實驗目的本課題運用血清藥理學方法,觀察葆菁口服液含藥血清對體外培養(yǎng)人正常黑素細胞體系中黑素合成,及其對黑素細胞與角質形成細胞共培養(yǎng)體系中黑素小體轉運的影響,并探討其作用機制,為葆菁口服液改善黃褐斑癥狀提供理論依據(jù)。實驗方法血清藥理學方法制備中藥含藥血清。建立人正常黑素細胞體外培養(yǎng)體系,分別采用MTT比色法、酪氨酸酶多速率氧化法、NaOH裂解法測定黑素細胞增殖、酪氨酸酶活性、黑素含量,RT-PCR測定酪氨酸酶mRNA表達量;建立體外黑素細胞與角質形成細胞共培養(yǎng)體系,pull-down法檢測黑素細胞RhoA及Rac1蛋白的表達情況、應用流式細胞術檢測黑素小體轉運的情況。以維生素C作為對照組。應用SPSS16.0軟件對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。實驗結果1MTT法測定黑素細胞增殖,與生理鹽水組相比較,葆菁口服液組、維生素C組對黑素細胞的增殖的影響無明顯差異,組間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。NaOH裂解法測定黑素含量,與生理鹽水組比較,葆菁口服液、維生素C含藥血清可降低黑素合成量,兩組間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。多巴氧化法對酪氨酸酶活性進行測定,與生理鹽水組比較,葆菁口服...

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
前言
第一章 理論研究
    1. 中醫(yī)學對黃褐斑的認識
        1.1 黃褐斑病名的歷史沿革
        1.2 黃褐斑的病因
        1.3 黃褐斑的病機
        1.4 黃褐斑的中醫(yī)治療
    2. 西醫(yī)對黃褐斑的認識
        2.1 西醫(yī)對黃褐斑病因及發(fā)病機制的研究
        2.2 西醫(yī)對黃褐斑治療方法的研究
    3. 當歸芍藥散治療黃褐斑的研究
        3.1 當歸芍藥散治療黃褐斑的臨床研究
        3.2 當歸芍藥散治療黃褐斑的基礎研究
        3.3 當歸芍藥散所涉及單味中藥的研究
第二章 實驗研究
    第一部分 葆菁口服液含藥血清對黑素合成的影響
        1 實驗材料
            1.1 實驗動物
            1.2 藥物和試劑
            1.3 主要儀器
        2 實驗方法
            2.1 中藥含藥血清的制備
            2.2 黑素細胞的培養(yǎng)
            2.3 細胞含藥血清處理及數(shù)據(jù)測定
        3 統(tǒng)計學處理
        4 結果
            4.1 黑素細胞鑒定
            4.2 葆菁口服液含藥血清對黑素細胞增殖的影響
            4.3 葆菁口服液含藥血清對黑素含量的影響
            4.4 葆菁口服液含藥血清對TYR活性及TYRmRNA表達的影響
    第二部分 葆菁口服液含藥血清對黑素轉運的影響
        1 實驗材料
            1.1 實驗試劑
            1.2 實驗儀器
        2 實驗方法
            2.1 含藥血清的制備、細胞原代培養(yǎng)、黑素細胞培養(yǎng)
            2.2 角質形成細胞培養(yǎng)
            2.3 角質形成細胞的鑒定
            2.4 顯微鏡下觀察黑素細胞樹突生成的情況
            2.5 Pull-down法檢黑素細胞RhoA和Rac1蛋白的表達
            2.6 流式細胞術檢測共培養(yǎng)細胞體系中黑素轉運的情況
        3 統(tǒng)計
        4 結果
            4.1 角質形成細胞鑒定
            4.2 葆菁口服液對黑素細胞形態(tài)的影響
            4.3 葆菁口服液含藥血清對RhoA、Rac1蛋白表達的影響
            4.4 葆菁口服液含藥血清對黑素轉運的影響
第三章 討論
    1. 導師對黃褐斑的病機認識及特色治療
        1.1 整體觀念、注重肝脾
        1.2 肝脾同治、氣血同調
    2. 葆菁口服液組方特色
        2.1 配伍意義
        2.2 復方特色
    3. 研究結果分析
        3.1 葆菁口服液含藥血清對黑素細胞增殖、黑素合成、酪氨酸酶活性及其mRNA表達的影響
        3.2 葆菁口服液含藥血清對樹突形態(tài)、RhoA、Rac1蛋白表達及黑素小體轉運的影響
    4. 不足與展望
參考文獻
附錄
攻讀碩士學位期間取得的學術成果
致謝



本文編號：3767191