤;腺苷預(yù)處理對腦缺血再灌注損傷大鼠HIF-1α、VEGF、EPO表達(dá)的影響[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院;2014年

6 于利君;垂體瘤卒中的臨床研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2014年

7 張爍;慢性心力衰竭患者血清胱抑素C水平與心室重塑的相關(guān)性研究[D];皖南醫(yī)學(xué)院;2014年

本文編號：1009714