目的:用血清藥理學(xué)方法研究不同濃度黃芪補(bǔ)陽(yáng)還五湯對(duì)TLR4及LOX-1的表達(dá)影響,探討不同濃度黃芪補(bǔ)陽(yáng)還五湯防治動(dòng)脈粥樣硬化的機(jī)制。方法:1.12只體重為2kg±0.5kg的實(shí)驗(yàn)用雄性普通級(jí)家兔隨機(jī)分為空白組、中藥高、中、低劑量組,每組3只,分別以生理鹽水和高、中、低濃度黃芪的補(bǔ)陽(yáng)還五湯灌胃,每日一次,連續(xù)7天。于末次灌胃給藥1h后,心臟采血,離心后抽取上清液,并用0.22μm一次性濾器無(wú)菌過(guò)濾,置-80℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?.在無(wú)菌條件下,復(fù)蘇第三代人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,在37℃、5%C02條件下培養(yǎng)。3.人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,隨機(jī)分為6組,即正常組,模型組,西藥對(duì)照組,含高、中、低濃度黃芪的補(bǔ)陽(yáng)還五湯組,用LPS(1μg/ml)刺激人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,激活TLR4和LOX-1,并用不同濃度黃芪的補(bǔ)陽(yáng)還五湯含藥血清和阿托伐他汀進(jìn)行干預(yù),24h后收集細(xì)胞。用蛋白免疫印跡方法檢測(cè)TLR4和LOX-1的蛋白表達(dá)。結(jié)果:經(jīng)LPS刺激24h以后,模型組細(xì)胞TLR4及LOX-1蛋白表達(dá)明顯升高(與空白組比較P<0.01);經(jīng)藥物干預(yù)后各治療組細(xì)胞TLR4及LOX-1的蛋白明顯下降,其中西藥對(duì)照組效果最...

【文章頁(yè)數(shù)】：52 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 前言
第二章 材料和方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)藥物
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.4 主要設(shè)備和儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)分組
        2.2.2 含藥血清的制備
        2.2.3 人臍靜脈傳代內(nèi)皮細(xì)胞的復(fù)蘇和培養(yǎng)
        2.2.4 細(xì)胞計(jì)數(shù)
        2.2.5 分組干預(yù)
        2.2.6 蛋白免疫印跡方法
            (1) 主要試劑
            (2) 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的蛋白提取
            (3) 蛋白定量和變性
            (4) 分離膠和濃縮膠的制備
            (5) 具體的電泳操作方法與步驟為:
            (6) 轉(zhuǎn)膜和操作
            (7) 孵育和顯影
            (8) 量化分析
            (9) 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
第三章 結(jié)果
    3.1 含藥血清制備
    3.2 人臍靜脈傳代內(nèi)皮細(xì)胞
    3.3 蛋白免疫印跡法檢測(cè)TLR4的表達(dá)的影響
    3.4 蛋白免疫印跡法檢測(cè)Lox-1的表達(dá)的影響
第四章 討論
    4.1 TLR4與動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)聯(lián)
    4.2 內(nèi)皮細(xì)胞與動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)聯(lián)
    4.3 中藥含藥血清的研究
    4.4 陽(yáng)性對(duì)照組的選擇
    4.5 中醫(yī)“氣能行血”干預(yù)機(jī)理
    4.6 不同濃度黃芪的補(bǔ)陽(yáng)還五湯對(duì)TLR4及LOX-1的影響
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：3920533