目的建立山楂葉標(biāo)準(zhǔn)湯劑HPLC指紋圖譜,并測定5種成分的含有量。方法山楂葉標(biāo)準(zhǔn)湯劑16%乙腈提取物的分析采用Agilent Extend-C₁₈色譜柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流動相0.2%甲酸水-乙腈,梯度洗脫;體積流量0.8 mL/min;柱溫30℃;檢測波長320 nm。結(jié)果 16批樣品指紋圖譜中有21個共有峰,相似度均大于0.95。綠原酸、牡荊素鼠李糖苷、牡荊素葡萄糖苷、蘆丁、金絲桃苷分別在4.5～286、13.0～840、4.5～286、 4.0～264、0.7～176μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=0.999 9),平均加樣回收率(RSD)分別為102.9%(1.5%)、101.1%(2.0%)、100.2%(1.7%)、100.4%(1.8%)、99.1%(2.0%)。結(jié)論該方法穩(wěn)定可靠,可用于山楂葉標(biāo)準(zhǔn)湯劑的質(zhì)量控制。

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圖116批樣品HPLC指紋圖譜

采用“中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)2004A版”對HPLC所得色譜圖進(jìn)行處理,以山東泰安樣品的色譜圖為參照,建立山楂葉標(biāo)準(zhǔn)湯劑HPLC指紋圖譜色譜疊加圖,對照圖譜以中位數(shù)法生成。見圖1。2.3.3相似度分析

圖216批樣品主成分分析圖

本實驗通過SPSS21.0進(jìn)行主成分分析,并對18個共有峰的峰面積進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理。以3個主成分分別作為X、Y、Z軸,通過投影可得到16批山楂葉標(biāo)準(zhǔn)湯劑主成分分析圖,見圖2。16批山楂葉標(biāo)準(zhǔn)湯劑分為3類,S1批為一類,S3和S7批為一批,其他為另一批。2.4.2聚類分析

圖316批樣品聚類樹狀圖

本實驗以18個共有峰為變量,采用SPSS21.0組間連接平方Euclidean距離的聚類方法,進(jìn)行聚類分析。結(jié)果見圖3。以類間距為指標(biāo),在15～25之間,S1為一類,其余批次為一類;10～15之間時S7批單獨成一類;0～8時S3為一類,其他為一類。2.4.3共有峰模式建立

圖413批樣品HPLC指紋圖譜共有模式

通過化學(xué)模式識別研究,從16批山楂葉藥材中篩選出S2、S4、S5、S6、S08～S16共13批藥材較穩(wěn)定,可用于山楂葉標(biāo)準(zhǔn)湯劑的質(zhì)量控制。將這13批色譜圖進(jìn)行相似度分析,建立了13批樣品的指紋圖譜共有模式,見圖4,共標(biāo)定出21個共有峰,相似度均大于0.95。見圖5。圖5山楂葉標(biāo)....

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