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白藜蘆醇靶向周細(xì)胞抑制血管生成抗膠質(zhì)瘤作用的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2023-05-20 01:36
  目的探討白藜蘆醇對(duì)人腦膠質(zhì)瘤裸鼠原位移植模型的生存狀況的影響及如何通過(guò)靶向周細(xì)胞對(duì)膠質(zhì)瘤血管生成發(fā)揮抑制作用,為白藜蘆醇的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)及臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法1.培養(yǎng)穩(wěn)定的U87膠質(zhì)瘤細(xì)胞,建立人腦膠質(zhì)瘤裸鼠原位移植模型,隨機(jī)分為2組:(1)RES藥物治療組;(2)CMC溶劑對(duì)照組,每組均為12只。模型建立成功1周后,開(kāi)始給藥:RES組,灌胃給RES 40mg/(kg·d);CMC組,按照0.2ml/(20g·d)等體積灌胃0.5%CMC。以上兩組連續(xù)給藥4周。2.每隔5天測(cè)量一次體重,觀察生命體征及模型動(dòng)物生存狀況。直到裸鼠出現(xiàn)惡病質(zhì)狀態(tài)處死裸鼠,采集標(biāo)本,并繪制生存曲線。3.計(jì)算兩組裸鼠原位移植腫瘤的大小,并觀察腫瘤細(xì)胞的病理形態(tài)。4.分別采用CD34、α-SMA標(biāo)記腫瘤微血管內(nèi)皮細(xì)胞和周細(xì)胞,通過(guò)免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)并分析移植瘤中微血管密度(Microvessel density,MVD),即CD34+-MVD和微血管周細(xì)胞數(shù)密度(microvascular pericyte number density,MPND)。5.計(jì)算CD34+和α-SMA+免疫組化染色反應(yīng)分?jǐn)?shù)(imm...

【文章頁(yè)數(shù)】:68 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
縮略詞對(duì)照表
摘要
Abstract
前言
材料和方法
    1 材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 細(xì)胞株
        1.3 實(shí)驗(yàn)藥物及材料
        1.4 藥物配制
        1.5 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.6 實(shí)驗(yàn)試劑
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2 人腦膠質(zhì)瘤裸鼠原位移植造模
        2.3 動(dòng)物分組及給藥
        2.4 采集標(biāo)本
        2.5 組織包埋和切片
        2.6 蘇木素-伊紅(HE)染色
        2.7 免疫組化染色步驟及分析
        2.8 電鏡標(biāo)本處理步驟
    3 統(tǒng)計(jì)分析
結(jié)果
    1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生存狀況及生存曲線分析
        1.1 白藜蘆醇對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重的影響
        1.2 白藜蘆醇對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生存時(shí)間的影響
    2 腫瘤大體標(biāo)本及HE染色結(jié)果
        2.1 大體標(biāo)本觀察
        2.2 HE染色結(jié)果
    3 免疫組化結(jié)果
        3.1 微血管密度計(jì)數(shù)
        3.2 免疫組化染色反應(yīng)分?jǐn)?shù)
    4 周細(xì)胞電鏡超微結(jié)構(gòu)
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄1
    參考文獻(xiàn)
附錄2
附錄3



本文編號(hào):3820286

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