目的:1、建立濾紙輔助細胞膜(Cell membrane-coated filter papers,CMFPs)垂釣的方法,應用于篩選天然產(chǎn)物中潛在的活性成分,為新藥研發(fā)提供新方法。2、從西蘭花種子中提取蘿卜硫素(Sulforaphane,SFN),為做成SFN制劑提供前期準備。方法:以兔紅細胞為原材料,用低滲溶脹法獲取紅細胞膜(Cell membranes,CMs)。以物理吸附的原理,將CMs固定于濾紙上。通過CMs溶液固定前后的差值,優(yōu)選出固定CMs量最大的濾紙。通過異硫氰酸熒光素(Fluorescein isothiocyanate,FITC)和細胞膜紅色熒光探針(1,1’-dioctadecyl-3,3,3’,3’-tetramethy-lindocarbocyanine perchlorate,Di I)對CMs染色,在倒置熒光顯微鏡下觀察CMs,CMFPs和濾紙的熒光,確定CMs可以被固定在濾紙上。以維拉帕米,硫脲混合藥液對CMFPs垂釣法進行選擇性評價。將CMFPs應用于垂釣白芷藥液中的潛在活性成分,與CMs垂釣的方法進行比較,并對活性成分進行網(wǎng)絡藥理學研究和分子對接評價...

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語/符號說明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、濾紙輔助細胞膜垂釣技術
    1.1 材料與儀器
        1.1.1 實驗試劑
        1.1.2 實驗儀器
    1.2 實驗方法
        1.2.1 CMs低滲溶脹破碎
        1.2.2 CMs的固定及上膜量的測定
        1.2.3 白芷提取液的準備
        1.2.4 CMs的FITC染色及DiI染色
        1.2.5 CMFPs垂釣
        1.2.6 CMs垂釣
        1.2.7 網(wǎng)絡藥理學分析
        1.2.8 活性成分與靶點的分子對接
    1.3 結(jié)果
        1.3.1 上膜量
        1.3.2 CMs熒光標記
        1.3.3 CMFPs垂釣法的選擇性評價
        1.3.4 CMFPs垂釣白芷提取液
        1.3.5 與CMs垂釣法比較
        1.3.6 網(wǎng)絡藥理學分析
        1.3.7 分子對接結(jié)果
    1.4 討論
    1.5 小結(jié)
二、蘿卜硫素提取初探
    2.1 材料與儀器
        2.1.1 實驗試劑
        2.1.2 實驗儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 SFN的粗提取
        2.2.2 高效液相色譜法
        2.2.3 酶解反應不同pH條件的考察
        2.2.4 SFN粗提取物的純化
        2.2.5 SFN純化物的鑒別
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 SFN粗提取物及標準品色譜圖
        2.3.2 標準曲線
        2.3.3 酶解反應不同pH條件的考察結(jié)果
        2.3.4 薄層色譜結(jié)果
        2.3.5 純化產(chǎn)物與標準品色譜圖對比
        2.3.6 SFN的純化得率
        2.3.7 質(zhì)譜圖結(jié)果
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述
    綜述參考文獻
致謝
個人簡歷



本文編號：3860645