目的:探究知母皂苷BⅡ(TBⅡ)對破骨細胞分化過程中核轉錄因子-κB受體活化因子配基(RANKL),RANK,原癌基因(C-FOS)基因表達量的影響。方法:利用分子對接軟件LeDock對TBⅡ分別與RANKL,RANK和C-FOS進行分子對接打分。RAW264.7細給予可溶性RANKL(sRANKL)干預,設立空白組,sRANKL組(模型組),淫羊藿苷(Ica)組,TBⅡ低劑量組(2μmol·L-1),TBⅡ中劑量組(4μmol·L-1),TBⅡ高劑量組(8μmol·L-1)。相應試劑盒檢測破骨細胞分化的標志性酶(TRAP),實時熒光定量聚合酶鏈式反應(Real-time PCR)檢測C-FOS,與其上游RANKL/RANK和下游活化T細胞核因子胞質1型(NFATC1)表達量,以及骨保護素OPG的表達量。結果:分子對接打分結果分別為-11.86,-11.38,-12.34 kcal·mol-1,TBⅡ能夠與RANKL,RANK和C-FOS結合。與正常組比較,模型組TRAP含量顯著升高(P<0.01);與模型組比較,各給藥組顯著降低TRAP含量(P<0.01),且TBⅡ呈劑量...

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【文章目錄】：
1 材料
    1.1 單體和試劑
    1.2 細胞
    1.3 儀器
2 方法
    2.1 分子對接
    2.2 主要試劑的配置
        2.2.1 sRANKL母液的配制
        2.2.2 MTT母液的配制
        2.2.3 TBⅡ母液的配制
        2.2.4 Ica母液的配制
    2.3實驗細胞的分組與給藥
    2.4 MTT比色法檢測細胞存活率
    2.5 RAW264.7細胞的抗酒石酸酸性磷酸酶含量的測定
    2.7 統(tǒng)計學處理
3 結果
    3.1 分子對接結果
    3.2 sRANKL誘導RAW264.7細胞分化條件的確定
    3.3 對RAW264.7細胞增殖活性的影響
    3.4 對RAW264.7細胞TRAP水平的影響
    3.5 對RAW264.7細胞RANKL,RANK,C-FOS,NFATC1,OPG mRNA表達的影響
4 討論



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