目的:以AMPK-mTOR信號(hào)通路調(diào)控的自噬為靶點(diǎn),探討昆侖雪菊水提物對(duì)棕櫚酸所致INS-1細(xì)胞損傷保護(hù)作用的分子機(jī)制。方法:以大鼠胰島β細(xì)胞系INS-1細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)細(xì)胞,將細(xì)胞分為正常對(duì)照組、棕櫚酸組、不同濃度(0.1μg·mL^-1,5μg·mL^-1,10μg·mL^-1)昆侖雪菊水提物+棕櫚酸組、化合物C+10μg·mL^-1昆侖雪菊水提物+棕櫚酸組。采用Western blotting方法檢測細(xì)胞自噬標(biāo)志蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表達(dá)水平,AMPK-mTOR信號(hào)通路關(guān)鍵分子蛋白表達(dá)水平,探討昆侖雪菊水提物對(duì)AMPK-mTOR通路的調(diào)控作用。結(jié)果:昆侖雪菊水提物可顯著上調(diào)自噬標(biāo)志蛋白LC3-Ⅱ表達(dá)水平,提高LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比例激活自噬,明顯上調(diào)AMPK-mTOR信號(hào)通路中AMPK的磷酸化水平,抑制mTOR的磷酸化水平,上調(diào)TSC1蛋白表達(dá)水平,化合物C可以逆轉(zhuǎn)昆侖雪菊水提物對(duì)上述蛋白表達(dá)的調(diào)節(jié)。結(jié)論:昆侖雪菊水提物可通過調(diào)控AMPK-mTOR信號(hào)通路激活自噬,從而減輕棕櫚酸所致INS-1細(xì)胞損...

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圖1昆侖雪菊水提物對(duì)PA作用下INS-1細(xì)胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白的影響

昆侖雪菊為新疆地產(chǎn)藥用植物資源，在民間多作茶飲，常用于改善高血壓、高血脂、糖尿病等慢性疾病。作為藥食兩用植物，其在食品保健、醫(yī)藥學(xué)等方面具有很大研究開發(fā)價(jià)值。本課題組前期動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)昆侖雪菊可以降低糖尿病動(dòng)物血糖，改善胰島素抵抗，提高胰島素敏感性，抗氧化和保護(hù)胰島細(xì)胞，對(duì)2型....

圖3AMPK抑制劑對(duì)AMPK-mTOR信號(hào)通路的影響

圖2昆侖雪菊水提物對(duì)PA作用下INS-1細(xì)胞中AMPK-mTOR信號(hào)通路的影響AMPK-mTOR作為自噬過程中的重要調(diào)控途徑，在許多情況下，AMPK通過磷酸化激活ULK1進(jìn)而激活自噬聯(lián)級(jí)反應(yīng)，而mTOR則通過磷酸化抑制自噬的發(fā)生[15-17]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，昆侖雪菊水提物明顯....

圖2昆侖雪菊水提物對(duì)PA作用下INS-1細(xì)胞中AMPK-mTOR信號(hào)通路的影響

自噬是溶酶體降解受損的細(xì)胞器、蛋白質(zhì)聚集體以及回收營養(yǎng)物質(zhì)的一種分解代謝的過程。眾多研究提示，自噬在維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)，胰島β細(xì)胞含量及胰島素抵抗等方面發(fā)揮重要作用[10-13]。自噬可以保護(hù)胰島β細(xì)胞的結(jié)構(gòu)，維持胰島素的正常分泌和穩(wěn)態(tài)，減輕胰島β細(xì)胞氧化應(yīng)激，防止細(xì)胞凋亡以及清....

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