目的:1、比較消癌平及其單體通關藤皂苷G、H、I的胚胎發(fā)育毒性大小,闡述消癌平的胚胎發(fā)育毒性機制;2、評價消癌平的抗腫瘤活性和比較消癌平及其單體通關藤皂苷G、H、I的抗炎活性大小;3、通關藤皂苷H的毒/效的相關性分析。方法:1、發(fā)育毒性研究。(1)胚胎發(fā)育量-毒關系。將發(fā)育至受精后6小時(6 hours post fertilization,hpf)的野生型AB系斑馬魚胚胎,按照預實驗設定不同暴露濃度,持續(xù)暴露120小時,分別于暴露后24、48、72、96、120小時(hour post exposure,hpe)觀察并記錄死亡率和孵化率。消癌平和通關藤皂苷G、H、I均按照上述同樣方法處理。(2)消癌平發(fā)育毒性機制研究。消癌平暴露6 hpf的胚胎持續(xù)120小時,進行斑馬魚畸形率的統(tǒng)計、體長測量、心率測定、形態(tài)評分和行為學檢測,同樣時間點收集樣本用于病理切片觀察心臟、肝臟的變化,透射掃描電鏡觀察心肌纖維和心肌細胞內細胞器的變化,實時定量聚合酶鏈式反應(Real-time Quantitative PCR,RT-PCR)檢測氧化應激、內質網應激、凋亡和wnt/β-cetanin通路相關基因...

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【學位級別】：碩士

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前言
第一章 消癌平和通關藤皂苷G、H和I的發(fā)育毒性研究
    第一節(jié) 消癌平和通關藤皂苷G、H和I對斑馬魚胚胎的發(fā)育毒性研究
        1 材料與方法
            1.1 材料與設備
            1.2 方法
        2 結果
            2.1 通關藤皂苷G、H、I的含量測定結果
            2.2 消癌平暴露后對斑馬魚胚胎發(fā)育毒性的影響
            2.3 通關藤皂苷G的對斑馬魚胚胎發(fā)育毒性的影響
            2.4 通關藤皂苷H對斑馬魚胚胎發(fā)育毒性的影響
            2.5 通關藤皂苷I對斑馬魚胚胎發(fā)育毒性的影響
        3 討論
        4 結論
    第二節(jié) 消癌平對斑馬魚胚胎的發(fā)育毒性作用機制研究
        1 材料與方法
            1.1 材料與設備
            1.2 方法
        2 結果
            2.1 消癌平連續(xù)暴露120h后對斑馬魚發(fā)育的影響
            2.2 消癌平連續(xù)暴露120h后對斑馬魚行為學的影響
            2.3 消癌平連續(xù)暴露120h后對斑馬魚體內ROS的含量檢測
            2.4 消癌平連續(xù)暴露120h后對斑馬魚體內MDA、CAT、GSH和T-SOD的檢測
            2.5 從組織病理切片角度考察消癌平對斑馬魚不同器官的毒性
            2.6 消癌平連續(xù)暴露120h后對斑馬魚產生的心臟毒性
            2.7 消癌平連續(xù)暴露120h后對斑馬魚發(fā)育毒性相關基因表達的影響
                2.7.1 內質網應激相關基因的變化
                2.7.2 氧化應激相關基因的變化
                2.7.3 凋亡相關基因的變化
                2.7.4 wnt通路相關基因的變化
        3 討論
        4 結論
第二章 消癌平和通關藤皂苷G、H、I的抗炎作用研究
    1 材料與方法
        1.1 材料與設備
        1.2 方法
    2 結果
        2.1 染色前后MDA-MB-231細胞形態(tài)圖
        2.2 注射腫瘤細胞后48小時的斑馬魚形態(tài)
        2.3 消癌平抑制斑馬魚體內腫瘤細胞遷移
        2.4 消癌平和通關藤皂苷G、H、I的抗炎活性評價
    3 討論
    4 結論
第三章 通關藤皂苷H的毒/效相關性研究
    1 材料與方法
        1.1 材料與設備
        1.2 方法
    2 結果
        2.1 TH對正常生理狀態(tài)下斑馬魚幼魚的發(fā)育影響
        2.2 TH對LPS誘導的炎癥狀態(tài)下斑馬魚幼魚的發(fā)育影響
        2.3 TH的毒效相關性
        2.4 TH的抗炎效應
        2.5 TH對抗炎相關基因的表達影響
    3 討論
    4 結論
參考文獻
展望
全文創(chuàng)新點
綜述
    參考文獻
致謝
在學期間承擔/參與的科研課題與研究成果
個人簡歷



本文編號：3818016