目的:探討橙皮素(HES)對血小板源性生長因子-BB(PDGF-BB)誘導(dǎo)的大鼠胸主動脈血管平滑肌細胞(VSMCs)表型轉(zhuǎn)化的影響。方法:4周齡健康雄性SD大鼠1只,5%水合氯醛麻醉后,采用組織塊貼壁法提取大鼠胸主動脈原代VSMCs并培養(yǎng),取對數(shù)生長期細胞,采用細胞免疫熒光化學(xué)法鑒定VSMCs平滑肌肌動蛋白-α(α-SMA),采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)試劑盒檢測2、5、10、25及50μg/L PDGF-BB和10、50、100、150、200、250及300μmol/L的HES對VSMCs增殖活性的影響,篩選PDGF-BB最佳造模條件和HES最佳干預(yù)濃度;VSMCs分為對照組(0μg/L PDGF-BB)、造模組(25μg/L PDGF-BB)及加藥組(25μg/L PDGF-BB+100μmol/L橙皮素),采用劃痕實驗檢測各組VSMCs的細胞遷移能力,采用Western blot檢測各組VSMCs的α-SMA、平滑肌22α(SM22α)、彈性蛋白原(ELN)及增殖細胞核抗原(PCNA)蛋白的表達。結(jié)果:原代平滑肌細胞呈長梭形,傳代2 d后VSMCs有...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 實驗動物
        1.1.2 主要試劑和儀器
    1.2 方法
        1.2.1 大鼠原代胸主動脈VSMCs的提取
        1.2.2 大鼠原代胸主動脈VSMCs的培養(yǎng)與α-SMA的鑒定
        1.2.3 CCK-8法篩選藥物濃度及細胞分組
        1.2.4 劃痕實驗檢測VSMCs的細胞遷移
        1.2.5 Western blot檢測VSMCs中α-SMA、SM22α、ELN和PCNA蛋白的表達
    1.3 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 原代平滑肌細胞的培養(yǎng)及鑒定
    2.2 PDGF-BB對VSMCs的增殖作用
    2.3 HES對PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs增殖的作用
    2.4 HES對PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs遷移能力的影響
    2.5 α-SMA和SM22α蛋白表達
    2.6 ELN和PCNA蛋白表達
3 討論



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