外周炎癥反應(yīng)是機體對侵入的細(xì)菌、病毒、寄生蟲等進行的一種防御性反應(yīng)。巨噬細(xì)胞是機體免疫系統(tǒng)的重要組成部分,具有多種免疫功能,是炎性反應(yīng)中的主要調(diào)節(jié)細(xì)胞,與腫瘤、外周炎癥疾病及代謝疾病等相關(guān)病癥有著密切的關(guān)系。當(dāng)宿主發(fā)生病原體感染后,一氧化氮(NO)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和白介素-6(IL-6)等炎癥因子釋放量顯著上升,增加巨噬細(xì)胞表面分子,誘導(dǎo)細(xì)胞免疫,殺滅病原微生物,在有效清除病原體方面起關(guān)鍵作用。但巨噬細(xì)胞的過度活化,會導(dǎo)致炎癥因子的大量釋放,引起周圍組織損傷,并與動脈粥樣硬化等疾病的發(fā)生具有重要關(guān)系。抑制巨噬細(xì)胞過度活化對抑制外周炎癥反應(yīng)有重要意義。本文考察了左旋箭毒堿、輪環(huán)藤堿、異粒枝堿三種雙芐基異喹啉類生物堿(BBI)對脂多糖(LPS)誘導(dǎo)小鼠巨噬細(xì)胞系RAW264.7細(xì)胞過度活化的抑制作用及機制。首先,培養(yǎng)RAW264.7小鼠巨噬細(xì)胞,采用四甲基偶氮唑鹽(MTT)法考察三種BBI(0.1-30μmol/L)單獨或與LPS(1μg/ml)聯(lián)合應(yīng)用對巨噬細(xì)胞存活率的作用,以排除藥物毒性作用造成的影響。結(jié)果表明,三種生物堿對LPS活化的巨噬細(xì)胞...

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
前言
    0.1 巨噬細(xì)胞(Macrophage, Mac)
    0.2 巨噬細(xì)胞過度活化在相關(guān)病癥中的作用
        0.2.1 巨噬細(xì)胞與腫瘤
        0.2.2 巨噬細(xì)胞與動脈粥樣硬化
        0.2.3 巨噬細(xì)胞與高血壓
        0.2.4 巨噬細(xì)胞在其它相關(guān)疾病中的作用
    0.3 LPS激活的巨噬細(xì)胞NO及炎癥因子釋放
    0.4 LPS激活的巨噬細(xì)胞[Ca²⁺]_i變化
    0.5 巨噬細(xì)胞激活與活性氧自由基產(chǎn)生
    0.6 雙芐基異喹啉類生物堿(BBI)的化學(xué)結(jié)構(gòu)、種類及重要藥理作用
    0.7 左旋箭毒堿、輪環(huán)藤堿、異粒枝堿的藥理作用研究進展
        0.7.1 左旋箭毒堿((-)-Curine)
        0.7.2 輪環(huán)藤堿(Cycleanine)
        0.7.3 異粒枝堿(Isochondodendrine)
第1章 三種雙芐基異喹啉類生物堿抑制巨噬細(xì)胞過度活化的藥效學(xué)研究
    1.1 實驗材料
        1.1.1 實驗用細(xì)胞系
        1.1.2 實驗藥品與試劑
        1.1.3 實驗儀器
    1.2 實驗方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)和藥物配制
        1.2.2 細(xì)胞存活率的測定--MTT法檢測
        1.2.3 亞硝酸鹽含量的測定--Griess法檢測
        1.2.4 ELISA法考察RAW264.7 細(xì)胞內(nèi)IL-1β、TNF-α、IL-6 釋放的變化
        1.2.5 統(tǒng)計學(xué)方法
    1.3 實驗結(jié)果
        1.3.1 LPS激活RAW264.7 巨噬細(xì)胞NO升高模型的建立
        1.3.2 三種雙芐基異喹啉類生物堿對RAW264.7 巨噬細(xì)胞存活率的影響
        1.3.3 三種雙芐基異喹啉類生物堿對RAW264.7 細(xì)胞NO釋放的影響
        1.3.4 三種雙芐基異喹啉類生物堿對LPS活化的RAW264.7 細(xì)胞IL-1β釋放的影響
        1.3.5 三種雙芐基異喹啉類生物堿對LPS活化的RAW264.7 細(xì)胞IL-6 釋放的影響
        1.3.6 三種雙芐基異喹啉類生物堿對LPS活化的RAW264.7 細(xì)胞TNF-α釋放的影響
    1.4 分析與討論
    1.5 小結(jié)
第2章 三種雙芐基異喹啉類生物堿抑制巨噬細(xì)胞過度活化的機制研究
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗用細(xì)胞系
        2.1.2 實驗藥品與試劑
        2.1.3 實驗儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 Western blot analysis法檢測巨噬細(xì)胞內(nèi)iNOS蛋白表達
        2.2.2 流式細(xì)胞儀檢測胞漿內(nèi)游離鈣離子
        2.2.3 NO清除作用(Nitric oxide-scavenging effect)的測定
        2.2.4 自由基清除作用
    2.3 實驗結(jié)果
        2.3.1 三種BBI對LPS活化的巨噬細(xì)胞內(nèi)iNOS蛋白表達的影響
        2.3.2 三種BBI對LPS過度活化的巨噬細(xì)胞內(nèi)[Ca²⁺]_i水平的影響
        2.3.3 BBI的NO清除作用
        2.3.4 三種BBI的自由基清除作用
    2.4 分析與討論
    2.5 小結(jié)
結(jié)論
致謝
參考文獻
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及參加科研情況



本文編號：3871908