目的:建立中空纖維細(xì)胞捕獲-高效液相色譜法(Hollow fibre cell fishing with high performance liquid chromatography,HFCF-HPLC)及中空纖維液相微萃取-高效液相色譜法(Hollow fibre liquid phase microextraction with HPLC,HFLPME-HPLC);將HFCF-HPLC和HFLPME-HPLC結(jié)合研究半枝蓮中黃酮類和酚酸類在體外的抗腎癌活性和燈盞花素注射液中野黃芩苷(含量>85%,半枝蓮的主要活性成分)及其代謝物野黃芩素在體內(nèi)的抗肝癌、腎癌活性。方法:將種植有人腎癌ACHN細(xì)胞或充滿ACHN細(xì)胞膜和細(xì)胞器混懸液的中空纖維插入到半枝蓮醇提或者水提液中,篩選和鑒定半枝蓮中的抗腎癌黃酮類活性成分野黃芩苷、黃芩苷、木犀草素、芹菜素、漢黃芩素等和酚酸類活性成分原兒茶酸等,并結(jié)合HPLC,確定它們的結(jié)構(gòu),研究它們與ACHN細(xì)胞的結(jié)合能力及結(jié)合部位,探討它們與靶點(diǎn)的作用特點(diǎn)。將內(nèi)腔充滿辛醇的中空纖維插入到半枝蓮水提液中,萃取、富集和濃縮半枝蓮中篩選出的黃酮類和酚酸類活性成分...

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1HFCF-HPLC過程及機(jī)理圖

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文保持37°C，檢測波長為277nm，進(jìn)樣量為20μL。.2.2HFCF-HPLC和HFLPME-HPLC操作步驟將7mL半枝蓮水提物或者85%乙醇提取物(v/v)置于10mL平底小瓶（內(nèi)含8mm4mm攪拌子）中，....

圖1-2中空纖維內(nèi)表面顯微圖（A）充滿培養(yǎng)液；（B）種有ACHN細(xì)胞

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文2結(jié)果.1HFCF-HPLC過程.1.1纖維內(nèi)壁細(xì)胞的生長狀態(tài)為了表征細(xì)胞與中空纖維的結(jié)合，我們利用掃描電子顯微鏡檢查法在5kV，1000放大倍數(shù)下，掃描了種有ACHN細(xì)胞和培養(yǎng)液的纖維內(nèi)壁。圖1-2A是內(nèi)腔充滿培液的纖維內(nèi)表面顯微圖....

圖1-3標(biāo)品（a）和種植培養(yǎng)液（b）的中空纖維對樣品溶液中活性成分篩選的色譜圖

1-3標(biāo)品（a）和種植培養(yǎng)液（b）的中空纖維對樣品溶液中活性成分篩選的色譜1，原兒茶酸；F1，野黃芩苷；F2，黃芩苷；F3，木犀草素；F4，芹菜素；F5，漢黃芩性和陰性對照了驗(yàn)證該方法的可行性，我們課題組用MCF-7細(xì)胞對他莫昔芬（陽性對照辛（陰性對照）進(jìn)行篩選，測得他莫昔....

圖1-4ACHN細(xì)胞篩選紫杉醇的色譜圖

圖1-4ACHN細(xì)胞篩選紫杉醇的色譜圖a，空白；b，培養(yǎng)液篩選紫杉醇；c，ACHN細(xì)胞篩選紫杉醇.5重現(xiàn)性HFCF-HPLC法的重現(xiàn)性用活性化合物的保留時間（retentiontime，tR）和相積（relativepeakarea，RPA）的重現(xiàn)性來評估。相對....

本文編號：3959953